| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| ·文献综述 | 第13-23页 |
| ·半夏组织培养研究 | 第15-16页 |
| ·外植体对半夏愈伤组织的影响 | 第15页 |
| ·培养基成分对半夏组织培养的影响 | 第15页 |
| ·半夏试管块茎诱导 | 第15-16页 |
| ·生长物质对试管块茎形成的调节作用的研究进展 | 第16-19页 |
| ·赤霉素 | 第16-17页 |
| ·细胞分裂素 | 第17页 |
| ·生长素 | 第17页 |
| ·茉莉酸类物质 | 第17-18页 |
| ·脱落酸 | 第18页 |
| ·乙烯 | 第18页 |
| ·水杨酸 | 第18-19页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第19-23页 |
| ·mRNA差异显示PCR技术的主要原理 | 第19-20页 |
| ·mRNA差异显示技术(DDRT-PCR) | 第20-21页 |
| ·DDRT-PCR的衍生技术 | 第21页 |
| ·mRNA差异显示技术在植物生理研究中的应用 | 第21-23页 |
| ·研究目的、内容及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·材料处理 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-26页 |
| ·激素和试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·分子主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·培养条件 | 第26页 |
| ·基本培养基 | 第26页 |
| ·生长条件 | 第26页 |
| ·半夏试管块茎的培育 | 第26-27页 |
| ·酶联免疫吸附分析法原理 | 第27页 |
| ·样品中激素的提取 | 第27-28页 |
| ·样品测定 | 第28-29页 |
| ·总RNA的提取及检测 | 第29-31页 |
| ·实验器皿的处理 | 第29页 |
| ·两种总RNA抽提方法的比较 | 第29-30页 |
| ·RNA质量和浓度的检测 | 第30-31页 |
| ·mRNA差异显示(DDRT-PCR) | 第31-36页 |
| ·逆转录反应 | 第31页 |
| ·mRNA差异显示技术体系的建立 | 第31-32页 |
| ·聚丙烯酰胺非变性凝胶电泳分离差异片段 | 第32页 |
| ·差异表达基因片段的回收及重扩增 | 第32-33页 |
| ·差异cDNA片段纯化回收 | 第33-34页 |
| ·阳性差异片段的克隆和测序 | 第34-35页 |
| ·对差异显著的片段进行半定量RT-PCR验证 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-55页 |
| ·GA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第36-38页 |
| ·形态学观察 | 第36-37页 |
| ·抑制GA生物合成对内源生长物质含量的影响 | 第37-38页 |
| ·ABA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第38-40页 |
| ·形态学观察 | 第38页 |
| ·抑制ABA生物合成对内源生长物质含量的影响 | 第38-40页 |
| ·JA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第40-42页 |
| ·形态学观察 | 第40-41页 |
| ·JA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第41-42页 |
| ·总RNA的质量和浓度检测结果 | 第42-44页 |
| ·2种提取方法总RNA的质量比较 | 第42-43页 |
| ·改进提取法提取总RNA的完整性分析 | 第43-44页 |
| ·cDNA合成检测RNA的RT活性分析 | 第43页 |
| ·表达基因的RT-PCR扩增检测分析 | 第43-44页 |
| ·MRNA差异条带的显示 | 第44-55页 |
| ·DDRT-PCR正交优化 | 第44-47页 |
| ·不同诱导天数mRNA表达差异 | 第47-48页 |
| ·回收片段的PCR重扩增 | 第48-49页 |
| ·重扩增产物的克隆及酶切鉴定 | 第49页 |
| ·差异片段cDNA的测序及与已知基因的同源性比较 | 第49-54页 |
| ·半定量RT-PCR反应验证 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-60页 |
| ·GA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第55-56页 |
| ·ABA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第56页 |
| ·JA抑制剂对半夏试管块茎膨大和内源激素含量的影响 | 第56页 |
| ·总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·DDRT-PCR正交优化 | 第57-58页 |
| ·MRNA差异显示得到的相关基因片段 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录1 | 第66-71页 |
| 附录2 | 第71-72页 |
| 附录3 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 下一步工作设想 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |
| 研究生在读期间发表文章 | 第75页 |
