中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-29页 |
引言 | 第29-32页 |
第1章 文献综述 | 第32-75页 |
·凋亡相关基因与肿瘤化疗耐药研究进展 | 第32-67页 |
·内源性凋亡途径 | 第34-44页 |
·外源性凋亡途径 | 第44-54页 |
·公共的凋亡途径 | 第54-65页 |
·调控凋亡逆转肿瘤化疗耐药的挑战 | 第65-67页 |
·RBM5 基因与肿瘤研究进展 | 第67-75页 |
·与肺癌发生相关的 3 号染色体短臂 2 区 1 带 3 亚带 | 第67-68页 |
·RBM5 的表达及调控 | 第68-71页 |
·RBM5 与凋亡 | 第71-72页 |
·RBM5 与肿瘤 | 第72-75页 |
第2章 材料和方法 | 第75-102页 |
·RBM5 在人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 中的表达 | 第75-86页 |
·主要仪器 | 第75-76页 |
·主要试剂 | 第76-77页 |
·细胞系及培养方法 | 第77-78页 |
·RBM5 基因引物设计 | 第78页 |
·RT-PCR | 第78-80页 |
·Western Blot | 第80-84页 |
·MTT 检测 A549 和 A549/DDP 细胞的生长情况 | 第84页 |
·细胞凋亡(AnnexinV+PI)的流式细胞仪检测 | 第84-85页 |
·细胞 DAPI 染色 | 第85页 |
·统计学方法 | 第85-86页 |
·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体内外研究 | 第86-97页 |
·主要仪器 | 第86页 |
·主要试剂 | 第86页 |
·细胞及实验动物 | 第86-87页 |
·菌株与质粒 | 第87页 |
·实验分组 | 第87-88页 |
·重组质粒转染 A549/DDP 细胞 | 第88-89页 |
·MTT 检测顺铂对 A549/DDP 细胞的生长抑制 | 第89页 |
·细胞凋亡(AnnexinV+PI)的流式细胞仪检测 | 第89-90页 |
·建立人肺腺癌耐药细胞裸鼠皮下移植瘤模型及给药处理37 | 第90页 |
·铺板法检测菌群分布 | 第90-91页 |
·观察绘制肿瘤生长曲线 | 第91页 |
·肿瘤组织标本处理 | 第91页 |
·RT-PCR | 第91-92页 |
·Western blot | 第92页 |
·PCRarray | 第92-93页 |
·组织切片 HE 染色观察组织学改变 | 第93-94页 |
·免疫组化原位检测肿瘤组织蛋白的表达 | 第94-95页 |
·细胞 DAPI 染色 | 第95页 |
·TUNEL 法检测肿瘤原位细胞凋亡 | 第95-96页 |
·统计学方法 | 第96-97页 |
·下调 RBM5 基因对人肺腺癌 A549 细胞顺铂敏感性影响的体内、外实验研究 | 第97-102页 |
·主要仪器 | 第97页 |
·主要试剂 | 第97页 |
·细胞及实验动物 | 第97页 |
·RBM5 siRNA 的设计 | 第97-98页 |
·实验分组 | 第98页 |
·siRNA 转染 A549 细胞 | 第98-99页 |
·MTT 检测顺铂对 A549 细胞的生长抑制 | 第99页 |
·Annexin V-FITC 与 PI 双染法检测 A549 细胞凋亡 | 第99-100页 |
·细胞 DAPI 染色 | 第100页 |
·建立人肺腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型及给药处理 | 第100页 |
·观察绘制肿瘤生长曲线 | 第100-101页 |
·肿瘤组织标本处理 | 第101页 |
·RT-PCR | 第101页 |
·Western Blot | 第101页 |
·PCRarray | 第101页 |
·免疫组化原位检测肿瘤组织蛋白的表达 | 第101页 |
·TUNEL 法检测肿瘤原位细胞凋亡 | 第101页 |
·统计学方法 | 第101-102页 |
第3章 结果 | 第102-127页 |
·RBM5 在人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 中的表达 | 第102-104页 |
·A549/DDP 耐药性的鉴定 | 第102页 |
·DAPI 染色观察顺铂诱导细胞的凋亡 | 第102-103页 |
·流式细胞术定量检测顺铂诱导细胞的凋亡率 | 第103页 |
·在 A549 及 A549/DDP 中,RBM5mRNA 表达水平的检测诱导 | 第103-104页 |
·在 A549 及 A549/DDP 中,RBM5 蛋白质表达水平的检测 | 第104页 |
·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体外研究结果 | 第104-110页 |
·酶切 pcDNA3.1-RBM5 的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第104-105页 |
·检测重组质粒的转染效率 | 第105-106页 |
·细胞生长状况观察 | 第106-107页 |
·MTT 法检测顺铂对转染后细胞的生长抑制 | 第107页 |
·Western blot 检测凋亡相关基因表达 | 第107-108页 |
·DAPI 染色观察转染细胞的凋亡 | 第108页 |
·流式细胞术定量检测转染细胞的凋亡率 | 第108-109页 |
·PCRarray 检测 | 第109-110页 |
·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体内研究结果 | 第110-116页 |
·重组减毒沙门氏菌靶向性检测 | 第110-111页 |
·治疗后肿瘤组织中 RBM5 的表达 | 第111-112页 |
·重组减毒沙门氏菌对移植瘤顺铂敏感性的影响 | 第112-114页 |
·各组肿瘤组织 HE 染色的对比 | 第114页 |
·肿瘤细胞增殖的检测 | 第114-115页 |
·肿瘤细胞凋亡的检测 | 第115页 |
·移植瘤 PCRarray 的检测 | 第115-116页 |
·下调 RBM5 对 A549 顺铂敏感性影响的体外研究结果 | 第116-121页 |
·检测 siRNA 的转染效率 | 第116-118页 |
·细胞生长状况观察 | 第118页 |
·MTT 法检测顺铂对转染细胞的抑制率 | 第118-119页 |
·Western blot 检测凋亡相关基因表达 | 第119页 |
·DAPI 染色观察转染细胞的凋亡 | 第119-120页 |
·流式细胞术定量检测转染细胞的凋亡率 | 第120页 |
·PCRarray 检测 | 第120-121页 |
·下调 RBM5 对 A549 化疗敏感性影响的体内研究结果 | 第121-127页 |
·裸鼠生长及移植瘤一般情况 | 第121页 |
·移植瘤的体积、瘤重和生长曲线 | 第121-123页 |
·肿瘤组织中靶基因的表达 | 第123-124页 |
·各组肿瘤组织 HE 染色的对比 | 第124页 |
·肿瘤细胞增殖和凋亡的检测 | 第124-125页 |
·PCRarray 肿瘤细胞细胞的检测 | 第125-127页 |
第4章 讨论 | 第127-138页 |
第5章 结论 | 第138-140页 |
参考文献 | 第140-188页 |
博士期间所取得的科研成果 | 第188-192页 |
致谢 | 第192-193页 |