| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 前言(绪论) | 第12-23页 |
| 1 流感病毒概况 | 第12-13页 |
| ·流感病毒的发病机理 | 第13页 |
| 2 microRNA与病毒 | 第13-21页 |
| ·microRNA的特点 | 第13-14页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第14-15页 |
| ·病毒和宿主在miRNA层次上的互作 | 第15-20页 |
| ·病毒编码的miRNA调节病毒和宿主基因表达 | 第16-18页 |
| ·细胞miRNA在病毒感染过程中发挥重要作用 | 第18页 |
| ·病毒通过宿主miRNA来调控其靶基因的表达 | 第18-20页 |
| ·miR-15a | 第20-21页 |
| 3 结语与展望 | 第21-23页 |
| 第一章 流感病毒感染A549细胞后miR-15a表达变化 | 第23-28页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·药品与试剂 | 第23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·细胞培养及转染 | 第24-25页 |
| ·Real-time PCR检测miR-15a在A549细胞中的表达 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-26页 |
| ·提取的总RNA鉴定 | 第26页 |
| ·Real-time PCR检测流感病毒感染后miR-15a的表达情况 | 第26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| 第二章 miR-15a真核表达载体的构建及鉴定 | 第28-34页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·药品与试剂 | 第28页 |
| ·主要实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·寡聚单链DNA的设计和退火 | 第29页 |
| ·双链DNA的装载及测序 | 第29-30页 |
| ·细胞培养及转染 | 第30页 |
| ·Real-time PCR检测miR-15a表达载体在A549细胞中的表达 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定及DNA序列测定 | 第31页 |
| ·miR-15a表达质粒在A549细胞中的表达 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 miR-15a参与流感病毒诱导的细胞凋亡 | 第34-45页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·药品与试剂 | 第34-35页 |
| ·主要实验仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·CCK-8法检测表达抑制miR-15a表达后流感病毒所致细胞病变 | 第35-36页 |
| ·流式细胞仪-Annexin Ⅴ/PI双染色法检测细胞凋亡率 | 第36页 |
| ·miR-15a靶基因的表达 | 第36-39页 |
| ·统计学处理 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·CCK-8法检测表达miR-15a后流感病毒所致细胞病变率 | 第39-40页 |
| ·流式细胞仪-Annexin Ⅴ/PI双染色法检测细胞凋亡率 | 第40-41页 |
| ·流式细胞术观察转染对细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
| ·miR-15a靶基因的表达 | 第41-43页 |
| ·流感病毒感染后miR-15a靶基因在mRNA水平的表达 | 第41-43页 |
| ·流感病毒感染后miR-15a靶基因在蛋白水平的表达 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 生物信息学方法分析潜在的其它靶基因 | 第45-52页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·miR-15a预测靶基因的获得 | 第46页 |
| ·miR-15a预测靶基因的GO注释描述及GO分类富集分析 | 第46-49页 |
| ·miR-15a预测靶基因的生物通路富集分析 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 符号表 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
