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花椒再生体系的建立及ipt基因遗传转化研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
文献综述第10-21页
 1 木本植物基因工程研究进展第10-15页
   ·植物转基因概述第10-11页
   ·木本植物遗传转化特点第11-12页
   ·目的基因第12-13页
     ·抗性基因第12-13页
     ·品质改良第13页
   ·木本植物遗传转化方法第13-14页
     ·受伤植物器官直接感染第13页
     ·整体植株接种共感染第13页
     ·原生质体转化第13页
     ·体细胞或胚细胞的转化第13-14页
     ·附体腋芽直接感染第14页
   ·木本植物遗传转化影响因素第14-15页
 2 花椒研究进展第15-19页
   ·国内研究进展第15-18页
     ·花椒育种学研究第15页
     ·花椒育苗技术第15-16页
     ·花椒组织培养研究第16-17页
     ·花椒栽培学研究第17页
     ·花椒加工利用第17-18页
     ·花椒药理作用第18页
   ·国外研究现状第18-19页
   ·花椒研究发展趋势第19页
 3 植物转ipt基因研究进展第19-21页
第一章 花椒再生体系的建立第21-31页
 1 材料与方法第21-23页
   ·材料第21页
   ·方法第21-23页
     ·材料的预处理第21-22页
     ·培养基第22页
     ·培养条件第22页
     ·培养过程第22-23页
 2 结果与分析第23-29页
   ·诱导培养第23页
     ·最佳取材时期及消毒时间确定第23页
     ·无菌苗生长情况第23页
   ·愈伤组织诱导及分化第23-27页
     ·不同培养基对花椒愈伤组织诱导的影响第23-24页
     ·不同激素配比对花椒叶片愈伤组织诱导及分化的影响第24-25页
     ·不同激素配比对花椒叶柄愈伤组织诱导及分化的影响第25-26页
     ·不同激素配比对花椒茎段愈伤组织诱导及分化的影响第26-27页
   ·茎段不定芽再生方式第27-28页
   ·生根及移栽第28-29页
 3 讨论第29-31页
   ·取材第29页
   ·外植体种类第29-30页
   ·激素对花椒再生的影响第30页
   ·生根培养第30-31页
第二章 农杆菌介导的花椒遗传转化研究第31-47页
 前言第31页
 1 实验材料第31-35页
   ·植物材料第31页
   ·农杆菌菌株及质粒第31-32页
   ·主要生物化学试剂第32页
   ·主要仪器第32页
   ·常用培养基第32-33页
     ·细菌培养基第32-33页
     ·植物培养基:第33页
   ·常用溶液第33-35页
 2 实验方法第35-39页
   ·材料的准备第35页
   ·根癌农杆菌的培养第35-36页
   ·遗传转化步骤第36页
   ·卡那霉素(Kan)有效选择压的确定第36页
   ·不同因素对遗传转化影响第36-37页
     ·预培养时间第36页
     ·农杆菌菌液浓度第36页
     ·浸染时间第36页
     ·共培养时间第36-37页
     ·添加乙酰丁香酮(AS)对遗传转化影响第37页
     ·延迟筛选第37页
   ·GUS报告基因活性的检测第37页
   ·转基因植株的PCR检测第37-39页
     ·植物基因组DNA的提取(CTAB法)第37页
     ·质粒DNA提取(小量快速抽提)第37-38页
     ·引物设计及PCR扩增程序第38-39页
 3 结果与分析第39-45页
   ·卡那霉素(Kan)有效选择压的确定第39页
   ·菌液浓度对转化的影响第39-40页
   ·不同因素对遗传转化影响第40-43页
     ·预培养时间对花椒遗传转化的影响第40页
     ·浸染时间对花椒遗传转化的影响第40-41页
     ·共培养时间第41-42页
     ·添加AS对花椒遗传转化的影响第42页
     ·延迟筛选对遗传转化的影响第42-43页
   ·转ipt基因对抗性芽诱导和转化植株生根的影响第43页
   ·转基因植株的GUS活性检测第43-45页
   ·转基因植株PCR分子检测第45页
 4 讨论第45-47页
   ·影响花椒遗传转化效率的因素第45-46页
     ·农杆菌与共培养问题第45-46页
     ·延迟筛选对遗传转化的影响第46页
   ·ipt基因表达对转化植株的影响第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-55页
附录第55-57页

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