| 英文缩写词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-17页 |
| 英文摘要 | 第17-26页 |
| 1 文献综述 | 第26-49页 |
| 1．1 ClC通道的生物学及相关疾病 | 第26-37页 |
| 1．1．1 ClC通道的分类 | 第26-28页 |
| 1．1．2 ClC通道的结构和典型特性 | 第28-32页 |
| 1．1．3 ClC通道的生理作用和相关疾病 | 第32-37页 |
| 1．1．4 结论 | 第37页 |
| 1．2 ClC通道基因转录中剪接的多样性及通道亚型 | 第37-39页 |
| 1．3 ClC-1的研究进展评价 | 第39-47页 |
| 1．4 C6细胞氯离子通道的研究现状分析 | 第47-49页 |
| 2 问题提出及本文的研究目标和内容 | 第49-52页 |
| 3 材料和方法 | 第52-69页 |
| 3．1 细胞的培养 | 第52页 |
| 3．2 离子通道cDNA的克隆方法 | 第52-62页 |
| 3．2．1 引物设计 | 第52-53页 |
| 3．2．2 细胞总mRNA的提取 | 第53-54页 |
| 3．2．3 3'端的扩增 | 第54页 |
| 3．2．4 5'端的扩增 | 第54-55页 |
| 3．2．5 中间段的分段扩增 | 第55-56页 |
| 3．2．6 cDNA的电泳、提纯和测序 | 第56-57页 |
| 3．2．7 GenBank数据库检索与扩增片段的确认 | 第57页 |
| 3．2．8 cDNA质粒载体的构建和cDNA的亚克隆 | 第57-58页 |
| 3．2．9 内切酶的设计与cDNA片段的连接策略 | 第58-61页 |
| 3．2．10 质粒的扩增和提纯 | 第61-62页 |
| 3．3 通道基因的体外转录 | 第62-63页 |
| 3．4 非洲爪蟾卵母细胞的分离和培养 | 第63-66页 |
| 3．4．1 爪蟾的饲养 | 第63页 |
| 3．4．2 卵母细胞分离和培养用液体 | 第63-64页 |
| 3．4．3 手术方法 | 第64页 |
| 3．4．4 卵母细胞的分离 | 第64页 |
| 3．4．5 卵母细胞的挑选 | 第64-65页 |
| 3．4．6 卵母细胞的培养 | 第65-66页 |
| 3．5 mRNA的纳升注射与表达 | 第66页 |
| 3．6 双电极电压钳电生理实验 | 第66-67页 |
| 3．6．1 记录的条件和方法 | 第66-67页 |
| 3．6．2 记录用液体 | 第67页 |
| 3．7 数据分析的工具和方法 | 第67-69页 |
| 4 结果 | 第69-124页 |
| 4．1 大鼠ClC-1的五个通道亚型的cDNA序列及氨基酸序列 | 第69-82页 |
| 4．1．1 cDNA3'端的获取 | 第69-71页 |
| 4．1．2 cDNA近5'端片段的获取 | 第71-72页 |
| 4．1．3 cDNA中间片段的获取 | 第72-76页 |
| 4．1．4 片段的连接和大鼠ClC-1的5个通道亚型全长cDNA的获取 | 第76-77页 |
| 4．1．5 大鼠ClC-1的5个通道亚型的氨基酸序列特征 | 第77-81页 |
| 4．1．6 cDNA的体外转录得到mRNA | 第81-82页 |
| 4．2 大鼠ClC-1五个通道亚型基因的表达和电生理特性 | 第82-95页 |
| 4．2．1 M5的通道电流与离子选择性 | 第83-85页 |
| 4．2．2 M5的稳态相对开放率对电压和氯离子浓度的依赖性 | 第85-89页 |
| 4．2．3 9-AC对M5的阻断 | 第89-92页 |
| 4．2．4 M5的通道电流对细胞外pH的依赖性 | 第92-95页 |
| 4．3 大鼠WT ClC-1的通道电流与离子选择性 | 第95-97页 |
| 4．4 大鼠WT ClC-1对电压和细胞外氯离子浓度的依赖性 | 第97-100页 |
| 4．5 细胞外Ⅰ~-对大鼠WT ClC-1的阻断 | 第100-102页 |
| 4．6 9-AC对大鼠WT ClC-1的阻断 | 第102-104页 |
| 4．7 细胞外pH的变化对大鼠WT ClC-1的影响 | 第104-112页 |
| 4．7．1 细胞外pH的变化对通道电流的影响 | 第104-105页 |
| 4．7．2 细胞外pH的变化对通道相对开放率的影响 | 第105-109页 |
| 4．7．3 细胞外Ⅰ~-在不同pH下的阻断作用 | 第109-111页 |
| 4．7．4 细胞外9-AC在不同pH下的阻断作用 | 第111-112页 |
| 4．8 通道亚型与大鼠WT ClC-1共同表达的通道的基本特性 | 第112-117页 |
| 4．9 WT ClC-1门控机理模型的建立与分析 | 第117-123页 |
| 4．10 通道电流长时间动态检测和记录软件的设计 | 第123-124页 |
| 5 讨论 | 第124-134页 |
| 5．1 ClC-1组织分布及作用的多样性 | 第124-125页 |
| 5．2 ClC-1基因转录中剪接多样性的机理 | 第125-126页 |
| 5．3 ClC-1结构与功能关系的进一步揭示 | 第126-127页 |
| 5．4 9-AC浓度依赖性阻断机制的分析 | 第127-128页 |
| 5．5 细胞外Ⅰ~-的浓度依赖性阻断和离子选择性原理 | 第128-129页 |
| 5．6 ClC-1存在可滴定的电压感受器 | 第129-130页 |
| 5．7 ClC-1的非均衡性的门控机理 | 第130-131页 |
| 5．8 结论和展望 | 第131-134页 |
| 参考文献 | 第134-147页 |
| 已经发表的论文目录 | 第147-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
