摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
第一部分 前言 | 第9-13页 |
第二部分 材料与方法 | 第13-28页 |
[材料] | 第13-16页 |
[方法] | 第16-28页 |
第三部分 结果与分析 | 第28-49页 |
1 pCD-Awte质粒的构建 | 第28-31页 |
·pCD-Awte质粒的构建流程图 | 第28页 |
·引物的设计与PCR扩增 | 第28-29页 |
·pCD-Awte质粒的构建 | 第29页 |
·重组质粒pCD-Awte的鉴定 | 第29-31页 |
2 pCD-Awte/DH5α与pThyawte/DY330T1工程菌的发酵培养 | 第31-32页 |
3 pCD-Awte/DH5α工程菌质粒稳定性的检测 | 第32-33页 |
4 pCD-Awte/DH5α工程菌发酵条件的探索 | 第33-37页 |
·基本培养基的组成及来源对发酵的影响 | 第33-35页 |
·温度的转换对工程菌发酵的影响 | 第35-36页 |
·补料条件变化对工程菌发酵的影响 | 第36-37页 |
5 pCD-Awte/DH5α工程菌在优化条件下发酵培养 | 第37页 |
6 碱裂解法提取质粒 | 第37-38页 |
7 质粒粗提液的纯化 | 第38-41页 |
·Sepharose 6FF分子筛层析 | 第38页 |
·Plasmidselect亲硫吸附层析 | 第38页 |
·Source 30Q离子交换层析 | 第38页 |
·G25脱盐层析 | 第38-41页 |
·纯化工艺得率核算 | 第41页 |
8 纯化质粒制品的质量分析 | 第41-48页 |
·宿主RNA含量分析 | 第41页 |
·菌体残留蛋白含量分析 | 第41-42页 |
·细菌内毒素含量分析 | 第42-43页 |
·菌体基因组DNA含量分析 | 第43-45页 |
·卡那霉素残留分析 | 第45页 |
·均一性分析 | 第45-46页 |
·鉴别实验 | 第46-47页 |
·pCD-Awte候选疟疾DNA疫苗质量分析结果 | 第47-48页 |
9 纯化质粒制品pCD-Awte抗原基因表达产物的鉴定 | 第48-49页 |
第四部分 讨论 | 第49-53页 |
1 质粒pCD-Awte的构建及pCD-Awte/DH5α工程菌的稳定性 | 第49页 |
2 pCD-Awte/DH5α工程菌发酵条件的探索 | 第49-50页 |
3 质粒pCD-Awte提取和纯化 | 第50-51页 |
4 纯化质粒制品的质量分析 | 第51-53页 |
第五部分 全文总结 | 第53-54页 |
1 本研究主要获得的结果 | 第53页 |
2 本论文的创新之处 | 第53页 |
3 需进一步研究的问题 | 第53-54页 |
论文部分参考文献 | 第54-59页 |
附录 | 第59-60页 |
综述 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
发表学术论文目录 | 第69页 |