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山羊毛囊发育和毛色相关基因的克隆与表达分析

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-25页
   ·济宁青山羊第11-12页
     ·济宁青山羊的种质特性第11页
     ·济宁青山羊的毛色花型和毛皮品质第11-12页
   ·皮肤毛囊概述第12-19页
     ·动物皮肤、被毛的基本结构及其功能第12-13页
     ·毛囊的基本结构及特点第13-14页
     ·毛囊的生长发育周期及特征第14-15页
     ·动物毛囊形态发生的过程第15页
     ·动物毛囊形态发生的分子机制第15-19页
   ·哺乳动物毛色形成第19-23页
     ·黑色素的性质、形成及功能第19-20页
     ·哺乳动物毛色形成机制第20页
     ·影响动物黑色素合成的相关基因第20-23页
   ·RACE技术和实时荧光定量 PCR 概述第23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-34页
   ·实验材料与样本采集第25页
   ·仪器与试剂第25-27页
     ·实验用仪器设备第25-26页
     ·常规分子试剂第26页
     ·细菌的转化、阳性克隆的筛选所用试剂第26页
     ·主要生化或分子生物学试剂第26-27页
   ·实验方法第27-34页
     ·引物设计与合成第27-28页
     ·青山羊皮肤组织的RNA提取与检测第28页
     ·cDNA 第一条链的合成第28-29页
     ·TYR、IGF-1、FGF5、DAPDH 基因 PCR 扩增及检测第29页
     ·TYR 3′序列的获得第29页
     ·TYR5′序列的获得第29-30页
     ·DNA 片段的回收第30页
     ·PCR 产物与载体的连接第30-31页
     ·大肠杆菌的转化及测序第31页
     ·生物信息学分析第31-32页
     ·荧光定量 PCR第32-33页
     ·实验数据的统计分析方法第33-34页
3 结果与分析第34-48页
   ·TYR、IGF-1、FGF5、GAPDH 基因片段克隆测序第34-36页
   ·青山羊皮肤 TYR cDNA 全长的克隆第36页
   ·山羊皮肤 TYR 序列分析和同源性比较第36-41页
   ·山羊皮肤酪氨酸酶蛋白质二级结构预测第41-42页
   ·实时荧光定量 PCR第42-43页
   ·TYR 在不同毛色济宁青山羊皮肤组织中的 mRNA 表达水平第43-44页
   ·TYR 基因在不同生长时期的济宁青山羊皮肤毛囊中的 mRNA 表达水平第44-45页
   ·IGF-1 基因在不同时期济宁青山羊皮肤毛囊中的 mRNA 表达水平第45-46页
   ·FGF5 基因在不同时期济宁青山羊皮肤毛囊中的 mRNA 表达水平第46-48页
4 讨论第48-53页
   ·TYR cDNA 分子克隆与序列分析第48-49页
   ·TYR 基因在不同毛色以及 10 个不同生长时期表达水平第49-51页
   ·IGF-1 基因在 10 个不同时期表达水平第51-52页
   ·FGF5 基因在 10 个不同时期表达水平第52-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-63页
攻读学位期间发表论文情况第63页

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