| 摘要 | 第1-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 Musclin基因的研究进展 | 第9-10页 |
| ·Musclin的发现与结构 | 第9页 |
| ·Musclin的分布 | 第9-10页 |
| ·Musclin的生物学功能 | 第10页 |
| 2 Smad3的研究进展 | 第10-12页 |
| ·Smad3的发现与结构 | 第10-11页 |
| ·Smad3的信号通路及功能 | 第11-12页 |
| 3 MEF2基因的研究进展 | 第12-15页 |
| ·MEF2基因的发现及结构 | 第12-13页 |
| ·MEF2基因的分布 | 第13页 |
| ·MEF2基因的几种信号通路及生物学功能 | 第13-15页 |
| 4 孕激素与肌肉生长发育 | 第15-18页 |
| ·孕激素概述 | 第15页 |
| ·孕激素受体PR的结构 | 第15-16页 |
| ·孕激素的作用机制 | 第16-17页 |
| ·孕激素对肌肉生长发育的影响 | 第17-18页 |
| 本研究的立项依据和研究意义 | 第18-19页 |
| 试验一 小鼠Musclin cDNA的克隆及其真核表达载体的构建 | 第19-31页 |
| 1 材料和方法 | 第19-20页 |
| ·试验动物、菌株和质粒载体 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·主要仪器及设备 | 第20页 |
| 2 试验方法 | 第20-25页 |
| ·小鼠Musclin cDNA的扩增及克隆 | 第20-22页 |
| ·小鼠pcDNA3.1(+)-Musclin真核表达载体的构建 | 第22-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-29页 |
| ·小鼠骨骼肌RNA的提取 | 第25页 |
| ·RT-PCR扩增小鼠骨骼肌中Musclin基因序列 | 第25-26页 |
| ·小鼠骨骼肌中Musclin cDNA序列的T-A克隆及鉴定 | 第26-28页 |
| ·pcDNA3.1(+)-Musclin真核表达载体的构建和酶切测序的鉴定 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| ·小鼠骨骼肌总RNA提取的注意事项 | 第29-30页 |
| ·关于PCR反应条件 | 第30页 |
| ·构建载体时双酶切位点的选择 | 第30-31页 |
| 试验二 孕激素对小鼠Musclin及其它肌肉相关基因表达的调控 | 第31-53页 |
| 1 材料和方法 | 第31-33页 |
| ·试验动物和激素 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第31-33页 |
| ·主要仪器及设备 | 第33页 |
| 2 试验方法 | 第33-38页 |
| ·试验动物的分组及孕激素注射 | 第33页 |
| ·小鼠骨骼肌RNA的提取及反转录合成cDNA | 第33页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第33-35页 |
| ·Western blotting | 第35-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-50页 |
| ·试验动物体重变化 | 第38页 |
| ·Musclin荧光定量PCR和Western Blotting结果 | 第38-42页 |
| ·Smad3和MEF2(A、C、D)基因荧光定量PCR结果 | 第42-49页 |
| ·Musclin与Smad3、MEF2基因表达的相关性 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·关于实时荧光定量PCR反应 | 第50页 |
| ·免疫印迹条件的优化 | 第50页 |
| ·孕激素对Musclin基因表达的调控 | 第50-51页 |
| ·孕激素对Smad3和MEF2基因表达的调控 | 第51-52页 |
| ·Musclin基因表达与Smad3、MEF2基因表达之间的相关性 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| Abstract | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
