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玉米ZmSKIP基因的克隆与表达研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
1 文献综述第7-15页
   ·干旱对植物的影响第7-11页
     ·形态结构影响第7页
     ·细胞水平生理影响第7-9页
     ·分子水平上的抗逆性调节第9-11页
   ·SKIP的功能研究第11-15页
     ·SNW/SKIP的结构特点第11-12页
     ·SKIP的功能研究第12-13页
     ·SKIP蛋白参与的信号通路第13-15页
2 引言第15-17页
   ·研究的目的与意义第15-16页
   ·技术路线第16-17页
3、材料与方法第17-19页
   ·实验材料第17-18页
     ·菌株和载体第17页
     ·酶及试剂第17-18页
     ·引物合成和测序第18页
   ·仪器设备第18-19页
4 研究方法第19-35页
   ·玉米SKIP同源基因来源第19页
   ·玉米SKIP同源基因的克隆第19-24页
     ·提取玉米组织总RNA第19-20页
     ·玉米嫩叶组织总RNA的检测第20页
     ·反转录第20页
     ·基因组DNA的提取第20-21页
     ·构建ZmSKIP表达载体和干涉载体所需片段的PCR扩增第21-22页
     ·PCR扩增片段的回收纯化第22页
     ·大肠杆菌感受态的制备第22-23页
     ·连接体系第23页
     ·连接产物转化大肠杆菌DH5α第23页
     ·质粒DNA小量提取方法第23页
     ·酶切验证阳性克隆质粒第23-24页
   ·ZmSKIP基因过量表达载体和干涉载体的构建及转化第24-27页
     ·ZmSKIP基因过量表达载体和干涉载体的构建第24-26页
     ·ZmSKIP基因过量表达载体、干涉载体的农杆菌转化第26-27页
   ·ZmSKIP的亚细胞定位第27-30页
     ·融合表达载体的构建第27-29页
     ·洋葱表皮的基因枪转化第29-30页
   ·基因多态性研究第30-31页
   ·阳性转基因植株的检测第31-32页
   ·植物超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第32-33页
   ·植物脱落酸的含量测定第33-35页
     ·样品中激素的提取第33页
     ·样品测定第33-34页
     ·结果计算第34-35页
5 结果分析第35-49页
   ·玉米SKIP基因的扩增第35-37页
   ·ZmSKIP基因在洋葱表皮细胞核中表达第37页
   ·载体构建酶切验证第37-38页
   ·转基因植株的获得第38-39页
     ·转基因玉米的获得第38页
     ·转基因植株的分子检测第38-39页
   ·转基因植株SOD酶活性检测第39-40页
   ·转基因植株抗旱性检验及ABA活性检测第40-41页
   ·玉米ZmSKIP基因全长的生物信息学分析第41-44页
     ·玉米ZmSKIP蛋白二级结构的分析第41-42页
     ·玉米ZmSKIP蛋白疏水性和亲水性分析第42页
     ·玉米ZmSKIP跨膜结构分析第42-43页
     ·玉米ZmSKIP蛋白系统发育分析第43-44页
   ·ZmSKIP多态性分析第44-49页
     ·系统进化树分析第44-47页
     ·ZmSKIP基因进化压力分析第47-49页
6 讨论第49-51页
7 结论第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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