摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-21页 |
·本研究的目的和意义 | 第10-11页 |
·文献综述 | 第11-20页 |
·植物对盐胁迫的反应和耐盐性 | 第11-12页 |
·植物盐胁迫信号的转导过程 | 第12-15页 |
·MAPKs 在植物耐受渗透胁迫过程中的作用研究 | 第15-18页 |
·RNAi 技术及其在植物中的应用研究 | 第18-19页 |
·基因芯片技术的应用及表达谱的分析 | 第19-20页 |
·本论文的主要研究内容 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-36页 |
·OSMAPK4 基因RNAI 载体PCMI 的构建 | 第21-25页 |
·试验材料 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-25页 |
·农杆菌介导法转化水稻 | 第25-26页 |
·试验材料 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26页 |
·抗性水稻植株的PCR 检测 | 第26-28页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-28页 |
·PCR 阳性植株T1 代幼苗的BIALAPHOS 筛选及PCR 检测 | 第28-29页 |
·PCR 阳性植株T1 代幼苗的Bialaphos 筛选 | 第28-29页 |
·抗Bialaphos 植株的PCR 检测 | 第29页 |
·转PCME12 的PCR 阳性植株T1 代幼苗的耐盐性检测 | 第29-30页 |
·试验材料 | 第29-30页 |
·试验方法 | 第30页 |
·目的基因转录的实时荧光定量PCR (REAL-TIME PCR)检测 | 第30-34页 |
·试验材料 | 第30-31页 |
·试验方法 | 第31-34页 |
·转基因植株的转录组分析 | 第34-35页 |
·水稻OsMAPK4 基因芯片杂交材料的准备 | 第34页 |
·芯片杂交结果的生物信息学分析方法 | 第34页 |
·OsMAPK4 基因下游基因的分析 | 第34-35页 |
·统计分析方法 | 第35-36页 |
3. 结果与分析 | 第36-62页 |
·植物表达载体的构建 | 第36-41页 |
·植物低表达载体pCMI 的构建 | 第36-40页 |
·重组质粒导入根癌农杆菌 | 第40-41页 |
·农杆菌介导法转化水稻 | 第41-42页 |
·抗性水稻植株的PCR 检测 | 第42-43页 |
·转OsMAPK4 基因抗性植株的PCR 检测 | 第42-43页 |
·PCR 阳性植株T1 代幼苗的BIALAPHOS 筛选及PCR 检测 | 第43-47页 |
·T1 代幼苗Bialaphos 筛选 | 第43-46页 |
·T1 代Bialaphos 筛选存活植株的PCR 检测 | 第46-47页 |
·转PCME12 的PCR 阳性植株T1 代幼苗的耐盐性检测 | 第47-51页 |
·种子发芽期NaCl 筛选压力的确定 | 第47-49页 |
·转pCME12 PCR 阳性植株的T1 代种子耐盐性检测 | 第49-51页 |
·目的基因转录的实时荧光定量PCR (REAL-TIME PCR)检测 | 第51-57页 |
·RNA 的提取、纯化及RT-PCR 检测 | 第51页 |
·引物筛选 | 第51-53页 |
·目的基因转录的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测 | 第53-57页 |
·转基因植株的转录组分析 | 第57-62页 |
·准备实验材料送交芯片公司 | 第57页 |
·芯片数据的初步分析 | 第57-58页 |
·转录组表达差异分析 | 第58-60页 |
·盐胁迫下水稻基因表达谱分析 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
·RNAI 技术的应用 | 第62页 |
·基因表达谱技术的应用 | 第62页 |
·利用抗BIA 株系筛选T1 代转基因植株的可行性 | 第62-63页 |
·转OSMAPK4 基因植株抗逆性提高的分子机理 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-66页 |
·构建了植物表达载体PCMI | 第64页 |
·获得了转PCMI 和转PME12 水稻PCR 阳性植株 | 第64页 |
·筛选得到抗BIALAPHOS 且PCR 检测呈阳性的T1 代植株 | 第64页 |
·分析了转PME12T1 代水稻植株的耐盐性 | 第64页 |
·检测了转基因植株在正常及盐诱导后OSMAPK4 基因的转录水平 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第70页 |