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RBM5调控凋亡相关基因的表达及对肺腺癌耐药影响的研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-29页
引言第29-32页
第1章 文献综述第32-75页
   ·凋亡相关基因与肿瘤化疗耐药研究进展第32-67页
     ·内源性凋亡途径第34-44页
     ·外源性凋亡途径第44-54页
     ·公共的凋亡途径第54-65页
     ·调控凋亡逆转肿瘤化疗耐药的挑战第65-67页
   ·RBM5 基因与肿瘤研究进展第67-75页
     ·与肺癌发生相关的 3 号染色体短臂 2 区 1 带 3 亚带第67-68页
     ·RBM5 的表达及调控第68-71页
     ·RBM5 与凋亡第71-72页
     ·RBM5 与肿瘤第72-75页
第2章 材料和方法第75-102页
   ·RBM5 在人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 中的表达第75-86页
     ·主要仪器第75-76页
     ·主要试剂第76-77页
     ·细胞系及培养方法第77-78页
     ·RBM5 基因引物设计第78页
     ·RT-PCR第78-80页
     ·Western Blot第80-84页
     ·MTT 检测 A549 和 A549/DDP 细胞的生长情况第84页
     ·细胞凋亡(AnnexinV+PI)的流式细胞仪检测第84-85页
     ·细胞 DAPI 染色第85页
     ·统计学方法第85-86页
   ·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体内外研究第86-97页
     ·主要仪器第86页
     ·主要试剂第86页
     ·细胞及实验动物第86-87页
     ·菌株与质粒第87页
     ·实验分组第87-88页
     ·重组质粒转染 A549/DDP 细胞第88-89页
     ·MTT 检测顺铂对 A549/DDP 细胞的生长抑制第89页
     ·细胞凋亡(AnnexinV+PI)的流式细胞仪检测第89-90页
     ·建立人肺腺癌耐药细胞裸鼠皮下移植瘤模型及给药处理37第90页
     ·铺板法检测菌群分布第90-91页
     ·观察绘制肿瘤生长曲线第91页
     ·肿瘤组织标本处理第91页
     ·RT-PCR第91-92页
     ·Western blot第92页
     ·PCRarray第92-93页
     ·组织切片 HE 染色观察组织学改变第93-94页
     ·免疫组化原位检测肿瘤组织蛋白的表达第94-95页
     ·细胞 DAPI 染色第95页
     ·TUNEL 法检测肿瘤原位细胞凋亡第95-96页
     ·统计学方法第96-97页
   ·下调 RBM5 基因对人肺腺癌 A549 细胞顺铂敏感性影响的体内、外实验研究第97-102页
     ·主要仪器第97页
     ·主要试剂第97页
     ·细胞及实验动物第97页
     ·RBM5 siRNA 的设计第97-98页
     ·实验分组第98页
     ·siRNA 转染 A549 细胞第98-99页
     ·MTT 检测顺铂对 A549 细胞的生长抑制第99页
     ·Annexin V-FITC 与 PI 双染法检测 A549 细胞凋亡第99-100页
     ·细胞 DAPI 染色第100页
     ·建立人肺腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型及给药处理第100页
     ·观察绘制肿瘤生长曲线第100-101页
     ·肿瘤组织标本处理第101页
     ·RT-PCR第101页
     ·Western Blot第101页
     ·PCRarray第101页
     ·免疫组化原位检测肿瘤组织蛋白的表达第101页
     ·TUNEL 法检测肿瘤原位细胞凋亡第101页
     ·统计学方法第101-102页
第3章 结果第102-127页
   ·RBM5 在人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 中的表达第102-104页
     ·A549/DDP 耐药性的鉴定第102页
     ·DAPI 染色观察顺铂诱导细胞的凋亡第102-103页
     ·流式细胞术定量检测顺铂诱导细胞的凋亡率第103页
     ·在 A549 及 A549/DDP 中,RBM5mRNA 表达水平的检测诱导第103-104页
     ·在 A549 及 A549/DDP 中,RBM5 蛋白质表达水平的检测第104页
   ·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体外研究结果第104-110页
     ·酶切 pcDNA3.1-RBM5 的琼脂糖凝胶电泳鉴定第104-105页
     ·检测重组质粒的转染效率第105-106页
     ·细胞生长状况观察第106-107页
     ·MTT 法检测顺铂对转染后细胞的生长抑制第107页
     ·Western blot 检测凋亡相关基因表达第107-108页
     ·DAPI 染色观察转染细胞的凋亡第108页
     ·流式细胞术定量检测转染细胞的凋亡率第108-109页
     ·PCRarray 检测第109-110页
   ·超表达 RBM5 对人肺腺癌耐药细胞 A549/DDP 耐药性影响的体内研究结果第110-116页
     ·重组减毒沙门氏菌靶向性检测第110-111页
     ·治疗后肿瘤组织中 RBM5 的表达第111-112页
     ·重组减毒沙门氏菌对移植瘤顺铂敏感性的影响第112-114页
     ·各组肿瘤组织 HE 染色的对比第114页
     ·肿瘤细胞增殖的检测第114-115页
     ·肿瘤细胞凋亡的检测第115页
     ·移植瘤 PCRarray 的检测第115-116页
   ·下调 RBM5 对 A549 顺铂敏感性影响的体外研究结果第116-121页
     ·检测 siRNA 的转染效率第116-118页
     ·细胞生长状况观察第118页
     ·MTT 法检测顺铂对转染细胞的抑制率第118-119页
     ·Western blot 检测凋亡相关基因表达第119页
     ·DAPI 染色观察转染细胞的凋亡第119-120页
     ·流式细胞术定量检测转染细胞的凋亡率第120页
     ·PCRarray 检测第120-121页
   ·下调 RBM5 对 A549 化疗敏感性影响的体内研究结果第121-127页
     ·裸鼠生长及移植瘤一般情况第121页
     ·移植瘤的体积、瘤重和生长曲线第121-123页
     ·肿瘤组织中靶基因的表达第123-124页
     ·各组肿瘤组织 HE 染色的对比第124页
     ·肿瘤细胞增殖和凋亡的检测第124-125页
     ·PCRarray 肿瘤细胞细胞的检测第125-127页
第4章 讨论第127-138页
第5章 结论第138-140页
参考文献第140-188页
博士期间所取得的科研成果第188-192页
致谢第192-193页

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