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日本血吸虫应急分子热休克蛋白70(SjHSP70)免疫生物学功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 引言第14-19页
   ·日本血吸虫的生活史及流行病学第14页
     ·日本血吸虫的生活史第14页
     ·日本血吸虫病的流行病学特点第14页
   ·血吸虫疫苗的研究第14-15页
   ·血吸虫抗原诱导的免疫应答的一般模式第15-16页
   ·RA 疫苗诱导的应答及其效应机制第16-17页
   ·HSP70 分子的结构及其生物学功能第17-18页
     ·HSP70 分子的结构特征第17页
     ·HSP70 分子的生物学功能第17-18页
   ·日本血吸虫 HSP70(SjHSP70)的研究第18-19页
第二章 SjHSP70 的原核表达及免疫原性的初步分析第19-27页
   ·实验材料和方法第19-23页
     ·菌株和载体第19页
     ·主要试剂第19页
     ·引物第19-20页
     ·PET28a-SjHSP70 重组载体的构建第20-21页
     ·rSjHSP70 重组蛋白的表达第21-22页
     ·rSjHSP70 重组蛋白的分离纯化第22页
     ·rSjHSP70 重组蛋白的免疫原性的鉴定第22-23页
   ·实验结果第23-25页
     ·PET28a-SjHSP70 重组载体的构建第23-24页
     ·rSjHSP70 重组蛋白的表达与纯化第24-25页
     ·rSjHSP70 重组蛋白的免疫原性的鉴定第25页
   ·讨论第25-27页
第三章 SjHSP70 在辐照致弱(RA)和正常童虫细胞表面的表达研究第27-32页
   ·实验材料和方法第27-28页
     ·尾蚴第27页
     ·主要试剂和仪器第27页
     ·不同期别的辐照和正常尾蚴转化而来的日本血吸虫童虫的收集第27-28页
     ·对 SjHSP70 在辐照和正常 Sj 尾蚴转化而来的日本血吸虫童虫细胞表面的表达研究第28页
   ·实验结果第28-31页
   ·讨论第31-32页
第四章 SjHSP70 在昆虫细胞 Sf9 中的表达、纯化和鉴定第32-38页
   ·材料与方法第32-34页
     ·菌株、载体和细胞第32页
     ·主要试剂第32页
     ·引物设计与合成第32-33页
     ·pFastBacHTA-SjHSP70 转移载体的构建第33页
     ·重组穿梭质粒 reBacmid-SjHSP70 的构建和鉴定第33页
     ·reBacmid-SjHSP70 转染 Sf9 昆虫细胞第33页
     ·重组的 SjHSP70 蛋白的检测第33-34页
   ·结果第34-36页
     ·pFastBacHTA-SjHSP70 转移载体的构建第34页
     ·reBacmid-SjHSP70 重组杆状病毒载体的构建第34-35页
     ·间接免疫荧光(IFA)检测 SjHSP70 蛋白在 Sf9 细胞中的表达第35页
     ·SjHSP70 蛋白的纯化第35-36页
     ·纯化蛋白的 Western Blotting 分析第36页
   ·讨论第36-38页
第五章 SjHSP70 活化小鼠骨髓来源的 DC 表型成熟的鉴定第38-43页
   ·实验材料与方法第38-40页
     ·实验动物第38页
     ·主要试剂和仪器第38页
     ·DC 细胞的制备第38-40页
     ·SjHSP70 刺激 DC第40页
     ·流式细胞术检测 DC 表面标记第40页
   ·实验结果第40-41页
   ·讨论第41-43页
第六章 SjHSP70 佐剂功能的初步鉴定第43-49页
   ·实验材料和方法第43-44页
     ·实验动物第43页
     ·主要试剂和仪器第43页
     ·SjHSP70 蛋白和 Sj22.6 蛋白联合小鼠及抗血清制备第43-44页
     ·小鼠攻虫试验第44页
     ·间接 ELISA 法检测特异性的 IgG1、IgG2a 抗体第44页
   ·实验结果第44-47页
     ·间接 ELISA 法检测特异性的 IgG1、IgG2a 抗体第44-46页
     ·SjHSP70 和 Sj22.6 在 BALB/c 和 C57BL 模型上的动物保护性试验第46-47页
   ·讨论第47-49页
第七章 全文总结第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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