| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-21页 |
| ·植物抗胁迫相关分子生物学研究 | 第9-10页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶的研究现状 | 第10-17页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶简介 | 第10页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶在动物中的研究 | 第10-12页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶在植物中的研究 | 第12页 |
| ·植物GAPDH的亚细胞定位 | 第12-13页 |
| ·GAPDH在植物中的主要功能 | 第13-16页 |
| ·GAPDH作为看家基因和内参基因的应用 | 第16-17页 |
| ·RACE技术 | 第17页 |
| ·酿酒酵母作为外源基因表达系统的研究进展 | 第17-19页 |
| ·用于酿酒酵母基因表达的两类载体 | 第18页 |
| ·酿酒酵母表达外源基因的特点 | 第18-19页 |
| ·有关西伯利亚蓼的研究 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第21-25页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株与载体 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-23页 |
| ·酶类及主要试剂 | 第21页 |
| ·酵母转化试剂 | 第21-22页 |
| ·酵母RNA提取试剂 | 第22页 |
| ·杂交检测试剂 | 第22页 |
| ·总RNA提取试剂 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-37页 |
| ·PsGAPDH基因的3′及5′RACE克隆 | 第25-29页 |
| ·3′及5′RACE引物的设计 | 第25页 |
| ·西伯利亚蓼总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·DNA的消化 | 第26页 |
| ·总RNA的反转录 | 第26页 |
| ·3′及5′RACE的PCR反应 | 第26-27页 |
| ·RACE片段的克隆与测序 | 第27-29页 |
| ·全长cDNA序列的扩增 | 第29-30页 |
| ·全长cDNA序列引物的设计 | 第29页 |
| ·RACE全长的PCR反应 | 第29页 |
| ·RACE全长片段的克隆与测序 | 第29-30页 |
| ·PsGAPDH cDNA的序列分析 | 第30-31页 |
| ·PsGAPDH基因在西伯利亚蓼中表达的研究 | 第31-33页 |
| ·探针的制备 | 第31页 |
| ·Northern印迹杂交检测 | 第31-33页 |
| ·加酶切位点的全长目的片段的获得及酵母表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·全长片段的克隆 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·重组质粒的提取 | 第33页 |
| ·重组质粒的PCR扩增和双酶切检测 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pYES-GAPDH的酵母遗传转化 | 第34页 |
| ·转化酵母的菌落PCR检测 | 第34-35页 |
| ·含重组质粒PYES2-GAPDH的酵母的RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| ·INVSCI(pYES-GAPDH)的NaCl胁迫处理 | 第36-37页 |
| ·INVSCI(pYES-GAPDH)的NaHCO3胁迫处理 | 第36-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-46页 |
| ·西伯利亚蓼总RNA的获得 | 第37页 |
| ·3′及5′方向序列的扩增 | 第37页 |
| ·全长cDNA序列的扩增 | 第37-38页 |
| ·克隆产物的PCR鉴定 | 第38页 |
| ·PsGAPDH基因的全长cDNA序列分析 | 第38-42页 |
| ·PsGAPDH基因在西伯利亚蓼中的表达 | 第42-43页 |
| ·西伯利亚蓼总RNA的获得 | 第42页 |
| ·Northern杂交结果 | 第42-43页 |
| ·重组质粒PYES2-GAPDH的PCR扩增检测和双酶切检测 | 第43页 |
| ·重组质粒PYES2-GAPDH的酵母PCR检测 | 第43-44页 |
| ·含重组质粒PYES2-GAPDH的酵母的RT-PCR检测 | 第44页 |
| ·INVSCI(pYES-GAPDH)重组酵母的抗盐胁迫分析 | 第44-46页 |
| 5 讨论 | 第46-50页 |
| ·PsGAPDH基因的属性分析 | 第46页 |
| ·PsGAPDH基因的进化分析 | 第46页 |
| ·PsGAPDH基因的抗性分析 | 第46-47页 |
| ·西伯利亚蓼PsGAPDH基因的northern杂交分析 | 第47-48页 |
| ·西伯利亚蓼的耐盐机制分析 | 第48页 |
| ·GAPDH基因不同时期表达量变化分析 | 第48-50页 |
| 6 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
