| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-20页 |
| 1 绪论 | 第20-36页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·铁皮石斛资源及其研究概况 | 第20-24页 |
| ·铁皮石斛资源 | 第20-21页 |
| ·铁皮石斛的研究概况 | 第21-23页 |
| ·环境对铁皮石斛生长代谢的影响 | 第23-24页 |
| ·应力对植物生长代谢的影响 | 第24-28页 |
| ·应力与植物生长 | 第24-26页 |
| ·应力与植物生理代谢 | 第26-28页 |
| ·应力作用下植物基因的表达调控 | 第28-31页 |
| ·与物理刺激诱导相关的基因及其表达 | 第28-29页 |
| ·TCH基因表达调控 | 第29-31页 |
| ·本文的研究工作 | 第31-36页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第31页 |
| ·本文主要研究工作 | 第31-32页 |
| ·本文的研究思路与构想 | 第32-36页 |
| 2 实验材料与应力对其组培苗的影响 | 第36-42页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料的培养 | 第36-37页 |
| ·取材 | 第36页 |
| ·培养基的配制 | 第36-37页 |
| ·铁皮石斛原球茎的培养 | 第37页 |
| ·铁皮石斛幼苗的培养 | 第37页 |
| ·应力加载模型与材料的处理 | 第37-39页 |
| ·实验加载装置 | 第37-38页 |
| ·材料的处理 | 第38页 |
| ·鲜重的测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-40页 |
| ·一定强度下不同频率的声波对铁皮石斛组培苗鲜重的影响 | 第39页 |
| ·一定频率下不同强度的声波对铁皮石斛组培苗鲜重的影响 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 3 应力对铁皮石斛抗氧化酶活性的影响 | 第42-56页 |
| ·引言 | 第42-43页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·实验材料及处理 | 第43页 |
| ·APX酶液的制备及活性测定 | 第43-44页 |
| ·SOD酶液制备及活性测定 | 第44页 |
| ·CAT酶液的制备及活性测定 | 第44-45页 |
| ·POD酶液的制备及活性测定 | 第45页 |
| ·统计方法 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·声波应力对铁皮石斛叶、茎、根APX活性的影响 | 第46-47页 |
| ·声波应力对铁皮石斛叶、茎、根SOD活性的影响 | 第47-48页 |
| ·声波应力对铁皮石斛叶、茎、根CAT活性的影响 | 第48-49页 |
| ·声波应力对铁皮石斛叶、茎、根POD活性的影响 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-55页 |
| ·声波刺激对植物各器官酶活性的影响 | 第51-52页 |
| ·声波应力诱导下植物细胞活性氧的产生 | 第52-53页 |
| ·AOS是植物响应声波刺激的一个重要的信号分子 | 第53-54页 |
| ·特定的声波刺激植物幼苗生长的可能机制 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 4 应力对铁皮石斛代谢产物的影响 | 第56-70页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56-60页 |
| ·实验材料及处理 | 第56页 |
| ·仪器与试剂 | 第56-57页 |
| ·石斛多糖的提取及含量测定 | 第57-58页 |
| ·总生物碱的提取及含量测定 | 第58页 |
| ·可溶性蛋白质含量的测定 | 第58-59页 |
| ·游离脯氨酸含量的测定 | 第59页 |
| ·丙二醛含量的测定 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·声波应力对铁皮石斛多糖含量的影响 | 第60-61页 |
| ·声波应力对铁皮石斛生物碱含量的影响 | 第61-63页 |
| ·声波应力对铁皮石斛可溶性蛋白质含量的影响 | 第63-64页 |
| ·声波应力对铁皮石斛游离脯氨酸含量的影响 | 第64页 |
| ·声波应力对铁皮石斛丙二醛含量的影响 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| ·测定方法的考察 | 第65-66页 |
| ·应力对铁皮石斛多糖和石斛碱代谢的影响 | 第66页 |
| ·应力对铁皮石斛可溶性蛋白质含量的影响 | 第66-67页 |
| ·应力对铁皮石斛丙二醛含量的影响 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-70页 |
| 5 应力对铁皮石斛POD同工酶基因表达的影响 | 第70-80页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·材料与方法 | 第71-75页 |
| ·实验材料及处理 | 第71页 |
| ·仪器与试剂 | 第71-72页 |
| ·POD同工酶的提取与PAGE电泳 | 第72页 |
| ·RNA的提取 | 第72页 |
| ·RT-PCR扩增与电泳 | 第72-73页 |
| ·目的条带的回收纯化 | 第73页 |
| ·Northern点杂交 | 第73-75页 |
| ·实验结果 | 第75-77页 |
| ·应力作用下铁皮石斛POD同工酶酶谱 | 第75-76页 |
| ·RT-PCR扩增铁皮石斛POD基因片段 | 第76页 |
| ·Northern点杂交研究该基因在应力作用下的表达 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·声波应力对铁皮石斛POD同工酶的影响 | 第77-78页 |
| ·声波应力对铁皮石斛POD同工酶基因表达的影响 | 第78-79页 |
| ·POD同工酶基因表达与环境应力的关系 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 6 应力刺激下铁皮石斛差异表达基因的筛选、克隆与生物信息学分析 | 第80-114页 |
| ·引言 | 第80-81页 |
| ·材料与方法 | 第81-87页 |
| ·实验材料及处理 | 第81页 |
| ·主要试剂与引物 | 第81-82页 |
| ·RNA的提取与检测 | 第82页 |
| ·DDRT-PCR扩增与电泳检测 | 第82-84页 |
| ·差异条带的回收、重扩增及检测 | 第84-85页 |
| ·差异条带的Reverse Northern Blot杂交鉴定 | 第85页 |
| ·差异片段的回收、重组和克隆 | 第85-86页 |
| ·差异片段的序列分析 | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-108页 |
| ·刺激组和对照组总RNA的比较 | 第87-88页 |
| ·差异片段的筛选 | 第88-90页 |
| ·差异条带的回收、重扩增、电泳检测 | 第90页 |
| ·Reverse Northern Blot杂交结果 | 第90-91页 |
| ·差异片段的克隆及其鉴定 | 第91-92页 |
| ·差异表达的基因片段序列分析 | 第92-99页 |
| ·相关基因的生物信息学初步分析 | 第99-108页 |
| ·讨论 | 第108-112页 |
| ·差异显示技术在植物对环境应力表达中的作用 | 第108-109页 |
| ·应力对铁皮石斛特异表达基因的影响 | 第109-110页 |
| ·环境应力与植物基因的表达调控 | 第110-112页 |
| ·小结 | 第112-114页 |
| 7 结论与展望 | 第114-122页 |
| ·本文的主要结论 | 第114-116页 |
| ·应力刺激对铁皮石斛生长的影响 | 第114页 |
| ·应力刺激对铁皮石斛代谢的影响 | 第114-115页 |
| ·应力刺激下铁皮石斛基因表达、筛选与分析 | 第115-116页 |
| ·应力与植物生长代谢和基因表达问题的探讨 | 第116-119页 |
| ·植物感应环境应力刺激的生理阶段 | 第116页 |
| ·应力对植物生长和代谢的影响 | 第116-117页 |
| ·应力作用植物细胞的信号传递和基因表达过程 | 第117-119页 |
| ·本文的创新之处 | 第119-120页 |
| ·后续工作建议与展望 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-140页 |
| 附录 | 第140-141页 |
| 攻读博士学位期间的科研成果 | 第140-141页 |
| A.主持或主研的科研课题 | 第140页 |
| B. 所发表的与本课题相关论文 | 第140-141页 |
| C. 攻读博士学位期间参加的国内外学术会议 | 第141页 |
