中文摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-19页 |
1 前言 | 第19-23页 |
2 材料与方法 | 第23-46页 |
·实验动物 | 第23页 |
·含尾蚴的阳性钉螺 | 第23页 |
·引物 | 第23-24页 |
·药物及试剂 | 第24-26页 |
·部分主要试剂的配制 | 第26-27页 |
·仪器与设备 | 第27-29页 |
·尾蚴诱导的日本血吸虫病肝纤维化小鼠模型的制备 | 第29页 |
·动物分组、给药方案与标本采集处理 | 第29-30页 |
·小鼠肝脏组织病理学检查 | 第30-31页 |
·组织芯片制作 | 第30页 |
·病理组织学观察及分级标准 | 第30-31页 |
·小鼠肝脏TGFβ1 免疫组化染色定量分析 | 第31页 |
·SEA 的制备、浓度测定、保存 | 第31-33页 |
·SEA 的制备 | 第31-32页 |
·SEA 蛋白浓度测定(Lowry 法) | 第32页 |
·SEA 蛋白的保存 | 第32-33页 |
·小鼠PMS 的分离、培养 | 第33页 |
·小鼠HSCS 的分离、培养 | 第33-34页 |
·PAE 、SB-431542 对小鼠PMS、HSCS 毒性的检测 | 第34页 |
·SEA 刺激的PMCM 制备 | 第34-41页 |
·刺激小鼠PMs 分泌TGFβ1 的最适SEA 蛋白浓度的选择 | 第34-41页 |
·stimulated-PMCM 的收集、保存 | 第41页 |
·PAE 对SEA 刺激的PMS 内的TGFΒ1 基因和蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
·SEA 对小鼠HSCS 分泌TGFΒ1 的影响 | 第42页 |
·细胞分组 | 第42页 |
·ELISA 测定经SEA 刺激的细胞上清中TGFβ1 含量 | 第42页 |
·刺激小鼠HSCS 增殖的OPMCM 选择 | 第42-43页 |
·细胞分组 | 第42-43页 |
·MTT 法测定HSCs 增殖 | 第43页 |
·OPMCM 中的TGFΒ1 对HSCS 增殖和COL I 、III 分泌的影响 | 第43页 |
·PAE 对OPMCM 刺激小鼠HSCS 增殖的影响 | 第43-44页 |
·细胞分组 | 第43页 |
·MTT 法测定OPMCM 刺激的HSCs 增殖 | 第43-44页 |
·PAE 对OPMCM 刺激小鼠HSCS 分泌COL I 和COL III 的影响 | 第44-45页 |
·细胞分组 | 第44页 |
·ELISA 检测HSCs 上清中Col I 和Col III 浓度 | 第44页 |
·细胞层蛋白的提取和浓度测定 | 第44-45页 |
·PAE 对OPMCM 刺激的SMADS 和前胶原基因或蛋白表达的影响.. | 第45页 |
·统计学处理 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-65页 |
·PAE 对小鼠肝组织肉芽肿、纤维化及TGFΒ1 表达的影响 | 第46-48页 |
·SEA 浓度 | 第48页 |
·小鼠PMS 和HSCS 原代培养的细胞形态 | 第48-50页 |
·PAE 对小鼠PMS、HSCS 以及SB-431542 对小鼠HSCS 毒性检测.. | 第50-51页 |
·镜下观察 | 第50页 |
·细胞活力测定 | 第50页 |
·细胞上清中LDH 活性检测 | 第50-51页 |
·刺激小鼠PMS 分泌TGFΒ1 的最适SEA 蛋白浓度的选择 | 第51-53页 |
·ELISA 测定经SEA 刺激的PMs 上清中TGFβ1 含量 | 第51-52页 |
·RT-PCR 和Western blotting 检测TGFβ1 基因和蛋白的表达 | 第52-53页 |
·SEA 对小鼠HSCS 分泌TGFΒ1 的影响 | 第53-56页 |
·PAE 对SEA 刺激的PMS 内的TGFΒ1 基因和蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
·OPMCM 稀释度的选择 | 第57-58页 |
·OPMCM 中的TGFΒ1 对HSCS 增殖和COL I、III 分泌的影响 | 第58页 |
·PAE 对OPMCM 刺激小鼠HSCS 增殖的影响 | 第58-60页 |
·PAE 对OPMCM 刺激小鼠HSCS 分泌COL I 和COL III 的影响 | 第60-61页 |
·PAE 对OPMCM 刺激的HSCS 内COL IΑ1、COL IIIΑ1 和SMADS 基因或蛋白表达的影响 | 第61-65页 |
·PAE 对OPMCM 刺激的HSCs 内Col Iα1、Col IIIα1 基因和蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
·PAE 对OPMCM 刺激的HSCs 内Smad2/3 蛋白表达和Smad2/3 蛋白磷酸化的影响 | 第62-64页 |
·PAE 对Smad3 的影响 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-71页 |
·TGFΒ1 与血吸虫病肝肉芽肿和肝纤维化有关 | 第65-66页 |
·SEA 可直接促进MFS 分泌TGFΒ1,而PAE 抑制MFS 分泌TGFΒ1 | 第66-67页 |
·TGFΒ1 能促进HSCS 增殖和胶原分泌,而PAE 能抑制HSCS 增殖和胶原分泌 | 第67-68页 |
·PAE 抑制SMAD3 MRNA 的表达和蛋白磷酸化 | 第68-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
6 今后实验打算 | 第72-73页 |
7 参考文献 | 第73-78页 |
附录一(个人简历) | 第78-80页 |
附录二 (致谢) | 第80-82页 |
附录三(综述) | 第82-99页 |