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小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成途径中关键基因的功能研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-16页
引言第16-18页
第一章 文献综述第18-54页
 1 小麦赤霉病研究进展第18-27页
   ·小麦赤霉病概况第18-19页
   ·小麦赤霉病菌的基本生物学特性第19-22页
   ·禾谷镰孢菌功能基因组学研究进展第22-27页
 2 小麦赤霉病的防控策略第27-32页
   ·小麦赤霉病的防控策略概况第27-28页
   ·小麦赤霉病化学防治中三大类药剂抗药机制研究进展第28-32页
 3 麦角甾醇生物合成和调控第32-50页
   ·酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中麦角甾醇生物合成途径第32-41页
   ·丝状真菌中麦角甾醇生物合成途径第41-43页
   ·麦角甾醇生物合成途径的调控第43-50页
 4 小麦赤霉病菌研究的分子生物学方法第50-52页
   ·小麦赤霉病菌基因功能研究方法第50-51页
   ·小麦赤霉病菌遗传转化体系第51-52页
 5 本研究的目的和内容第52-54页
第二章 材料与方法第54-77页
 1 试验材料第54页
   ·菌株和质粒第54页
   ·供试植物第54页
 2 试验方法第54-77页
   ·小麦赤霉菌种的保存、培养、产孢第54-55页
   ·小麦赤霉病菌基因组DNA的提取第55-56页
   ·PCR技术第56页
   ·DNA琼脂糖电泳第56-57页
   ·PCR产物纯化第57页
   ·大肠杆菌E.Coli DH5α菌株感受态细胞的制备第57-58页
   ·DNA克隆技术第58-59页
   ·重组质粒的鉴定与提取第59页
   ·质粒酶切第59-60页
   ·小麦赤霉病菌基因敲除载体的构建及转化子的获得与鉴定第60-61页
   ·小麦赤霉病菌基因互补载体的构建及转化子的获得与验证第61页
   ·小麦赤霉病菌的遗传转化方法第61-64页
   ·小麦赤霉病菌基因组DNA Southern blot分析第64-69页
   ·小麦赤霉病菌总RNA的提取与基因表达量分析第69-70页
   ·基因组表达谱solexa测序第70-72页
   ·生长速率测定第72页
   ·产孢量分析和孢子染色第72页
   ·小麦赤霉病菌对细胞胁迫压力、杀菌剂敏感性的测定第72页
   ·小麦赤霉菌株对戊唑醇、咪酰胺的EC_(50)值测定第72-73页
   ·三唑酮和戊唑醇复配防治小麦赤霉病的药效试验第73-74页
   ·小麦赤霉病菌致病性分析第74页
   ·小麦赤霉病菌DON毒素含量测定第74-75页
   ·小麦赤霉病菌麦角甾醇和总甾醇测定第75-76页
   ·酿酒酵母互补实验第76-77页
第三章 结果与分析第77-170页
 1 小麦赤霉病菌3个同源的cyp51基因的功能研究第77-111页
   ·小麦赤霉病菌对戊唑醇、咪酰胺的敏感性测定第77-78页
   ·小麦赤霉DMI-R和DMI-S菌株的CYP51氨基酸序列分析和cyp51基因表达量测定第78-81页
   ·小麦赤霉病菌受戊唑醇处理6h基因组表达谱分析第81-89页
   ·小麦赤霉病菌3个同源cyp51基因的克隆和序列分析第89-92页
   ·3个同源cyp51基因敲除突变体和互补突变体的获得第92-98页
   ·突变体表型分析第98-103页
   ·三唑酮和戊唑醇对小麦赤霉病菌防治增效作用的测定第103-107页
   ·小结与讨论第107-111页
 2 小麦赤霉病菌FgERG24A/B和FgERG2基因的功能研究第111-128页
   ·小麦赤霉病菌对十三吗啉、苯锈啶和螺环菌胺的敏感性测定第111-112页
   ·小麦赤霉病菌FgERG24A/B和FgERG2基因的分离和序列分析第112-116页
   ·FgERG24A/B和FgERG2基因敲除突变体和互补突变体的获得第116-120页
   ·突变体表型分析第120-126页
   ·小结与讨论第126-128页
 3 小麦赤霉病菌FgERG4基因的功能研究第128-151页
   ·小麦赤霉病菌FgERG4基因的分离和序列分析第128-129页
   ·小麦赤霉病菌FgERG4基因敲除载体的构建第129-130页
   ·小麦赤霉病菌FgERG4基因敲除突变体的获得和鉴定第130-133页
   ·小麦赤霉病菌FgERG4基因的互补第133页
   ·突变体表型分析第133-148页
   ·小结与讨论第148-151页
 4 小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成途径其他14个ERG基因功能研究第151-154页
 5 小麦赤霉病菌麦角甾醇生物合成调控元件的分离鉴定和功能研究第154-170页
   ·麦角甾醇吸收调控转录因子upc2和ecm22分离鉴定和功能研究第154-156页
   ·SREBP途径相关元件的分离鉴定和功能研究第156-157页
   ·其他可能的甾醇平衡转录调控因子的分离鉴定和功能研究第157-168页
   ·小结与讨论第168-170页
第四章 全文结果和后续工作展望第170-176页
 1 全文结果第170-171页
 2 后续工作展望第171-176页
参考文献第176-192页
附录第192-211页
 附录A:引物序列第192-204页
 附录B:培养基配方、常用试剂和试验仪器第204-210页
 附录C:个人简历和博士期间发表的学术论文第210-211页

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