| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-14页 |
| ·Th1 细胞简介 | 第10页 |
| ·Th1 细胞定义 | 第10页 |
| ·Th1 细胞主要的生物学功能 | 第10页 |
| ·两种鱼类干扰素 (IFN- )简介 | 第10-12页 |
| ·IFN- 2 的介绍 | 第10-11页 |
| ·IFN- rel 的介绍 | 第11-12页 |
| ·转录因子 T-bet 简介 | 第12页 |
| ·T-bet 的作用和功能 | 第12页 |
| ·鱼类中 T-bet 的研究近况 | 第12页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第12-14页 |
| 第二章 草鱼 IFN- rel 的原核表达、变复性、纯化及活性鉴定 | 第14-36页 |
| ·实验材料 | 第14-17页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·菌种和质粒 | 第14-15页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15页 |
| ·主要溶液配制 | 第15-17页 |
| ·实验方法与操作 | 第17-28页 |
| ·草鱼 IFN- rel 的原核表达质粒构建 | 第17-21页 |
| ·草鱼 IFN- rel (rgc IFN- rel)在原核中的诱导表达 | 第21-23页 |
| ·重组草鱼 IFN- rel(rgc IFN- rel)融合蛋白变复性 | 第23-25页 |
| ·草鱼 IFN- rel 生物学功能的研究 | 第25-28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·pET30a(+)-IFN- rel 表达质粒的构建和鉴定 | 第28-30页 |
| ·rgc IFN- rel 在原核中的诱导表达 | 第30-32页 |
| ·包涵体形式 rgcIFN- rel 的变复性 | 第32-33页 |
| ·原核表达 rgc IFN- rel 的生物学活性鉴定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 草鱼 IFN- rel 的真核过表达及生物学功能的研究 | 第36-43页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验方法与操作 | 第36-39页 |
| ·草鱼 IFN- rel 的真核表达质粒构建 | 第36-37页 |
| ·HEK293 细胞的培养 | 第37页 |
| ·转染 | 第37-38页 |
| ·蛋白样品的收集 | 第38页 |
| ·Western-blotting 分析 | 第38-39页 |
| ·真核表达蛋白的制备 | 第39页 |
| ·真核表达蛋白 IFN- rel 的生物学活性鉴定及功能研究 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-42页 |
| ·过表达蛋白 IFN- rel 的 Western-blotting 鉴定 | 第39-40页 |
| ·真核表达 rgcIFN- rel 的生物学活性鉴定 | 第40-41页 |
| ·真核表达 rgcIFN- rel 的生物学功能研究 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 草鱼 T-bet 的克隆鉴定与抗体验证 | 第43-51页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验方法与操作 | 第43-44页 |
| ·草鱼 T-bet 的克隆与测序以及序列分析 | 第43-44页 |
| ·T-bet 多克隆抗体的验证 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-50页 |
| ·草鱼 T-bet 部分 cDNA 序列的克隆 | 第44-45页 |
| ·用 5’-RACE 克隆草鱼 T-bet 5’端序列 | 第45-46页 |
| ·在 3’-UTR 上设计引物克隆草鱼 T-bet 3’端序列 | 第46页 |
| ·草鱼 T-bet 的核苷酸及氨基酸序列分析 | 第46-49页 |
| ·系统进化分析 | 第49页 |
| ·草鱼 T-bet 的多克隆抗体验证 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 总结 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第56-57页 |
