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pCD-Awte候选疟疾DNA疫苗制备工艺的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-8页
缩略词表第8-9页
第一部分 前言第9-13页
第二部分 材料与方法第13-28页
 [材料]第13-16页
 [方法]第16-28页
第三部分 结果与分析第28-49页
 1 pCD-Awte质粒的构建第28-31页
   ·pCD-Awte质粒的构建流程图第28页
   ·引物的设计与PCR扩增第28-29页
   ·pCD-Awte质粒的构建第29页
   ·重组质粒pCD-Awte的鉴定第29-31页
 2 pCD-Awte/DH5α与pThyawte/DY330T1工程菌的发酵培养第31-32页
 3 pCD-Awte/DH5α工程菌质粒稳定性的检测第32-33页
 4 pCD-Awte/DH5α工程菌发酵条件的探索第33-37页
   ·基本培养基的组成及来源对发酵的影响第33-35页
   ·温度的转换对工程菌发酵的影响第35-36页
   ·补料条件变化对工程菌发酵的影响第36-37页
 5 pCD-Awte/DH5α工程菌在优化条件下发酵培养第37页
 6 碱裂解法提取质粒第37-38页
 7 质粒粗提液的纯化第38-41页
   ·Sepharose 6FF分子筛层析第38页
   ·Plasmidselect亲硫吸附层析第38页
   ·Source 30Q离子交换层析第38页
   ·G25脱盐层析第38-41页
   ·纯化工艺得率核算第41页
 8 纯化质粒制品的质量分析第41-48页
   ·宿主RNA含量分析第41页
   ·菌体残留蛋白含量分析第41-42页
   ·细菌内毒素含量分析第42-43页
   ·菌体基因组DNA含量分析第43-45页
   ·卡那霉素残留分析第45页
   ·均一性分析第45-46页
   ·鉴别实验第46-47页
   ·pCD-Awte候选疟疾DNA疫苗质量分析结果第47-48页
 9 纯化质粒制品pCD-Awte抗原基因表达产物的鉴定第48-49页
第四部分 讨论第49-53页
 1 质粒pCD-Awte的构建及pCD-Awte/DH5α工程菌的稳定性第49页
 2 pCD-Awte/DH5α工程菌发酵条件的探索第49-50页
 3 质粒pCD-Awte提取和纯化第50-51页
 4 纯化质粒制品的质量分析第51-53页
第五部分 全文总结第53-54页
 1 本研究主要获得的结果第53页
 2 本论文的创新之处第53页
 3 需进一步研究的问题第53-54页
论文部分参考文献第54-59页
附录第59-60页
综述第60-68页
致谢第68-69页
发表学术论文目录第69页

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