| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·细胞核移植研究进展 | 第13页 |
| ·核移植技术的应用前景 | 第13-14页 |
| ·体细胞核移植的重编程 | 第14-16页 |
| ·DNA 甲基化 | 第14-16页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第16页 |
| ·抽提物诱导体细胞重编程 | 第16-21页 |
| ·诱导体细胞重编程的经典方法 | 第17-18页 |
| ·细胞抽提物诱导 | 第18-19页 |
| ·抽提物诱导重编程的进展 | 第19-21页 |
| ·抽提物诱导在动物克隆上的应用 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 爪蟾卵母细胞抽提物的提取 | 第23-32页 |
| 前言 | 第23页 |
| ·试验材料 | 第23-25页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·试验仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂、溶液配制 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-27页 |
| ·非洲爪蟾超数排卵 | 第25-26页 |
| ·爪蟾卵母细胞内容物提取 | 第26页 |
| ·蛋白浓度的检测 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第27页 |
| ·试验结果 | 第27-30页 |
| ·爪蟾超数排卵 | 第27-28页 |
| ·爪蟾卵母细胞内容物提取 | 第28页 |
| ·抽提物蛋白含量测定 | 第28-29页 |
| ·抽提物聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛胎儿成纤维细胞重编程 | 第32-54页 |
| 前言 | 第32页 |
| ·试验材料 | 第32-35页 |
| ·细胞 | 第32页 |
| ·试验仪器 | 第32页 |
| ·主要试剂、溶液配制 | 第32-35页 |
| ·试验方法 | 第35-42页 |
| ·胎儿成纤维细胞培养 | 第35-36页 |
| ·生长曲线绘制和核型分析 | 第36-37页 |
| ·细胞透化浓度筛选 | 第37-38页 |
| ·抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞 | 第38页 |
| ·H3K9 相对免疫荧光染色 | 第38页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第38-39页 |
| ·Oct4 免疫荧光染色 | 第39页 |
| ·western blot 分析 | 第39-40页 |
| ·PCR 和 qPCR 检测 | 第40-42页 |
| ·试验结果 | 第42-51页 |
| ·和牛胎儿成纤维细胞系的建立和培养 | 第42页 |
| ·胎儿成纤维细胞的生物学观察 | 第42-43页 |
| ·透化剂浓度的筛选 | 第43-46页 |
| ·抽提物处理牛胎儿成纤维细胞 | 第46-47页 |
| ·H3K9 免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第48页 |
| ·Oct4 蛋白的表达分析 | 第48-50页 |
| ·抽提物处理细胞中多能性相关基因的表达检测 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 重编程和牛胎儿成纤维细胞克隆胚胎的制备 | 第54-65页 |
| 前言 | 第54页 |
| ·试验材料 | 第54-57页 |
| ·试验仪器 | 第54页 |
| ·主要试剂、溶液 | 第54-57页 |
| ·试验方法 | 第57-59页 |
| ·显微操作针的制备 | 第57页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟培养 | 第57页 |
| ·供体细胞准备 | 第57-58页 |
| ·卵母细胞去核 | 第58页 |
| ·无透明带融合法构建重构胚 | 第58页 |
| ·重构胚激活与培养 | 第58-59页 |
| ·试验结果 | 第59-62页 |
| ·卵母细胞去核 | 第59-60页 |
| ·供体细胞准备 | 第60页 |
| ·无透明带卵母细胞的融合 | 第60-61页 |
| ·不同激活方式对克隆效率影响 | 第61页 |
| ·不同供体细胞对克隆效率的影响 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |