| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-22页 |
| ·柑橘碎叶病毒研究进展 | 第13-16页 |
| ·CTLV的侵染症状 | 第13页 |
| ·CTLV的寄主范围 | 第13-14页 |
| ·CTLV分子生物学特性 | 第14-15页 |
| ·CTLV序列多态性 | 第15页 |
| ·CTLV的传播途径及防治方法 | 第15-16页 |
| ·CTLV的检测 | 第16-18页 |
| ·指示植物鉴定 | 第16页 |
| ·电镜观察 | 第16-17页 |
| ·血清学检测 | 第17页 |
| ·分子生物学检测 | 第17-18页 |
| ·环介导等温扩增技术概述 | 第18-20页 |
| ·LAMP实验原理 | 第18页 |
| ·LAMP扩增产物的检测 | 第18-19页 |
| ·LAMP扩增体系的优缺点 | 第19页 |
| ·LAMP技术的适用范围 | 第19页 |
| ·LAMP在植物病害检测上的应用前景 | 第19-20页 |
| ·胶体金免疫层析技术概述 | 第20-22页 |
| ·胶体金免疫层析技术原理 | 第20页 |
| ·胶体金免疫层析技术优点 | 第20-21页 |
| ·免疫层析技术在植物病害检测上的应用前景 | 第21-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-25页 |
| ·研究背景 | 第22-23页 |
| ·RT-LAMP检测植物病毒的优势 | 第22-23页 |
| ·原核表达蛋白制备抗体的可行性 | 第23页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条检测病毒的优势 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| ·柑橘碎叶病毒RT-LAMP体系的建立 | 第23-24页 |
| ·CTLV外壳蛋白基因原核表达及抗体制备 | 第24页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的试制 | 第24-25页 |
| 第三章 柑橘碎叶病毒RT-LAMP检测体系的建立 | 第25-34页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验样品 | 第25页 |
| ·实验试剂与设备 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-28页 |
| ·RT-LAMP特异性引物设计 | 第26页 |
| ·RT-LAMP反应体系条件优化 | 第26-27页 |
| ·RT-LAMP反应结果的检测 | 第27页 |
| ·RT-LAMP灵敏度分析 | 第27页 |
| ·RT-LAMP特异性分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·RT-LAMP反应体系的优化 | 第28-30页 |
| ·RT-LAMP灵敏度分析 | 第30-31页 |
| ·RT-LAMP特异性分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 柑橘碎叶病毒外壳蛋白原核表达 | 第34-47页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·总核酸的抽提 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·CP基因的克隆及测序 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的构建与诱导表达 | 第39-40页 |
| ·CTLV抗体的制备 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·CP基因的克隆及测序 | 第41-42页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第43页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·蛋白特异性检测 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的筛选 | 第44-45页 |
| ·多克隆抗体的筛选 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 柑橘碎叶病毒检测胶体金免疫层析试纸条的试制 | 第47-55页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·实验材料与试剂 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47-48页 |
| ·主要实验溶液的配制 | 第48页 |
| ·试验方法 | 第48-51页 |
| ·玻璃器皿处理 | 第48页 |
| ·胶体金溶液配制 | 第48-49页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第49页 |
| ·抗体的胶体金标记条件优化 | 第49页 |
| ·胶体金标记抗体的制备及纯化 | 第49页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的制作 | 第49-50页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的组装 | 第50页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的检测方法 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·胶体金溶液制备 | 第51-52页 |
| ·抗体的胶体金标记条件 | 第52-53页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条的装配与检测 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 主要结论及展望 | 第55-56页 |
| ·检测CTLV的RT-LAMP体系的建立 | 第55页 |
| ·CTLV的CP基因原核表达 | 第55页 |
| ·CTLV检测胶体金免疫层析试纸条的试制 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录Ⅰ 硕士期间发表文章及参加科研项目情况 | 第63-64页 |
| 附录Ⅱ 缩略词对照表(Abbreviations) | 第64页 |