花椒再生体系的建立及ipt基因遗传转化研究
中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-21页 |
1 木本植物基因工程研究进展 | 第10-15页 |
·植物转基因概述 | 第10-11页 |
·木本植物遗传转化特点 | 第11-12页 |
·目的基因 | 第12-13页 |
·抗性基因 | 第12-13页 |
·品质改良 | 第13页 |
·木本植物遗传转化方法 | 第13-14页 |
·受伤植物器官直接感染 | 第13页 |
·整体植株接种共感染 | 第13页 |
·原生质体转化 | 第13页 |
·体细胞或胚细胞的转化 | 第13-14页 |
·附体腋芽直接感染 | 第14页 |
·木本植物遗传转化影响因素 | 第14-15页 |
2 花椒研究进展 | 第15-19页 |
·国内研究进展 | 第15-18页 |
·花椒育种学研究 | 第15页 |
·花椒育苗技术 | 第15-16页 |
·花椒组织培养研究 | 第16-17页 |
·花椒栽培学研究 | 第17页 |
·花椒加工利用 | 第17-18页 |
·花椒药理作用 | 第18页 |
·国外研究现状 | 第18-19页 |
·花椒研究发展趋势 | 第19页 |
3 植物转ipt基因研究进展 | 第19-21页 |
第一章 花椒再生体系的建立 | 第21-31页 |
1 材料与方法 | 第21-23页 |
·材料 | 第21页 |
·方法 | 第21-23页 |
·材料的预处理 | 第21-22页 |
·培养基 | 第22页 |
·培养条件 | 第22页 |
·培养过程 | 第22-23页 |
2 结果与分析 | 第23-29页 |
·诱导培养 | 第23页 |
·最佳取材时期及消毒时间确定 | 第23页 |
·无菌苗生长情况 | 第23页 |
·愈伤组织诱导及分化 | 第23-27页 |
·不同培养基对花椒愈伤组织诱导的影响 | 第23-24页 |
·不同激素配比对花椒叶片愈伤组织诱导及分化的影响 | 第24-25页 |
·不同激素配比对花椒叶柄愈伤组织诱导及分化的影响 | 第25-26页 |
·不同激素配比对花椒茎段愈伤组织诱导及分化的影响 | 第26-27页 |
·茎段不定芽再生方式 | 第27-28页 |
·生根及移栽 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
·取材 | 第29页 |
·外植体种类 | 第29-30页 |
·激素对花椒再生的影响 | 第30页 |
·生根培养 | 第30-31页 |
第二章 农杆菌介导的花椒遗传转化研究 | 第31-47页 |
前言 | 第31页 |
1 实验材料 | 第31-35页 |
·植物材料 | 第31页 |
·农杆菌菌株及质粒 | 第31-32页 |
·主要生物化学试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·常用培养基 | 第32-33页 |
·细菌培养基 | 第32-33页 |
·植物培养基: | 第33页 |
·常用溶液 | 第33-35页 |
2 实验方法 | 第35-39页 |
·材料的准备 | 第35页 |
·根癌农杆菌的培养 | 第35-36页 |
·遗传转化步骤 | 第36页 |
·卡那霉素(Kan)有效选择压的确定 | 第36页 |
·不同因素对遗传转化影响 | 第36-37页 |
·预培养时间 | 第36页 |
·农杆菌菌液浓度 | 第36页 |
·浸染时间 | 第36页 |
·共培养时间 | 第36-37页 |
·添加乙酰丁香酮(AS)对遗传转化影响 | 第37页 |
·延迟筛选 | 第37页 |
·GUS报告基因活性的检测 | 第37页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第37-39页 |
·植物基因组DNA的提取(CTAB法) | 第37页 |
·质粒DNA提取(小量快速抽提) | 第37-38页 |
·引物设计及PCR扩增程序 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-45页 |
·卡那霉素(Kan)有效选择压的确定 | 第39页 |
·菌液浓度对转化的影响 | 第39-40页 |
·不同因素对遗传转化影响 | 第40-43页 |
·预培养时间对花椒遗传转化的影响 | 第40页 |
·浸染时间对花椒遗传转化的影响 | 第40-41页 |
·共培养时间 | 第41-42页 |
·添加AS对花椒遗传转化的影响 | 第42页 |
·延迟筛选对遗传转化的影响 | 第42-43页 |
·转ipt基因对抗性芽诱导和转化植株生根的影响 | 第43页 |
·转基因植株的GUS活性检测 | 第43-45页 |
·转基因植株PCR分子检测 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
·影响花椒遗传转化效率的因素 | 第45-46页 |
·农杆菌与共培养问题 | 第45-46页 |
·延迟筛选对遗传转化的影响 | 第46页 |
·ipt基因表达对转化植株的影响 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录 | 第55-57页 |