| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 猪水泡病研究进展 | 第11-26页 |
| ·SVDV病原学 | 第11-17页 |
| ·病毒分类与特性 | 第11-12页 |
| ·基因组结构 | 第12-14页 |
| ·病毒蛋白质的结构和功能 | 第14-15页 |
| ·SVDV的抗原结构 | 第15-17页 |
| ·SVDV流行病学 | 第17-20页 |
| ·流行与危害 | 第17-19页 |
| ·病毒的繁殖与复制 | 第19页 |
| ·SVDV的传播 | 第19-20页 |
| ·SVDV诊断技术及其研究进展 | 第20-24页 |
| ·动物试验 | 第21页 |
| ·血清抗体检测方法 | 第21-23页 |
| ·核酸诊断 | 第23-24页 |
| ·SVD的控制和预防 | 第24-25页 |
| ·本论文的研究目的和研究策略 | 第25-26页 |
| 第二章 猪水泡病病毒VP1基因的克隆和表达 | 第26-56页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料与方法 | 第26-47页 |
| ·主要材料及试剂 | 第26-27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·技术路线 | 第33-34页 |
| ·病毒基因组RNA的提取 | 第34页 |
| ·cDNA的反转录 | 第34页 |
| ·SVDV-VP1基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的小量胶回收 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·克隆及表达载体的构建 | 第37-41页 |
| ·重组表达质粒在TOPO10E.coli细胞中的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE分析表达蛋白 | 第42-43页 |
| ·表达产物的Western blotting检测 | 第43-45页 |
| ·重组蛋白的小批量生产和纯化 | 第45-47页 |
| ·试验结果 | 第47-52页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第47-48页 |
| ·SVDV VP1基因的亚克隆及重组表达质粒的构建 | 第48页 |
| ·SVDV核蛋白表达重组质粒的序列分析 | 第48-49页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第49-51页 |
| ·表达产物的Western blotting检测 | 第51页 |
| ·重组基因表达产物的纯化 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-56页 |
| ·VP1基因的选择 | 第52页 |
| ·基因表达系统的选择 | 第52-54页 |
| ·VP1基因表达 | 第54-55页 |
| ·表达产物的纯化 | 第55-56页 |
| 第三章 猪水泡病检测技术的建立 | 第56-79页 |
| ·引言 | 第56-57页 |
| ·材料和方法 | 第57-65页 |
| ·病毒株、细胞和主要试剂 | 第57页 |
| ·仪器设备 | 第57页 |
| ·试剂配制 | 第57-59页 |
| ·猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第59-60页 |
| ·多重PCR检测口蹄疫、猪水泡病和水泡性口炎的研究 | 第60-62页 |
| ·实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测猪水泡病病毒的研究 | 第62-63页 |
| ·应用重组抗原建立检测猪水泡病抗体的间接ELISA方法的研究 | 第63-65页 |
| ·结果 | 第65-76页 |
| ·猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第65-66页 |
| ·多重PCR检测口蹄疫、猪水泡病和水泡性口炎的研究 | 第66-68页 |
| ·实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测猪水泡病病毒的研究 | 第68-73页 |
| ·应用重组抗原建立检测猪水泡病抗体的间接ELISA方法的研究 | 第73-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| ·猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第76页 |
| ·多重PCR检测口蹄疫、猪水泡病和水泡性口炎的研究 | 第76-77页 |
| ·实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测猪水泡病病毒的研究 | 第77-78页 |
| ·应用重组抗原建立检测猪水泡病抗体间接ELISA方法的研究 | 第78-79页 |
| 第四章 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
