| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表(Abbreviations) | 第11-12页 |
| 1 牛胚胎发育相关基因DNA甲基化研究进展 | 第12-24页 |
| ·DNA甲基化研究进展 | 第12-17页 |
| ·DNA甲基化 | 第12-13页 |
| ·DNA甲基化作用机理 | 第13页 |
| ·DNA甲基化研究方法 | 第13-14页 |
| ·DNA甲基化与胚胎发育研究 | 第14-17页 |
| ·牛克隆胚和体外受精胚研究进展 | 第17-19页 |
| ·牛克隆胚研究现状及问题 | 第17-18页 |
| ·牛体外受精胚研究现状及问题 | 第18-19页 |
| ·相关基因与胚胎发育研究 | 第19-24页 |
| ·OCT4基因 | 第20-21页 |
| ·Nanog基因 | 第21-24页 |
| 2 试验目的与意义 | 第24-25页 |
| ·试验内容 | 第24页 |
| ·试验目的及意义 | 第24-25页 |
| 3 试验材料和方法 | 第25-35页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂盒 | 第26-27页 |
| ·常用试剂及配制 | 第27页 |
| ·主要的生物信息学网站及分析软件 | 第27-28页 |
| ·胚胎DNA的提取 | 第28-32页 |
| ·胚胎基因组DNA的提取步骤 | 第28页 |
| ·亚硫酸氢盐修饰基因组DNA | 第28-29页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第30-31页 |
| ·目的片段与T载体连接 | 第31-32页 |
| ·阳性转化子测序 | 第32页 |
| ·甲基化分析 | 第32页 |
| ·统计分析 | 第32页 |
| ·胚胎RNA的提取 | 第32-35页 |
| ·试验步骤 | 第32-33页 |
| ·cDNA第一条的链的合成 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第34-35页 |
| 4 结果与分析 | 第35-43页 |
| ·OCT4基因 | 第35-38页 |
| ·OCT4基因启动子区CpG岛的相关信息 | 第35页 |
| ·OCT4基因启动子区PCR扩增结果 | 第35-36页 |
| ·OCT4基因启动子在不同时期死亡的克隆胚的甲基化分析 | 第36-37页 |
| ·OCT4基因启动子在不同时期死亡的体外受精胚的甲基化分析 | 第37-38页 |
| ·Nanog基因 | 第38-41页 |
| ·Nanog基因启动子CpG岛的相关信息 | 第38页 |
| ·Nanog基因启动子区PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| ·Nanog基因启动子在不同时期死亡的克隆胚的甲基化分析 | 第39-40页 |
| ·Nanog基因启动子在不同时期死亡的体外受精胚的甲基化分析 | 第40-41页 |
| ·定量结果 | 第41-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| ·牛胚胎基因组DNA提取方法分析 | 第43页 |
| ·OCT4、Nanog基因启动子在牛早期死亡胚胎的甲基化模式 | 第43-45页 |
| ·定量结果分析 | 第45-46页 |
| 6 总结 | 第46-47页 |
| ·研究小结 | 第46页 |
| ·研究创新 | 第46页 |
| ·研究不足 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
