| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-23页 |
| ·昆虫促前胸腺激素简介 | 第13-16页 |
| ·PTTH的功能 | 第13-14页 |
| ·PTTH的合成与释放 | 第14-15页 |
| ·PTTH的作用方式 | 第15-16页 |
| ·PTTH研究展望 | 第16页 |
| ·保幼激素 | 第16-20页 |
| ·保幼激素酯酶简介 | 第17-18页 |
| ·保幼激素酯酶的功能 | 第18页 |
| ·保幼激素酯酶合成与代谢 | 第18-20页 |
| ·保幼激素酯酶的抑制剂及重组保幼激素酯酶 | 第20页 |
| ·保幼激素酯酶研究展望 | 第20页 |
| ·苜蓿夜蛾简介 | 第20-21页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究目的 | 第21-22页 |
| ·研究意义 | 第22页 |
| ·本研究课题的来源及主要研究内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·分子生物学用酶及试剂盒和各种试剂 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·昆虫来源 | 第24页 |
| ·研究方法 | 第24-33页 |
| ·昆虫总RNA的提取 | 第24-26页 |
| ·第一链cDNA的合成Synthesis of first chain cDNA | 第26页 |
| ·利用RT-PCR技术克隆基因cDNA序列片段 | 第26-28页 |
| ·3’的试验步骤 | 第28-29页 |
| ·5’-RACE的试验步骤 | 第29-32页 |
| ·去磷酸化处理 | 第29页 |
| ·去帽子反应 | 第29-32页 |
| ·全长cDNA的获取及其序列分析 | 第32-33页 |
| ·序列分析 | 第33-34页 |
| ·利用Blast软件进行序列相似性检索 | 第33页 |
| ·分子质量、碱基组成、碱基分布 | 第33页 |
| ·全长cDNA可读框架分析 | 第33页 |
| ·对ORF进行限制性酶切分析 | 第33页 |
| ·核酸序列对齐分析的功能预测 | 第33-34页 |
| ·蛋白质基本性质分析 | 第34页 |
| ·蛋白质功能预测 | 第34页 |
| ·蛋白质序列同源性分析及蛋白质功能预测 | 第34页 |
| ·结构位点、结构功能域数据库的蛋白质功能预测 | 第34页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第34-35页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第34-35页 |
| ·蛋白质三级结构预测 | 第35页 |
| ·PTTH与JHE基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第35-40页 |
| ·JHE与PTTH基因cDNA序列ORF的PCR | 第35页 |
| ·PCR产物酶切反应 | 第35-36页 |
| ·E.coli质粒DNA提取和酶切 | 第36页 |
| ·大肠杆菌表达载体构建 | 第36-39页 |
| ·JHE与PTTH基因在大肠杆菌中诱导表达 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-59页 |
| ·RT-PCR得到的基因特异性片段及序列分析 | 第40-42页 |
| ·PTTH基因特异性片段及序列分析 | 第40-41页 |
| ·JHE基因特异性片段及序列分析 | 第41-42页 |
| ·cDNA序列的3’结果 | 第42-43页 |
| ·PTTH基因cDNA序列的3’结果 | 第42页 |
| ·JHE基因cDNA序列的3’结果 | 第42-43页 |
| ·cDNA序列的5’-RACE结果 | 第43-44页 |
| ·PTTH基因5’-RACE结果 | 第43页 |
| ·JHE基因5’-RACE结果 | 第43-44页 |
| ·PTTH与JHE序列的获得 | 第44-46页 |
| ·PTTH基因序列的获得 | 第44页 |
| ·JHE基因序列的获得 | 第44-46页 |
| ·PTTH及JHE基因特征 | 第46-48页 |
| ·碱基序列组成分析 | 第46-47页 |
| ·氨基酸序列组成分析 | 第47页 |
| ·信号肽分析 | 第47-48页 |
| ·氨基酸结构域预测 | 第48-51页 |
| ·PTTH氨基酸结构域预测 | 第48-49页 |
| ·JHE氨基酸结构域预测 | 第49-51页 |
| ·氨基酸的疏水性分析 | 第51-52页 |
| ·PTTH氨基酸疏水性分析 | 第51页 |
| ·JHE氨基酸疏水性分析 | 第51-52页 |
| ·昆虫促前胸腺激素序列同源性和系统进化分析 | 第52-54页 |
| ·昆虫保幼激素酯酶序列同源性和系统进化分析 | 第54-57页 |
| ·苜蓿夜蛾PTTH基因在大肠杆菌中的表达 | 第57-58页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体的构建和鉴定 | 第57页 |
| ·PTTH基因在大肠杆菌中的表达 | 第57-58页 |
| ·苜蓿夜蛾JHE基因在人肠杆菌中的表达 | 第58-59页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体的构建和鉴定 | 第58页 |
| ·JHE基因在人肠杆菌中的表达 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| ·关于苜蓿夜蛾促前胸腺激素拷贝数的探讨 | 第59页 |
| ·关于苜蓿夜蛾保幼激素酯酶拷贝数的探讨 | 第59页 |
| ·大肠杆菌表达系统的选择 | 第59-60页 |
| ·感受态细胞的制备和载体构建的探讨 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |