| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-18页 |
| 前言 | 第18-23页 |
| 第一章 弓形虫体外速殖子与缓殖子相互转化模型的建立 | 第23-46页 |
| 1 材料 | 第23-26页 |
| ·虫株和细胞株 | 第23页 |
| ·菌株 | 第23-24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·溶液和培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-31页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的动物接种、收集及纯化 | 第26页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的动物接种 | 第26页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的收集与纯化 | 第26页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的体外培养 | 第26-27页 |
| ·NIH-3T3成纤维细胞的培养 | 第26-27页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的体外培养 | 第27页 |
| ·碱性条件下弓形虫速殖子向缓殖子的诱导转化 | 第27-28页 |
| ·碱性条件下诱导转化后缓殖子的鉴定 | 第28-30页 |
| ·碱性条件下弓形虫速殖子向缓殖子诱导转化进程的监测 | 第30页 |
| ·缓殖子向速殖子的诱导转化 | 第30-31页 |
| ·热休克处理诱导弓形虫速殖子向缓殖子的转化 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-38页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的收集和纯化 | 第31页 |
| ·弓形虫RH株速殖子的体外培养 | 第31-32页 |
| ·碱性条件下速殖子向缓殖子的诱导转化及鉴定 | 第32-35页 |
| ·碱性条件下弓形虫速殖子向缓殖子诱导转化进程的监测 | 第35页 |
| ·缓殖子向速殖子的诱导转化 | 第35-36页 |
| ·热休克处理诱导弓形虫速殖子向缓殖子的转化 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-46页 |
| 第二章 弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统的构建 | 第46-96页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·培养基及主要溶液 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-64页 |
| ·弓形虫RH株速殖子基因组DNA的提取 | 第48页 |
| ·弓形虫SAG1基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体的构建 | 第48-56页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第48-50页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第50-51页 |
| ·基因的克隆 | 第51-56页 |
| ·弓形虫可诱导的反向重复序列RNAi载体的构建 | 第56-59页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第56-58页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第58页 |
| ·基因的克隆 | 第58-59页 |
| ·弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统的构建 | 第59-61页 |
| ·弓形虫SAG1基因RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1的构建 | 第61-63页 |
| ·弓形虫BAG1基因RNAi载体pHANA-hairpin/BAG1的构建 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-91页 |
| ·弓形虫RH株速殖子基因组DNA的提取 | 第64页 |
| ·弓形虫SAG1基因启动子驱动的绿色荧光蛋白基因载体的构建 | 第64-75页 |
| ·弓形虫可诱导的反向重复序列RNAi载体的构建 | 第75-85页 |
| ·弓形虫可遗传及可诱导的RNAi载体系统的构建 | 第85-88页 |
| ·弓形虫SAG1基因RNAi载体pHANA-hairpin/SAG1的构建 | 第88-90页 |
| ·弓形虫BAG1基因RNAi载体pHANA-hairpin/BAG1的构建 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-96页 |
| 第三章 转基因弓形虫品系的建立及RNAi初步研究 | 第96-109页 |
| 1 材料 | 第96-97页 |
| ·主要试剂 | 第96页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| ·主要溶液的配制 | 第96-97页 |
| 2 方法 | 第97-99页 |
| ·无内毒素质粒的提取 | 第97-98页 |
| ·电穿孔转染弓形虫速殖子 | 第98页 |
| ·转基因弓形虫的鉴定 | 第98-99页 |
| ·转基因弓形虫的筛选 | 第99页 |
| ·转基因弓形虫的RNAi初步研究 | 第99页 |
| 3 结果 | 第99-104页 |
| ·转基因弓形虫的鉴定 | 第99-101页 |
| ·转基因弓形虫RNAi的初步研究 | 第101-104页 |
| 4 讨论 | 第104-109页 |
| 总结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 综述 | 第120-127页 |
| 缩略词表 | 第127-129页 |
| 攻读学位期间成果 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 附证明 | 第132页 |
