| 论文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-36页 |
| ·急性期反应 | 第16-18页 |
| ·急性期反应的定义 | 第16-17页 |
| ·急性期反应蛋白 | 第17-18页 |
| ·鱼类 APR 的分子生物学研究 | 第18-35页 |
| ·鱼类急性期蛋白的研究 | 第18-30页 |
| ·鱼类急性期基因的研究 | 第30-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 2 宁海地区香鱼弧菌病病原菌鉴定 | 第36-49页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-40页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·菌株与载体质粒 | 第37页 |
| ·病鱼样品 | 第37页 |
| ·引物 | 第37-38页 |
| ·病原菌的分离 | 第38页 |
| ·菌体形态观察及常规生理生化鉴定 | 第38页 |
| ·病原菌的回归感染 | 第38-39页 |
| ·药物敏感实验 | 第39页 |
| ·细菌基因组序列扩增、测序和分析 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-47页 |
| ·病鱼症状 | 第40页 |
| ·回归感染 | 第40-41页 |
| ·菌体的形态及生理生化特征 | 第41-43页 |
| ·药物敏感性 | 第43-44页 |
| ·细菌检测引物扩增结果 | 第44-45页 |
| ·序列分析 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 3 鳗利斯顿氏菌侵染的香鱼肝组织 SSH cDNA 文库构建和鉴定 | 第49-90页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-71页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·菌株与载体质粒 | 第50页 |
| ·接头与引物序列 | 第50-51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·鳗利斯顿氏菌菌悬液制备 | 第51页 |
| ·人工感染 | 第51页 |
| ·总RNA提取和mRNA纯化 | 第51-52页 |
| ·抑制消减杂交文库的构建 | 第52-64页 |
| ·抑制差减文库的筛选 | 第64-67页 |
| ·序列测定及分析 | 第67页 |
| ·RT-qPCR验证 | 第67-71页 |
| ·结果 | 第71-85页 |
| ·总RNA的提取与mRNA纯化 | 第71-72页 |
| ·双链cDNA合成和RsaI酶切效率 | 第72-73页 |
| ·连接效率分析 | 第73-74页 |
| ·NestedPCR扩增消减杂交产物 | 第74-75页 |
| ·消减效率检测 | 第75-77页 |
| ·正反库质量检测 | 第77-79页 |
| ·测序及序列分析 | 第79-83页 |
| ·差异基因的功能注释和分类 | 第83页 |
| ·RT-qPCR验证 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-90页 |
| ·SSHcDNA文库起始材料的选择 | 第85页 |
| ·SSHcDNA文库的质量 | 第85-86页 |
| ·GO 基因功能注释和归类分析 | 第86-87页 |
| ·鳗利斯顿氏菌侵染香鱼的急性期反应相关基因表达及意义 60 | 第87-90页 |
| 4 鳗利斯顿氏菌侵染相关的香鱼急性期蛋白 Wap65-2 的鉴定 | 第90-120页 |
| ·前言 | 第90页 |
| ·材料与方法 | 第90-104页 |
| ·主要仪器 | 第90-91页 |
| ·主要试剂 | 第91页 |
| ·菌株与载体质粒 | 第91页 |
| ·实验动物 | 第91页 |
| ·鳗利斯顿氏菌菌悬液制备 | 第91页 |
| ·人工感染 | 第91-92页 |
| ·香鱼肝组织 c DNA 文库的构建 | 第92页 |
| ·序列测定与分析 | 第92页 |
| ·Wap65-2 基因 m RNA 的组织表达特征 | 第92-93页 |
| ·RT-qP CR 检测鳗利斯顿氏菌侵染后 aWap65-2 基因mRNA 表达变化 | 第93-94页 |
| ·Wap65-2 基因原核表达载体构建 | 第94-99页 |
| ·Wap65-2 基因的原核表达、抗血清及血清蛋白检测 | 第99-104页 |
| ·结果 | 第104-117页 |
| ·香鱼 Wap65-2 基因的克隆 | 第104-105页 |
| ·香鱼 Wap65-2 基因的序列分析 | 第105-109页 |
| ·香鱼 Wap65-2 基因 mRNA 的组织表达特征 | 第109-110页 |
| ·鳗利斯顿氏菌侵染过程中香鱼肝 Wap65-2 基因 mRNA表达变化 | 第110-111页 |
| ·aWap65-2 的原核表达和抗血清制备 | 第111-116页 |
| ·鳗利斯顿氏菌侵染过程中香鱼血清 Wap65-2 蛋白表达变化 | 第116-117页 |
| ·讨论 | 第117-120页 |
| ·香鱼 Wap65-2 基因的克隆及序列分析 | 第117-119页 |
| ·香鱼 Wap65-2 基因的组织分布 | 第119页 |
| ·Wap65-2 的表达及其与鳗利斯顿氏菌感染香鱼的相关性 | 第119-120页 |
| 5 香鱼 W ap65 - 2 与 C3 的互作研究 | 第120-148页 |
| ·前言 | 第120页 |
| ·材料与方法 | 第120-128页 |
| ·主要仪器 | 第120页 |
| ·主要试剂 | 第120-121页 |
| ·菌株与载体质粒 | 第121页 |
| ·实验动物 | 第121页 |
| ·RACE PCR 产物克隆、测序 | 第121页 |
| ·aWap65-2 与 aC3 互作结构域的鉴定 | 第121-127页 |
| ·GST p ull-d own 实验验证 aWap65-2 和 aC3β的互作 | 第127-128页 |
| ·结果 | 第128-143页 |
| ·aC3 基因的克隆及序列分析 | 第128-136页 |
| ·鉴定 aWap65-2 与 aC3 互作的结构域 | 第136-140页 |
| ·GST p ull-d own 实验验证 aWap65-2 与 aC3β的互作 | 第140-143页 |
| ·讨论 | 第143-148页 |
| ·香鱼 C3 基因的克隆及序列分析 | 第143-144页 |
| ·aWap65-2 与 aC3 的互作 | 第144-148页 |
| 6 结论与展望 | 第148-152页 |
| ·结论 | 第148-149页 |
| ·展望 | 第149-152页 |
| 参考文献 | 第152-177页 |
| 英语缩略词表 | 第177-181页 |
| 在学研究成果 | 第181-183页 |
| 致谢 | 第183-184页 |
