| 中文摘要 | 第1-15页 |
| Abstract | 第15-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-53页 |
| ·油菜素类固醇物质的研究进展 | 第21-44页 |
| ·油菜素类固醇物质的发现和命名 | 第21-22页 |
| ·BRs的生理效应 | 第22-27页 |
| ·植株水平的影响 | 第22-25页 |
| ·细胞水平的影响 | 第25-27页 |
| ·BRs的生物合成与分解代谢 | 第27-36页 |
| ·BRs的生物合成途径 | 第27-28页 |
| ·油菜素内酯特异合成途径 | 第28-29页 |
| ·植物固醇特异合成途径 | 第29-30页 |
| ·BRs生物合成突变体和相关基因 | 第30-36页 |
| ·BRs代谢及相关基因 | 第36页 |
| ·植物体内BRs的动态平衡 | 第36页 |
| ·油菜素甾体类化合物的分布和运输 | 第36-37页 |
| ·BRs的作用机理 | 第37-43页 |
| ·BRs的信号传导 | 第37页 |
| ·信号传导相关突变体和基因 | 第37-39页 |
| ·BRs信号传导模式 | 第39-40页 |
| ·油菜素类固醇物质与其它植物激素的关系 | 第40-43页 |
| ·对植物激素的平衡 | 第43页 |
| ·BRs的研究历程和发展趋势 | 第43-44页 |
| ·棉花纤维生长发育的研究进展 | 第44-53页 |
| ·棉花纤维的概述 | 第44-45页 |
| ·纤维原始细胞的分化和纤维细胞的起始 | 第45-46页 |
| ·纤维细胞的伸长 | 第46-47页 |
| ·纤维次生壁的合成 | 第47-48页 |
| ·纤维脱水成熟 | 第48页 |
| ·植物激素对纤维生长发育的影响 | 第48-52页 |
| ·生长素 | 第48-49页 |
| ·赤霉素 | 第49页 |
| ·细胞分裂素 | 第49-50页 |
| ·乙烯 | 第50页 |
| ·脱落酸 | 第50页 |
| ·油菜素类固醇物质 | 第50-52页 |
| ·棉花纤维发育相关基因的克隆和分析 | 第52-53页 |
| 第二章 引言 | 第53-57页 |
| ·立论依据 | 第53-56页 |
| ·技术路线 | 第56-57页 |
| 第三章 棉花类固醇5α-还原酶基因(GhDET2)的克隆和序列分析 | 第57-77页 |
| ·材料和方法 | 第57-65页 |
| ·材料 | 第57-60页 |
| ·方法 | 第60-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-74页 |
| ·获得与拟南芥DET2同源的棉花EST序列 | 第65-66页 |
| ·目标EST序列的整合及序列分析 | 第66页 |
| ·棉花类固醇5α-还原酶基因的克隆和测序 | 第66页 |
| ·GhDET2的序列分析 | 第66-70页 |
| ·同源性比较 | 第66-67页 |
| ·序列多重比较 | 第67-68页 |
| ·GhDET2的系统进化分析 | 第68-70页 |
| ·GhDET2基因在棉花基因组中的拷贝数分析 | 第70-71页 |
| ·GhDET2基因的基因组序列 | 第71页 |
| ·GhDET2基因的来源 | 第71页 |
| ·GhDET2基因5’上游调控序列的克隆和比较 | 第71-74页 |
| ·小结 | 第74页 |
| ·克隆到棉花类固醇5α-还原酶基因 | 第74页 |
| ·分析了GhDET2基因的进化来源 | 第74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| ·棉花EST数据库和电子克隆方法在棉花分子生物学研究中的作用 | 第74-75页 |
| ·在序列分析水平确定克隆基因是棉花类固醇5α-还原酶基因 | 第75页 |
| ·GhDET2基因单拷贝存在的可能原因 | 第75-77页 |
| 第四章 GhDET2基因的表达分析和生物活性鉴定 | 第77-89页 |
| ·材料和方法 | 第77-81页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·方法 | 第78-81页 |
| ·RNA提取 | 第78-79页 |
| ·Northern杂交分析 | 第79页 |
| ·RT-PCR分析 | 第79-80页 |
| ·哺乳动物细胞表达载体的构建、转化、筛选和转化细胞的培养 | 第80页 |
| ·动物细胞的RNA提取 | 第80页 |
| ·类固醇5α-还原酶活性鉴定 | 第80-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-87页 |
| ·GhDET2基因的表达特征 | 第81-85页 |
| ·GhDET2在棉花不同器官和组织中的表达特征 | 第81-82页 |
| ·GhDET2基因在胚珠和纤维发育过程中的表达 | 第82-83页 |
| ·GhDET2基因在纤维发育过程中的表达特性 | 第83-84页 |
| ·GhDET2在徐州142野生型和徐州142无绒无絮突变体中的表达差异 | 第84-85页 |
| ·GhDET2的酶活性鉴定 | 第85-87页 |
| ·GhDET2基因在转化CHO细胞中的表达分析 | 第85-86页 |
| ·GhDET2的酶活性检测 | 第86页 |
| ·Finasteride对GhDET2活性的影响 | 第86页 |
| ·棉花纤维中类固醇5α-还原酶的活性鉴定 | 第86-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| ·GhDET2基因的表达特征 | 第87页 |
| ·GhDET2活性鉴定 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| ·GhDET2和其它植物DET2基因的表达异同和功能 | 第88页 |
| ·GhDET2的酶活性及其在物种间的保守性 | 第88-89页 |
| 第五章 在烟草中超量表达GhDET2基因 | 第89-117页 |
| ·材料和方法 | 第89-95页 |
| ·材料 | 第89-91页 |
| ·方法 | 第91-95页 |
| ·烟草遗传转化 | 第91页 |
| ·转化植株的鉴定 | 第91页 |
| ·目标基因的表达分析 | 第91-92页 |
| ·转基因烟草的性状变异分析 | 第92-94页 |
| ·根癌农杆菌菌株LBA4404感受态的制备及DNA转化 | 第94-95页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第95页 |
| ·结果与分析 | 第95-113页 |
| ·转基因烟草的表达分析 | 第95-96页 |
| ·T_0代转基因本明烟的生长变异 | 第96-98页 |
| ·超量表达GhDET2基因促进本明烟草营养器官的生长 | 第96-97页 |
| ·超量表达GhDET2基因促进本明烟草生殖器官发育 | 第97-98页 |
| ·超量表达GhDET2基因促进烟草种子萌发 | 第98页 |
| ·超量表达GhDET2基因促进烟草下胚轴伸长 | 第98-99页 |
| ·油菜素内酯对烟草下胚轴生长的影响 | 第99-100页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草根系生长发育的影响 | 第100-105页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草主根生长的影响 | 第100-101页 |
| ·油菜素内酯对野生型烟草主根生长的影响 | 第101-102页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草侧根生长的影响 | 第102页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草根毛生长的影响 | 第102-103页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草不定根生长的影响 | 第103-104页 |
| ·超量表达GhDET2基因对烟草根系向重力性的影响 | 第104-105页 |
| ·Finasteride对烟草生长的影响 | 第105-107页 |
| ·超量表达GhDET2的转基因烟草对其他植物激素的反应 | 第107-113页 |
| ·转基因烟草对生长素反应的变化 | 第107-109页 |
| ·转基因烟草对细胞分裂素反应的变化 | 第109-111页 |
| ·转基因烟草对脱落酸反应的变化 | 第111页 |
| ·转基因烟草对赤霉素反应的变化 | 第111-113页 |
| ·结论 | 第113-114页 |
| ·获得了超量表达GhDET2基因的转基因烟草 | 第113页 |
| ·分析了转基因烟草的性状变异 | 第113-114页 |
| ·利用转基因烟草分析了BRs与其它植物激素的相互关系 | 第114页 |
| ·讨论 | 第114-117页 |
| ·GhDET2的超量表达对BRs含量的影响 | 第114-115页 |
| ·BRs与其它植物激素的关系 | 第115-117页 |
| 第六章 GhDET2基因的棉花转基因功能分析 | 第117-135页 |
| ·材料与方法 | 第117-120页 |
| ·材料 | 第117-118页 |
| ·方法 | 第118-120页 |
| ·棉花遗传转化 | 第118-119页 |
| ·转基因棉花的分子生物学鉴定 | 第119页 |
| ·转基因棉花中目标基因的表达分析 | 第119页 |
| ·转基因棉花性状变异分析 | 第119页 |
| ·扫描电镜样品制备和观察 | 第119-120页 |
| ·棉花胚珠离体培养 | 第120页 |
| ·油菜素内酯和Finasteride添加实验 | 第120页 |
| ·结果与分析 | 第120-131页 |
| ·超量表达GhDET2的转基因棉花基因的表达分析 | 第120-121页 |
| ·超量表达GhDET2棉花性状变异 | 第121-123页 |
| ·超量表达导致棉花营养生长变异 | 第121-122页 |
| ·超量表达导致棉花生殖生长变异 | 第122-123页 |
| ·超量表达棉纤维的伸长生长 | 第123页 |
| ·外施油菜素内酯对纤维生长的影响 | 第123-125页 |
| ·反义抑制GhDET2转基因棉花的表达分析 | 第125页 |
| ·反义抑制GhDET2转基因棉花的表型变异 | 第125-129页 |
| ·反义抑制GhDET2转基因棉花营养生长变异 | 第125-126页 |
| ·反义抑制GhDET2转基因棉花生殖生长变异 | 第126-127页 |
| ·反义抑制GhDET2转基因棉花的胚珠和纤维发育 | 第127页 |
| ·反义抑制GhDET2基因抑制棉花纤维细胞的伸长 | 第127-129页 |
| ·外施油菜素内酯对纤维伸长生长的恢复 | 第129页 |
| ·Finasteride对棉花纤维伸长生长的影响 | 第129-130页 |
| ·外施EBL减轻Finasteride对纤维伸长的抑制 | 第130-131页 |
| ·小结 | 第131页 |
| ·获得超量表达和反义抑制GhDET2基因的转基因棉花 | 第131页 |
| ·超量表达GhDET2的转基因棉花生长受到影响 | 第131页 |
| ·反义抑制GhDET2基因的转基因棉花生长受到严重影响 | 第131页 |
| ·讨论 | 第131-135页 |
| ·GhDET2的功能 | 第131-134页 |
| ·利用棉花遗传转化进行纤维发育相关基因的功能研究 | 第134-135页 |
| 第七章 组织特异表达GhDET2基因和高产优质新材料的创造 | 第135-151页 |
| ·材料和方法 | 第135-138页 |
| ·材料 | 第135-136页 |
| ·方法 | 第136-138页 |
| ·提取矮牵牛基因组DNA | 第136页 |
| ·启动子序列查找 | 第136页 |
| ·FBP7基因启动子序列的克隆 | 第136页 |
| ·克隆序列分析鉴定 | 第136页 |
| ·PFBP7表达特性分析载体构建 | 第136-137页 |
| ·PFBP7∷senseGhDET2和PFBP7∷antisenseGhDET2植物表达载体构建 | 第137页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第137页 |
| ·转基因植物的分子生物学鉴定 | 第137页 |
| ·转化植株的GUS表达特性分析 | 第137-138页 |
| ·转基因棉花中GhDET2的表达分析 | 第138页 |
| ·纤维细胞数量的测量 | 第138页 |
| ·纤维细胞长度的测量 | 第138页 |
| ·转基因胚珠中其它植物激素相关基因的表达分析 | 第138页 |
| ·结果与分析 | 第138-146页 |
| ·FBP7基因启动子序列(PFBP7)的克隆和鉴定 | 第138-139页 |
| ·转基因烟草和棉花的分子生物学鉴定 | 第139-140页 |
| ·PFBP7在转基因烟草中的表达特性 | 第140页 |
| ·PFBP7在转基因棉花中的表达特性 | 第140-141页 |
| ·PFBP7∷antisenseGhDET2和PFBP7∷senseGhDET2转基因棉花验证和纯合体的筛选 | 第141-142页 |
| ·PFBP7∷senseGhDET2转基因棉花GhDET2基因表达 | 第142-143页 |
| ·转基因棉花的性状变异 | 第143-145页 |
| ·PFBP7∷senseGhDET2转基因纤维长度增加 | 第143页 |
| ·PFBP7∷senseGhDET2转基因纤维细胞数量增加 | 第143-144页 |
| ·PFBP7∷senseGhDET2转基因胚珠和纤维中其它基因的表达变化 | 第144-145页 |
| ·PFBP7∷antisenseGhDET2转基因棉花GhDET2基因表达 | 第145页 |
| ·PFBP7∷antisenseGhDET2转基因棉花 | 第145-146页 |
| ·转基因棉花纤维长度缩短 | 第145-146页 |
| ·转基因棉花纤维细胞数量减少 | 第146页 |
| ·小结 | 第146-147页 |
| ·克隆并分析了PFBP7序列在转基因烟草和棉中的表达特性 | 第146-147页 |
| ·明确了GhDET2基因在棉纤维生长发育中的功能 | 第147页 |
| ·初步揭示了GhDET2促进纤维生长的调控机制 | 第147页 |
| ·讨论 | 第147-151页 |
| ·组织特异性启动子在棉纤维基因工程中的作用 | 第147-148页 |
| ·GhDET2基因在棉纤维发育中的作用机制 | 第148-151页 |
| 第八章 文献综述 | 第151-161页 |
| ·细胞骨架在纤维发育中的作用 | 第151-155页 |
| ·细胞骨架概述 | 第151页 |
| ·微管在纤维发育中的作用 | 第151-154页 |
| ·微管排列方向与纤维细胞的极性伸长 | 第152页 |
| ·微管排列方向与纤维细胞的次生壁发育 | 第152-154页 |
| ·微丝在纤维发育中的作用 | 第154-155页 |
| ·纤维素合成与微纤丝沉积 | 第155-157页 |
| ·微管运动 | 第157-158页 |
| ·微管运动的重要性 | 第157页 |
| ·微管运动模式 | 第157-158页 |
| ·微管切割蛋白 | 第158-161页 |
| ·微管切割蛋白概述 | 第158-159页 |
| ·植物微管切割蛋白基因突变体 | 第159页 |
| ·拟南芥fra2/bot1/atkss/erh3/lue1突变体 | 第159页 |
| ·水稻dgl1突变体 | 第159页 |
| ·微管切割蛋白的作用模式 | 第159-161页 |
| 第九章 棉花微管切割蛋白基因(GhKTN1)的克隆和功能分析 | 第161-183页 |
| ·材料和方法 | 第162-166页 |
| ·材料 | 第162-164页 |
| ·方法 | 第164-166页 |
| ·显微观察 | 第164-165页 |
| ·免疫荧光显示 | 第165页 |
| ·纤维素微纤丝的染色 | 第165页 |
| ·搜索棉花纤维的目标EST序列 | 第165页 |
| ·候选EST序列的整合和序列分析 | 第165页 |
| ·GhKTN1基因的3’-RACE | 第165页 |
| ·基因组步行 | 第165页 |
| ·GhKTN1基因的克隆和序列分析 | 第165-166页 |
| ·GhKTN1基因的表达分析 | 第166页 |
| ·超量表达和反义抑制GhKTN1基因的植物表达载体构建 | 第166页 |
| ·纤维外形的扫描电镜观察 | 第166页 |
| ·结果与分析 | 第166-179页 |
| ·GhKTN1基因的克隆和序列分析 | 第166-170页 |
| ·GhKTN1的表达分析 | 第170-171页 |
| ·GhKTN1基因在棉花植株基本组织中的表达 | 第170页 |
| ·GhKTN1基因在棉花纤维发育过程中的表达 | 第170-171页 |
| ·GhKTN1转基因棉花的组织化学验证 | 第171页 |
| ·转基因棉花植株中GhKTN1基因的表达分析 | 第171-173页 |
| ·超量表达GhKTN1转基因植株中的表达分析 | 第171-172页 |
| ·反义抑制GhKTN1转基因植株中的表达分析 | 第172-173页 |
| ·超量表达或反义抑制GhKTN1基因导致纤维性状变异 | 第173-177页 |
| ·提高GhKTN1的表达水平使纤维长度缩短 | 第173-174页 |
| ·纤维次生壁厚度与GhKTN1的表达水平有良好的对应关系 | 第174-175页 |
| ·超量表达GhKTN1使纤维外形发生明显变化 | 第175-176页 |
| ·GhKTN1基因的表达水平与纤维强度关系密切 | 第176页 |
| ·纤维马克隆值 | 第176-177页 |
| ·转基因纤维中微管排列方式的变化 | 第177-178页 |
| ·转基因纤维中纤维素微纤丝排列方式的变化 | 第178-179页 |
| ·超量表达GhKTN1提前了纤维次生壁合成的起始 | 第179页 |
| ·小结 | 第179-180页 |
| ·克隆了棉花微管切割蛋白基因(GhKTN1) | 第179页 |
| ·分析了GhKTN1基因在棉花植株和纤维发育中的表达 | 第179-180页 |
| ·获得了超量表达和反义抑制GhKTN1基因的转基因棉花 | 第180页 |
| ·超量表达GhKTN1提早了次生壁合成起始、增加了次生壁厚度和提高了纤维强度 | 第180页 |
| ·揭示了微管和纤维素微纤丝间新的相互关系 | 第180页 |
| ·讨论 | 第180-183页 |
| ·在纤维发育中棉花微管切割蛋白(GhKTN1)的功能 | 第180-182页 |
| ·GhKTN1对纤维细胞伸长生长的影响 | 第182页 |
| ·微管切割蛋白、微管和微纤丝的关系 | 第182-183页 |
| 第十章 结论 | 第183-186页 |
| ·主要结论 | 第183-185页 |
| ·主要创新 | 第185-186页 |
| 参考文献 | 第186-201页 |
| 致谢 | 第201-202页 |
| 附录 | 第202-204页 |
