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绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 绪论第8-15页
   ·体细胞重编程第8-9页
   ·iPS细胞的研究进展与应用第9-13页
     ·iPS细胞的研究进展第9-10页
     ·iPS细胞的诱导因子第10-12页
     ·诱导因子的表达载体第12页
     ·诱导体细胞重编程的机制第12-13页
   ·iPS细胞的应用前景第13-14页
   ·本研究的目的意义第14-15页
2 绵羊Oct4的序列合成及分析第15-23页
   ·实验方法第15页
     ·绵羊Oct4编码区的序列合成第15页
     ·绵羊Oct4编码区的序列分析第15页
     ·绵羊Oct4蛋白生物信息学分析第15页
   ·实验结果第15-21页
     ·绵羊Oct4编码区序列第15页
     ·绵羊Oct4基因生物学分析第15-17页
     ·绵羊Oct4蛋白生物学分析第17-21页
   ·讨论第21-22页
   ·本章小结第22-23页
3 绵羊Sox2逆转录病毒载体的构建和序列分析第23-44页
   ·实验材料第23-25页
     ·实验细胞及菌株第23页
     ·实验仪器设备第23页
     ·试剂来源第23页
     ·实验用药品的配制第23-25页
   ·试验方法第25-33页
     ·胎绵羊基因组DNA的提取第25-26页
     ·绵羊Sox2引物设计及合成第26页
     ·绵羊Sox2诱导因子的扩增与回收第26-27页
     ·特异PCR片段与载体连接第27页
     ·质粒DNA的转化与提取第27-28页
     ·重组质粒的鉴定第28-29页
     ·绵羊Sox2基因编码区的序列分析第29页
     ·绵羊Sox2蛋白生物信息学分析第29页
     ·绵羊Sox2逆转录病毒载体的构建第29-30页
     ·绵羊Sox2假病毒颗粒的包装第30-32页
     ·绵羊Sox2逆转录假病毒的侵染及Sox2基因转录水平的检测第32-33页
   ·实验结果第33-42页
     ·绵羊Sox2基因的PCR扩增第33-34页
     ·pMD18-T simple-Sox2重组质粒的鉴定第34页
     ·绵羊Sox2基因DNA测序结果第34页
     ·绵羊Sox2基因生物学分析第34-36页
     ·绵羊Sox2蛋白生物学分析第36-40页
     ·逆转录病毒载体重组质粒的鉴定第40-41页
     ·逆转录病毒载体的包装第41页
     ·逆转录假病毒侵染能力及Sox2基因转录水平的检测第41-42页
   ·讨论第42-43页
   ·本章小结第43-44页
结论第44-45页
参考文献第45-49页
附录第49-55页
攻读学位期间发表的学术论文第55-56页
致谢第56-57页

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