| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 第一部分 X-连锁隐性鱼鳞病基因缺失区域研究 | 第16-60页 |
| 一、前言 | 第16-18页 |
| ·X-连锁隐性鱼鳞病概述 | 第16页 |
| ·X-连锁隐性鱼鳞病与STS基因缺失 | 第16-17页 |
| ·X-连锁隐性鱼鳞病与Xp22.3邻近基因缺失综合征 | 第17页 |
| ·研究目的 | 第17-18页 |
| 二、实验材料 | 第18-24页 |
| ·家系临床资料 | 第18-19页 |
| ·家系1 | 第18页 |
| ·家系2与家系3 | 第18-19页 |
| ·仪器设备 | 第19-20页 |
| ·试剂 | 第20-22页 |
| ·软件及数据库 | 第22-24页 |
| 三、实验方法 | 第24-31页 |
| ·血液样品的采集 | 第24页 |
| ·基因组DNA提取 | 第24页 |
| ·PCR扩增 | 第24-28页 |
| ·常规PCR扩增 | 第24-27页 |
| ·Gap-PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·PCR产物凝胶回收 | 第28-29页 |
| ·目的DNA片段测序 | 第29页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·基因型分析 | 第30-31页 |
| 四、实验结果 | 第31-38页 |
| ·家系1临床诊断 | 第31页 |
| ·家系1先证者STS基因缺失检测 | 第31页 |
| ·家系1正常女性个体(Ⅲ-2)携带者状态鉴定 | 第31-32页 |
| ·家系1先证者STS基因缺失断裂点克隆 | 第32-35页 |
| ·断裂点范围初步定位 | 第32-33页 |
| ·断裂点范围精细定位 | 第33页 |
| ·Gap-PCR扩增结果 | 第33-34页 |
| ·Gap-PCR产物测序结果及断裂点确定 | 第34-35页 |
| ·家系2与家系3中患者STS基因缺失断裂点克隆 | 第35-38页 |
| ·断裂点初步定位 | 第35页 |
| ·断裂点精细定位 | 第35-36页 |
| ·Gap-PCR扩增结果 | 第36-38页 |
| 五、讨论 | 第38-46页 |
| ·疾病遗传方式 | 第38页 |
| ·STS基因缺失检测 | 第38-41页 |
| ·STS基因外显子缺失检测方法 | 第38-39页 |
| ·STS基因断裂点精细定位 | 第39-40页 |
| ·STS缺失断裂点克隆 | 第40-41页 |
| ·STS基因的缺失范围 | 第41页 |
| ·Xp22.3邻近基因缺失综合征 | 第41-42页 |
| ·X-连锁隐性Kallmann综合症 | 第41-42页 |
| ·X-连锁智力发育不良 | 第42页 |
| ·STS缺失产生的重组机制 | 第42-44页 |
| ·STS缺失重组机制与高频缺失出现的原因 | 第44-46页 |
| 六、小结 | 第46-47页 |
| 七、参考文献 | 第47-50页 |
| 八、文献综述 | 第50-60页 |
| 第二部分 先天性全身性毛发增多症致病基因的定位克隆研究 | 第60-125页 |
| 一、前言 | 第60-63页 |
| ·X连锁先天性全身性毛发增多症 | 第60页 |
| ·脊柱裂 | 第60-61页 |
| ·先天性脊柱侧弯 | 第61页 |
| ·研究目的 | 第61-63页 |
| 二、实验材料 | 第63-67页 |
| ·家系及临床资料 | 第63-65页 |
| ·家系概述 | 第63页 |
| ·临床资料 | 第63-65页 |
| ·仪器设备 | 第65页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·软件及数据库 | 第66-67页 |
| 三、实验方法 | 第67-76页 |
| 3. 1 致病基因定位 | 第67-70页 |
| ·血液样品的采集 | 第67页 |
| ·核型分析 | 第67-68页 |
| ·基因组DNA提取 | 第68页 |
| ·全基因组扩增患者基因组DNA | 第68-69页 |
| ·PCR扩增微卫星标记 | 第69页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第69页 |
| ·单体型分析 | 第69页 |
| ·两点连锁分析 | 第69-70页 |
| ·致病基因克隆鉴定 | 第70-72页 |
| ·候选区域突变筛查 | 第70-71页 |
| ·候选区域缺失检测 | 第71-72页 |
| ·候选基因表达情况分析 | 第72-74页 |
| ·患者组织样本采集 | 第72页 |
| ·患者皮肤成纤维细胞的原代培养 | 第72页 |
| ·皮肤成纤维细胞的传代培养 | 第72页 |
| ·患者及正常人表皮成纤维细胞RNA提取 | 第72-73页 |
| ·患者与正常人皮肤组织RNA提取 | 第73页 |
| ·患者及正常人表皮成纤维细胞RNA反转录为cDNA | 第73-74页 |
| ·PCR扩增候选基因转录本 | 第74页 |
| ·先天性全身性毛发增多症家系女性患者(Ⅳ-1)产前诊断 | 第74-76页 |
| ·绒毛样品采集 | 第74页 |
| ·绒毛DNA提取 | 第74-75页 |
| ·PCR扩增微卫星标记及产前诊断结果分析 | 第75-76页 |
| 四、实验结果 | 第76-93页 |
| ·先天性全身性毛发增多症家系临床资料 | 第76-77页 |
| ·遗传方式 | 第76页 |
| ·临床诊断 | 第76-77页 |
| ·核型分析 | 第77-78页 |
| ·致病基因定位 | 第78-81页 |
| ·家系个体微卫星标记位点等位基因型 | 第78-79页 |
| ·多态性标记与致病基因两点连锁分析结果 | 第79-81页 |
| ·候选区域致病突变筛查 | 第81-88页 |
| ·候选区域已知基因突变筛查 | 第81-84页 |
| ·候选区域假基因突变筛查 | 第84-85页 |
| ·候选区域高度保守序列突变筛查 | 第85-88页 |
| ·候选区域其它序列突变筛查 | 第88页 |
| ·连锁范围缺失检测 | 第88-90页 |
| ·连锁范围内候选基因表达情况分析 | 第90-92页 |
| ·先天性毛发增多症家系女性患者(Ⅳ-1)产前诊断 | 第92-93页 |
| 五、讨论 | 第93-108页 |
| ·家系临床资料采集与分析 | 第93-97页 |
| ·甘肃家系的地缘优势 | 第93页 |
| ·临床表现与诊断 | 第93-96页 |
| ·遗传方式 | 第96页 |
| ·生物材料的采集 | 第96-97页 |
| ·致病基因定位 | 第97-99页 |
| ·基因型分析 | 第97-98页 |
| ·两点连锁分析 | 第98-99页 |
| ·致病突变筛查 | 第99-104页 |
| ·知基因突变筛查 | 第100-102页 |
| ·假基因突变筛查 | 第102-103页 |
| ·高度保守序列突变筛查 | 第103-104页 |
| ·其它候选区域突变筛查 | 第104页 |
| ·候选区域缺失检测 | 第104页 |
| ·RT-PCR结果 | 第104-105页 |
| ·家系女性患者(Ⅳ-1)产前基因诊断 | 第105页 |
| ·突变机制讨论 | 第105-106页 |
| ·三个家系中未知突变与表型关系讨论 | 第106-107页 |
| ·展望 | 第107-108页 |
| 六、小结 | 第108-109页 |
| 七、参考文献 | 第109-112页 |
| 八、文献综述 | 第112-125页 |
| 缩略词 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 个人简历 | 第128页 |
