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草莓miR156靶基因SPL9的克隆及表达分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-19页
   ·植物miRNA的研究进展第11-14页
     ·植物miRNA的生物学功能第11-13页
     ·miRNA对靶位点的识别及其作用机制第13-14页
   ·SBP类转录因子的研究进展第14-18页
     ·SBP转录因子的结构第14-15页
     ·SBP类转录因子的功能第15-17页
     ·SBP家族的调控第17-18页
   ·本研究的目的与意义第18-19页
2 材料与方法第19-36页
   ·材料与试剂第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·试剂第19-20页
   ·试验方法第20-36页
     ·草莓总RNA的提取第20页
     ·RNA的质量及纯度检测第20-21页
     ·草莓SPL基因片段的分离第21-22页
     ·草莓SPL9全序列的克隆第22-27页
     ·草莓不同品种中SPL基因的分离第27-28页
     ·PCR特异片段的回收与重组连接第28页
     ·重组质粒DNA的转化、鉴定及测序第28-29页
     ·序列分析第29页
     ·实时定量RT-PCR第29-32页
     ·草莓SPL9基因的定点突变第32-36页
3 结果与分析第36-50页
   ·RNA的质量以及完整性第36-37页
     ·RNA的完整性第36页
     ·RAN的纯度第36-37页
   ·草莓SPL基因片段的分离第37-38页
     ·PCR扩增特异片段第37-38页
     ·草莓SPL特异片段序列分析第38页
   ·草莓SPL基因cDNA全长的获得第38-43页
     ·cDNA全序列的获得第38-40页
     ·草莓SPL9基因的序列分析第40-43页
   ·不同草莓品种SPL9基因片段的比较第43-44页
   ·SPL与miR156在草莓不同生长阶段的表达第44-48页
     ·不同时期SPL9基因的RT-PCR检测第44-45页
     ·不同时期miR156以及miR172的检测第45页
     ·miR156以及SPL9在草莓实生苗中的表达第45-46页
     ·miR156、SPL9以及miR172在草莓组培苗中的表达第46-48页
   ·草莓SPL9基因的定点突变第48-50页
     ·质粒提取及检测第48页
     ·突变质粒的获得及分析第48-50页
4 讨论第50-54页
   ·草莓SPL9基因克隆第50-51页
   ·实时定量RT-PCR以及miRNA的检测第51页
   ·FaSPL9作为miR156的靶基因在植物阶段转变中的作用第51-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62-63页
攻读硕士期间发表的论文第63页

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