| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-25页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·葡萄病害和抗病研究 | 第17-19页 |
| ·葡萄白粉病 | 第17-18页 |
| ·葡萄霜霉病 | 第18页 |
| ·葡萄抗病的分子机制 | 第18-19页 |
| ·白藜芦醇和葡萄芪合成酶基因研究概况 | 第19-21页 |
| ·白藜芦醇的功能和研究概况 | 第19-20页 |
| ·芪合成酶功能和研究概况 | 第20-21页 |
| ·葡萄病程相关蛋白 PR10 基因研究概况 | 第21-24页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 葡萄芪合成酶基因克隆及序列分析 | 第25-47页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·IN SILICO 克隆欧洲葡萄芪合成酶基因 | 第25-26页 |
| ·欧洲葡萄芪合成酶基因生物信息学分析 | 第26页 |
| ·野生毛葡萄株系植株白粉菌接种 | 第26页 |
| ·野生毛葡萄叶片和果实 DNA 和 RNA 提取 | 第26页 |
| ·引物设计及合成 | 第26-27页 |
| ·CDNA 第一链合成 | 第27页 |
| ·野生毛葡萄芪合成酶基因 3’RACE 扩增及克隆 | 第27-28页 |
| ·野生毛葡萄芪合成酶基因序列分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-43页 |
| ·IN SILICO 克隆欧洲葡萄‘黑比诺’芪合成酶基因家族基因 | 第29-33页 |
| ·欧洲葡萄‘黑比诺’芪合成酶基因家族编码区序列分析 | 第33页 |
| ·欧洲葡萄芪合成酶基因家族基因内含子和启动子序列分析 | 第33-37页 |
| ·野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因家族克隆 | 第37-38页 |
| ·野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因家族序列分析 | 第38-42页 |
| ·野生毛葡萄‘丹凤-2’和欧洲葡萄‘黑比诺’芪合成酶基因家族对比分析 | 第42页 |
| ·野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因进化分析 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-47页 |
| 第三章 葡萄芪合成酶基因表达模式分析 | 第47-76页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-55页 |
| ·芪合成酶基因表达生物信息学分析 | 第48页 |
| ·引物设计及合成 | 第48-52页 |
| ·葡萄白粉菌、霜霉菌和烟草白粉菌接种 | 第52-53页 |
| ·葡萄生物和非生物胁迫处理 | 第53-54页 |
| ·葡萄 DNA 和 RNA 提取 | 第54页 |
| ·CDNA 第一链合成 | 第54页 |
| ·葡萄芪合成酶基因半定量 RT-PCR 和实时定量 RT-PCR 检测分析 | 第54-55页 |
| ·白藜芦醇提取和检测 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-72页 |
| ·欧洲葡萄芪合成酶基因表达生物信息学分析 | 第55-57页 |
| ·葡萄芪合成酶基因组织特异性表达分析 | 第57-58页 |
| ·葡萄果实发育过程中芪合成酶基因的表达和白藜芦醇的变化 | 第58-62页 |
| ·苯丙烷类代谢途径相关酶基因在葡萄果实发育过程中表达变化 | 第62页 |
| ·葡萄芪合成酶基因家族成员之间受白粉菌诱导表达差异分析 | 第62-66页 |
| ·葡萄芪合成酶基因受病原菌诱导表达模式分析 | 第66-68页 |
| ·葡萄芪合成酶基因参与植物亲和与不亲和性抗病分析 | 第68页 |
| ·葡萄芪合成酶基因受非生物胁迫诱导表达模式分析 | 第68-70页 |
| ·葡萄芪合成酶基因与病程相关蛋白基因受病原菌诱导协同表达分析 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-76页 |
| 第四章 葡萄芪合成酶抗病功能分析 | 第76-97页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·植物材料 | 第76页 |
| ·主要仪器设备 | 第76页 |
| ·主要试剂和载体 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| ·葡萄芪合成酶基因生物信息学分析及引物设计 | 第77-78页 |
| ·中国野生华东葡萄芪合成酶免疫定位 | 第78页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶基因酵母表达 | 第78页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶基因大肠杆菌原核表达 | 第78-79页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶体外抑菌活性分析 | 第79页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶基因转化烟草及检测 | 第79-80页 |
| ·转野生毛葡萄芪合成酶基因的烟草植株抗病性检测及分析 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-94页 |
| ·芪合成酶多克隆抗体特异性检测和芪合成酶在接种白粉菌后的表达 | 第80页 |
| ·野生华东葡萄芪合成酶免疫定位 | 第80-84页 |
| ·野生毛葡萄芪合成酶基因酵母及大肠杆菌原核表达 | 第84-87页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶体外抑菌活性分析 | 第87-89页 |
| ·中国野生毛葡萄芪合成酶基因转化烟草及检测 | 第89-91页 |
| ·过量表达野生毛葡萄芪合成酶基因烟草的抗白粉菌活性分析 | 第91-93页 |
| ·过量表达芪合成酶基因诱导表达病程相关蛋白表达 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-97页 |
| 第五章 中国野生华东葡萄 PR10.2 基因克隆及功能分析 | 第97-130页 |
| ·材料 | 第97-98页 |
| ·植物材料 | 第97页 |
| ·主要仪器设备 | 第97页 |
| ·主要试剂 | 第97-98页 |
| ·方法 | 第98-103页 |
| ·葡萄生物信息学分析 | 第98页 |
| ·葡萄材料田间和实验室生物或非生物胁迫处理 | 第98页 |
| ·葡萄材料 DNA、RNA 和蛋白提取 | 第98页 |
| ·引物设计及合成 | 第98-99页 |
| ·CDNA 第一链合成 | 第99页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 基因及启动子克隆 | 第99-100页 |
| ·葡萄 PR10 基因半定量 RT-PCR 及定量 RT-PCR 检测 | 第100页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 融合蛋白在大肠杆菌中表达、提取及纯化 | 第100-101页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 融合蛋白的 RNASE 和 DNASE 活性检测 | 第101页 |
| ·VPPR10.2 融合蛋白体外抑菌活性分析 | 第101-102页 |
| ·野生华东 VPPR10.2 在葡萄叶片中瞬时表达及抑菌活性分析 | 第102页 |
| ·VPPR10.2 荧光亚细胞定位分析 | 第102页 |
| ·VPPR10.2 多克隆抗体制备和葡萄叶片免疫定位分析 | 第102-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-127页 |
| ·葡萄 PR10 家族成员受霜霉病菌和白粉病菌诱导表达差异分析 | 第103-104页 |
| ·中国野生华东葡萄‘白河-35-1’PR10.2 基因克隆及序列分析 | 第104-106页 |
| ·野生华东葡萄‘白河-35-1’ VPPR10.2 基因启动子克隆及序列分析 | 第106-111页 |
| ·葡萄病程相关蛋白基因 PR10.2 组织特异表达模式分析 | 第111页 |
| ·白粉菌和霜霉菌诱导野生华东葡萄 VPPR10.2 表达模式分析 | 第111-113页 |
| ·生物信号分子诱导野生华东葡萄 VPPR10.2 表达模式分析 | 第113页 |
| ·冷、热和干旱胁迫诱导野生华东葡萄 VPPR10.2 表达模式分析 | 第113-114页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 原核表达及纯化 | 第114-115页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 的 RNASE 酶活性分析 | 第115-117页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 的 DNASE 酶活性分析 | 第117-118页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 体外抑菌活性分析 | 第118页 |
| ·过量表达 VPPR10.2 基因提高欧洲葡萄对霜霉菌的抗性分析 | 第118-122页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 在洋葱表皮细胞中的荧光定位 | 第122-123页 |
| ·野生华东葡萄 VPPR10.2 在葡萄叶片表皮细胞定位及与病原菌互作.. | 第123-127页 |
| ·讨论 | 第127-130页 |
| 第六章 结论 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-143页 |
| 缩略词 | 第143-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 作者简介 | 第145-146页 |
