| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 生成抑制素研究概述 | 第10-20页 |
| ·生成抑制素基因的发现 | 第10-11页 |
| ·肌生成抑制素基因的结构与染色体定位 | 第11-12页 |
| ·肌生成抑制素基因与蛋白同源性分析 | 第12页 |
| ·肌生成抑制素基因的时空表达 | 第12-13页 |
| ·肌生成抑制素的组织分布 | 第13-14页 |
| ·肌生成抑制素的生物学功能 | 第14-16页 |
| ·肌生成抑制素对肌肉组织发育与再生的调控 | 第14-15页 |
| ·肌生成抑制素对脂肪沉积的影响 | 第15-16页 |
| ·肌生成抑制素的作用机制 | 第16-19页 |
| ·肌生成抑制素基因通过基因突变形成双肌性状及其导致肌肉充分发育的原因 | 第16页 |
| ·肌生成抑制素生物活性形成过程 | 第16-17页 |
| ·肌生成抑制素对成肌细胞的调控 | 第17页 |
| ·肌生成抑制素的信号传导途径 | 第17-19页 |
| ·肌生成抑制素应用前景与发展趋势 | 第19-20页 |
| ·肌生成抑制素在畜牧业中的应用前景与发展趋势 | 第19-20页 |
| ·生成抑制素在医疗领域中的应用前景与发展趋势 | 第20页 |
| 2 免疫技术在动物生产上的应用 | 第20-22页 |
| ·动免疫技术在动物生产中的应用 | 第21-22页 |
| ·被动免疫技术在动物生产中的应用 | 第22页 |
| 3 关于通用T细胞辅助表位 | 第22-24页 |
| 4 外源基因在大肠杆菌中表达的研究进展 | 第24-26页 |
| ·启动子的选择 | 第24页 |
| ·表达载体的类型 | 第24-26页 |
| ·非融合表达载体 | 第24-25页 |
| ·融合表达载体 | 第25页 |
| ·分泌表达载体 | 第25页 |
| ·表面呈现表达载体 | 第25-26页 |
| ·二硫键的影响 | 第26页 |
| 5 小梅山猪研究概况 | 第26-28页 |
| 试验研究 | 第28-64页 |
| 目的与意义 | 第28-30页 |
| 试验Ⅰ.MSTN基因克隆、表达及规模纯化 | 第30-49页 |
| 1 材料与方法 | 第30-39页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·主要设备 | 第31-32页 |
| ·实验试剂及其配制 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·质粒提取与克隆所用试剂 | 第32-33页 |
| ·蛋白质电泳所用溶液的配制 | 第33-34页 |
| ·试验方法 | 第34-39页 |
| ·重组MSTN、PADRE-MSTN、TT-MSTN蛋白疫苗的设计 | 第34页 |
| ·表达载体pET-MSTN、pET-PADRE-MSTN、pET-TT-MSTN的构建 | 第34-36页 |
| ·基因组DNA提取 | 第36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·重组克隆载体的构建、筛选及鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组表达载体的构建、筛选及鉴定 | 第37-38页 |
| ·MSTN、TT-MSTN、PADRE-MSTN重组蛋白的诱导表达、纯化与鉴定 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-46页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·阳性克隆载体pMD 18-T-MSTN的筛选及鉴定 | 第40-41页 |
| ·阳性表达载体pET-MSTN、pET-TT-MSTN、pET-PD-MSTN的鉴定 | 第41页 |
| ·核苷酸序列测序及序列相似性比较 | 第41-43页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE检测 | 第43-45页 |
| ·融合蛋白的Westernblot鉴定 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 试验Ⅱ.用三种MSTN融合蛋白分别免疫小鼠对生长的影响 | 第49-64页 |
| 1 材料与方法 | 第49-53页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·主要设备 | 第49页 |
| ·实验试剂及其配制 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·动物免疫 | 第50-52页 |
| ·血清抗体滴度的ELISA检测 | 第52页 |
| ·小鼠骨骼肌形态分析 | 第52-53页 |
| ·据统计学处理 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-61页 |
| ·小鼠免疫血清ELISA抗体滴度测定 | 第53-55页 |
| ·三种候选蛋白疫苗免疫对小鼠生长的影响 | 第55-61页 |
| ·免疫对小鼠各个时期增重的影响 | 第55页 |
| ·疫对小鼠生长效率的影响 | 第55-56页 |
| ·免疫对小鼠肌肉组织和脂肪组织生长的影响 | 第56-60页 |
| ·疫小鼠肌肉组织形态变化 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-76页 |
