| 图片目录 | 第1页 |
| 表格目录 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一部分 麻疯树毒蛋白(curcin)基因转化水稻的研究 | 第11-48页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 材料和方法 | 第12-23页 |
| ·实验材料 | 第12-15页 |
| ·水稻品种 | 第12-13页 |
| ·菌株 | 第13页 |
| ·质粒 | 第13页 |
| ·主要实验仪器、试剂(盒)和酶 | 第13-14页 |
| ·培养基 | 第14-15页 |
| ·细菌培养基 | 第14页 |
| ·植物培养基 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-23页 |
| ·麻疯树基因组DNA的提取 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第16页 |
| ·麻疯树毒蛋白(curcin)基因ORF的扩增 | 第16-18页 |
| ·引物 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增 | 第17页 |
| ·PCR扩增片段与T载体的连接及转化 | 第17页 |
| ·转化子的鉴定 | 第17-18页 |
| ·植物表达载体pB1121-curcin的构建 | 第18-20页 |
| ·植物表达载体p81121的制备 | 第18-19页 |
| ·目的片段的制备 | 第19页 |
| ·植物表达载体pB1121-curein的构建 | 第19页 |
| ·表达载体pB1121-curcin向农杆菌的转化 | 第19-20页 |
| ·转化子的鉴定 | 第20页 |
| ·水稻愈伤组织的培养和转化前的预处理 | 第20页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第20页 |
| ·Acivicin对转化受体的预处理 | 第20页 |
| ·农杆菌对水稻愈伤组织的转化 | 第20-21页 |
| ·农杆菌菌液的准备 | 第20页 |
| ·愈伤组织的转化 | 第20-21页 |
| ·转化愈伤组织中GUS活性检测 | 第21页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选和植株再生 | 第21-22页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第22-23页 |
| ·水稻叶片总DNA的提取 | 第22页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第22页 |
| ·转基因植株的反转录聚合链式扩增检测 | 第22-23页 |
| ·水稻转化频率的计算 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-37页 |
| ·麻疯树幼叶总DNA的质量分析 | 第23页 |
| ·curcin基因的扩增 | 第23-24页 |
| ·植物表达载体pB1121-curcin的构建 | 第24-26页 |
| ·植物表达载体pB1121的制备 | 第24页 |
| ·目的片段的制备 | 第24-25页 |
| ·植物表达载体pB1121-curcin的鉴定 | 第25页 |
| ·农杆菌中pB1121-curcin的鉴定 | 第25-26页 |
| ·水稻愈伤组织的培养和转化前的预处理 | 第26-29页 |
| ·不同基本培养基对水稻成熟胚愈伤组织诱导能力的影响 | 第27-28页 |
| ·不同激素浓度诱导愈伤组织的效果 | 第28页 |
| ·第一次继代时间和继代次数对愈伤质量的影响 | 第28-29页 |
| ·农杆菌对水稻愈伤组织的转化 | 第29-32页 |
| ·农杆菌浸染时间的确定 | 第29-30页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第30页 |
| ·Acivicin预处理对转化的影响 | 第30-31页 |
| ·愈伤组织生理状态对转化的影响 | 第31页 |
| ·Cefazolin浓度对愈伤组织生长的影响及农杆菌脱菌方式的选择 | 第31-32页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选和植株再生 | 第32-34页 |
| ·G418筛选压的确定 | 第33页 |
| ·不同激素配比对愈伤组织分化的影响 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第34-37页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第34页 |
| ·转基因植株的RT-POR检测 | 第34-37页 |
| 3 讨论 | 第37-43页 |
| ·利用麻疯树毒蛋白基因防治真菌病害 | 第37-39页 |
| ·植物表达载体pB1121-curcin的构建 | 第39-40页 |
| ·目的片段的分子克隆 | 第39页 |
| ·启动子的选择 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化体系 | 第40-43页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第40-41页 |
| ·Acivicin对愈伤组织的预处理 | 第41-42页 |
| ·农杆菌与愈伤组织的相互作用 | 第42页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选、分化与植株再生 | 第42-43页 |
| 小结 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 第二部分 文献综述 植物抗真菌基因工程及水稻遗传转化研究进展 | 第48-76页 |
| 1.引言 | 第48-49页 |
| 2.植物抗真菌基因工程研究现状 | 第49-57页 |
| ·植物抗真菌基因工程主要策略 | 第49-50页 |
| ·导入植物自身的抗病基因 | 第49-50页 |
| ·导入病原菌的无毒基因 | 第50页 |
| ·导入抗真菌蛋白基因 | 第50页 |
| ·抗真菌蛋白在植物抗真菌基因工程中的应用 | 第50-57页 |
| ·各类抗真菌蛋白的功能特点 | 第50-53页 |
| ·病程相关蛋白(Pathogenesis-Related Proteins,PRs) | 第50-52页 |
| ·核糖体失活蛋白(Ribosome Inactivating Proteins,RIPs) | 第52页 |
| ·植物防卫素(Plant Defensin) | 第52页 |
| ·类亲环蛋白(Cyclophilin-like Protein) | 第52-53页 |
| ·脂类转运蛋白(Lipid-transferProteins,LTPs) | 第53页 |
| ·其它抗真菌蛋白 | 第53页 |
| ·抗真菌蛋白在植物抗真菌基因工程中的应用 | 第53-57页 |
| ·几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因的应用 | 第53-55页 |
| ·RIP基因的应用 | 第55-56页 |
| ·防卫素基因及其它抗真菌蛋白基因的应用 | 第56-57页 |
| 3.麻疯树毒蛋白(curcin)研究进展 | 第57-59页 |
| ·麻疯树毒蛋白的理化性质 | 第57-58页 |
| ·麻疯树毒蛋白的作用机制及毒性 | 第57-58页 |
| ·麻疯树毒蛋白的抗真菌活性 | 第58页 |
| ·麻疯树毒蛋白的基因结构 | 第58-59页 |
| ·cDNA的结构 | 第58-59页 |
| ·基因组DNA的结构 | 第59页 |
| 4.水稻遗传转化研究进展 | 第59-70页 |
| ·水稻遗传转化的主要方法及原理 | 第59-63页 |
| ·PEG法(PEG-mediated transformation) | 第60页 |
| ·电激法(Electroporation-mediatedtransformation) | 第60页 |
| ·基因枪法(Particale bombardment,Particalegun) | 第60-61页 |
| ·花粉管通道法(pollen tube-pathway transformation) | 第61页 |
| ·农杆菌介导转化法(Agrobacterium-mediated transformation) | 第61-62页 |
| ·其它直接转化法 | 第62-63页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化研究进展 | 第63-68页 |
| ·影响农杆菌介导水稻转化的因素 | 第63-66页 |
| ·水稻良好受体系统的建立 | 第63-64页 |
| ·农杆菌浸染体系 | 第64-65页 |
| ·选择标记基因和筛选剂 | 第65页 |
| ·组织培养条件 | 第65-66页 |
| ·农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程中的应用进展 | 第66-68页 |
| ·问题与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 在读期间发表及待发表论文情况 | 第77页 |
| 获奖情况 | 第77-78页 |
