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EB病毒感染对microRNA-203的表达影响及其相互作用是鼻咽癌发病学的重要机制

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
縮写词简表第13-15页
第一章 前言第15-20页
 技术路线第19-20页
第二章 材料与方法第20-46页
 1 材料第20-27页
   ·细胞系第20页
   ·临床组织样本第20-21页
   ·实验动物第21页
   ·菌株和质粒载体第21页
   ·试剂第21-23页
   ·引物第23-26页
   ·主要仪器第26-27页
 2 方法第27-46页
   ·miRNA芯片检测第27-28页
   ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第28-32页
   ·蛋白抽提第32-33页
   ·组织样本采集第33-34页
   ·miRNA及si-RNA转染目的细胞第34-35页
   ·MTT第35页
   ·流式细胞分析细胞周期改变第35页
   ·免疫组化检测第35-36页
   ·原位杂交检测miRNA的表达第36-37页
   ·免疫组化和原位杂交结果分析第37页
   ·差异miRNA生物信息学分析第37-41页
   ·pcDNA3.1-LMP2真核表达载体的构建第41-43页
   ·G418筛选阳性克隆第43-44页
   ·建立EBV感染上皮细胞模型第44页
   ·裸鼠移植瘤实验第44页
   ·统计学分析第44-46页
第三章 结果第46-92页
 第一部分 EBV对miR-203表达的影响第46-61页
   ·EBV在上皮细胞中所调控的miRNA筛选第46-47页
   ·miRNA芯片结果进行验证第47-48页
   ·EBV感染上皮细胞系的构建第48-50页
   ·miR-203在EBV感染的细胞和低分化NPC组织中表达下调第50-60页
  小结第60-61页
 第二部分 miR-203的生物信息学分析及其下游靶基因的预测与实验验证第61-69页
   ·生物信息学分析miR-203的基本信息第61-63页
   ·miR-203下游靶基因预测第63-64页
   ·对预测的miR-203潜在靶基因进行实验验证第64-69页
  小结第69页
 第三部分 miR-203对上皮细胞的生物学功能的影响第69-77页
   ·MTT实验检测miR-203对293-EBV细胞增殖的影响第69-70页
   ·流式细胞术检测miR-203对293-EBV细胞周期进程的影响第70-73页
   ·miR-203对裸鼠移植瘤细胞生长的影响第73-77页
 第四部分 LMP1是EBV调控miR-203的关键蛋白第77-90页
   ·EBV编码的潜伏蛋白LMP1及LMP2对miR-203的表达影响第77-84页
   ·LMP1激活NF-кB和JNK信号通路参与调控miR-203的表达第84-88页
   ·在鼻咽癌组织中LMP1与miR-203的表达量的关系第88-90页
 第五部分 NPC组织中miR-203的表达与临床意义第90-92页
第四章 讨论第92-106页
 第一部分 EBV对iniR-203表达的影响第92-95页
 第二部分 LMP1是EBV调控miR-203的关键蛋白第95-100页
 第三部分 EBV-miRNA-班基因的交互作用是鼻咽癌的发病学机制第100-106页
结论第106-107页
参考文献第107-118页
综述第118-137页
 参考文献第127-137页
致谢第137-139页
攻读博士期间获得的学术成果第139-140页

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