| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略语表 | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 大黄鱼养殖现状 | 第12页 |
| 2 大黄鱼主要病害研究 | 第12-15页 |
| ·大黄鱼主要细菌性疾病 | 第12-13页 |
| ·体表溃疡病 | 第12-13页 |
| ·内脏结节/白点病 | 第13页 |
| ·肠炎病 | 第13页 |
| ·大黄鱼主要寄生虫性疾病 | 第13-15页 |
| ·白点病(刺激隐核虫病) | 第13-14页 |
| ·本尼登虫病 | 第14页 |
| ·瓣体虫病 | 第14页 |
| ·车轮虫病 | 第14-15页 |
| ·海盘虫病 | 第15页 |
| ·淀粉卵甲藻病 | 第15页 |
| ·库道虫病 | 第15页 |
| 3 鱼类细菌病诊断及检测技术 | 第15-18页 |
| ·核酸杂交技术 | 第15-16页 |
| ·基因芯片技术 | 第16页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第16-17页 |
| ·环介导恒温扩增技术(LAMP) | 第17-18页 |
| 4 假单胞菌检测中常用的基因 | 第18-19页 |
| ·核糖RNA(rRNA)基因 | 第18页 |
| ·耐药基因 | 第18页 |
| ·σ因子 | 第18-19页 |
| 5 本论文研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第2章 大黄鱼内脏白点病的病原和组织病理学研究 | 第20-34页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| ·实验用鱼 | 第20页 |
| ·主要试剂、菌种、仪器 | 第20-21页 |
| ·病原菌的分离与培养 | 第21页 |
| ·菌株致病力测试 | 第21页 |
| ·病原菌的形态学观察 | 第21页 |
| ·分离菌株的理化特性试验 | 第21页 |
| ·分离菌株16S rRNA序列的Ta克隆和序列分析 | 第21-22页 |
| ·TZ法提取分离菌基因组DNA | 第21-22页 |
| ·PCR扩增 | 第22页 |
| ·分离菌株的16S rRNA基因的Ta克隆 | 第22页 |
| ·序列比对与鉴定 | 第22页 |
| ·药敏试验 | 第22-23页 |
| ·病症与病理观察 | 第23页 |
| ·病鱼病症观察 | 第23页 |
| ·组织病理学观察 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-31页 |
| ·菌株的致病性测定 | 第23-24页 |
| ·病原菌的形态观察 | 第24页 |
| ·生理生化鉴定 | 第24-26页 |
| ·16S rRNA基因序列比对和系统发育分析 | 第26-27页 |
| ·药敏试验 | 第27页 |
| ·病鱼病症与组织病理观察 | 第27-31页 |
| ·病鱼症状 | 第27-29页 |
| ·组织病理 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-34页 |
| ·鱼类内脏白点病的病原 | 第31-32页 |
| ·大黄鱼内脏白点病的病因 | 第32-33页 |
| ·大黄鱼内脏白点病的防治 | 第33-34页 |
| 第3章 环介导恒温扩增技术(LAMP)快速检测大黄鱼病原恶臭假单胞菌 | 第34-51页 |
| 1 材料与方法 | 第35-38页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·主要分子试剂 | 第35页 |
| ·PCR检测rpoN靶基因 | 第35页 |
| ·LAMP反应及条件的优化 | 第35-37页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·LAMP反应 | 第36页 |
| ·LAMP反应结果判断 | 第36-37页 |
| ·LAMP体系优化 | 第37页 |
| ·LAMP的温度和时间优化 | 第37页 |
| ·灵敏度检测 | 第37页 |
| ·特异性检测 | 第37页 |
| ·组织检测 | 第37-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·PCR检测rpoN靶基因结果 | 第38页 |
| ·LAMP反应结果 | 第38-40页 |
| ·内外引物比 | 第40页 |
| ·dNTPs浓度 | 第40-41页 |
| ·Betaine浓度 | 第41-42页 |
| ·Mg~(2+)浓度 | 第42页 |
| ·温度 | 第42-44页 |
| ·反应时间 | 第44页 |
| ·最佳反应体系 | 第44-45页 |
| ·灵敏度检测 | 第45-46页 |
| ·特异性检测 | 第46-47页 |
| ·样品鱼组织检测 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| ·恶臭假单胞菌LAMP检测的灵敏度和特异性 | 第48-49页 |
| ·LAMP检测恶臭假单胞菌的可行性 | 第49-51页 |
| 第4章 恶臭假单胞菌生物学特性及其菌体成份对大黄鱼的免疫学活性研究 | 第51-61页 |
| 1 材料和方法 | 第51-56页 |
| ·实验用鱼 | 第51页 |
| ·菌株、试剂 | 第51-52页 |
| ·恶臭假单胞菌胞外产物的酶活性分析 | 第52页 |
| ·胞外产物的制备 | 第52页 |
| ·胞外产物的酶活性分析 | 第52页 |
| ·不同温度下胞外产物的酶活性分析 | 第52页 |
| ·银染法鉴定恶臭假单胞菌生物膜 | 第52-53页 |
| ·恶臭假单胞菌生物膜的制备 | 第52页 |
| ·银染法观察恶臭假单胞菌生物膜 | 第52-53页 |
| ·免疫 | 第53-54页 |
| ·免疫成分的制备 | 第53-54页 |
| ·大黄鱼的免疫 | 第54页 |
| ·免疫指标的测定 | 第54-56页 |
| ·样品的采集 | 第54页 |
| ·白细胞的吞噬活性测定 | 第54-55页 |
| ·血清溶菌酶活力测定 | 第55页 |
| ·血清抗体效价测定 | 第55页 |
| ·攻毒 | 第55-56页 |
| ·数据处理 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-59页 |
| ·胞外产物酶活性 | 第56页 |
| ·恶臭假单胞菌生物膜 | 第56-57页 |
| ·白细胞的吞噬活性 | 第57页 |
| ·血清中的溶菌酶活力 | 第57页 |
| ·抗体效价 | 第57-58页 |
| ·免疫保护率 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| ·不同恶臭假单胞菌抗原对大黄鱼的免疫活性 | 第59页 |
| ·生物膜多糖存在的免疫原性 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录1 | 第69-71页 |
| 附录2 | 第71-72页 |
| 硕士期间发表的论文与参加的学术会议 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
