玉米SAMS基因的克隆及表达分析
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 综述 | 第9-17页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶的编码基因 | 第9-10页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶的结构 | 第10页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶催化机理 | 第10-11页 |
·S-腺苷甲硫氨酸的临床应用 | 第11-12页 |
·S-腺苷甲硫氨酸的制备方法和稳定性研究 | 第12-13页 |
·S-腺苷甲硫氨酸的生物学意义 | 第13-14页 |
·甲基供体 | 第13页 |
·转氨丙基作用 | 第13-14页 |
·转硫作用 | 第14页 |
·S-腺苷甲硫氨酸在植物中参与胁迫相关的途径 | 第14-16页 |
·乙烯和多胺的合成 | 第14-15页 |
·甜菜碱代谢途径中的作用 | 第15-16页 |
·本研究的主要内容及意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-27页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·玉米材料 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·仪器 | 第17-18页 |
·RNA的提取 | 第18-19页 |
·热酚法提取玉米总RNA | 第18页 |
·Trizol一步法提取玉米总RNA | 第18-19页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测RNA | 第19页 |
·扩增SAMS基因 | 第19-22页 |
·反转录合成cDNA | 第19页 |
·引物设计 | 第19-20页 |
·PCR扩增玉米SAMS基因 | 第20页 |
·PCR产物纯化 | 第20-21页 |
·感受态细胞的制备 | 第21页 |
·回收片段的连接 | 第21页 |
·转化SAMS基因 | 第21-22页 |
·质粒提取 | 第22页 |
·生物信息学分析 | 第22-23页 |
·NORTHERN杂交表达分析 | 第23-25页 |
·药剂的配制 | 第23页 |
·探针的制备 | 第23页 |
·杂交膜的制备 | 第23-24页 |
·杂交 | 第24页 |
·显色 | 第24页 |
·显影定影 | 第24-25页 |
·原核表达分析 | 第25-27页 |
·引物设计 | 第25页 |
·重组质粒构建 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-36页 |
·玉米总RNA提取 | 第27页 |
·RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
·SAMS基因生物信息学分析 | 第28-35页 |
·测序结果分析 | 第28-29页 |
·疏水性分析 | 第29页 |
·二级结构分析 | 第29-30页 |
·出核肽及信号肽分析 | 第30页 |
·保守域分析 | 第30-31页 |
·三维结构同源建模 | 第31页 |
·玉米中SAMS基因家族 | 第31-33页 |
·构建系统进化树 | 第33-35页 |
·NORTHERN杂交分析 | 第35页 |
·重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
在读期间发表论文 | 第43-44页 |
作者简介 | 第44-45页 |
致谢 | 第45页 |