| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 苎麻胶质复合体 | 第13-18页 |
| ·果胶多糖的化学组成 | 第14-15页 |
| ·半纤维素化学组成与分布 | 第15-18页 |
| 2 UDPGDH在生物体中的作用 | 第18-21页 |
| ·生物体UDPGDH基因克隆分析 | 第19-20页 |
| ·UDPGDH的作用机制 | 第20-21页 |
| ·UDPGDH活性的调节 | 第21页 |
| 3 展望 | 第21-22页 |
| 4 立题依据与技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 苎麻UDPGDH基因的克隆 | 第24-40页 |
| 1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-34页 |
| 3 实验结果与分析 | 第34-38页 |
| ·苎麻总RNA提取 | 第34-35页 |
| ·UDPGDH基因中间片段的克隆 | 第35-36页 |
| ·UDPGDH基因3’端序列的克隆 | 第36页 |
| ·UDPGDH基因5’端序列的克隆 | 第36-37页 |
| ·UDPGDH CDNA全长扩增及序列拼接 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 苎麻UDPGDH基因序列分析 | 第40-51页 |
| 1 分析方法 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-49页 |
| ·核酸序列分析 | 第41-45页 |
| ·序列相似性比对 | 第41-45页 |
| ·序列开放阅读框(ORF)分析 | 第45页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第45-49页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第45-46页 |
| ·UDPGDH保守区CONSERVED DOMAIN(CD)的分析 | 第46页 |
| ·蛋白质序列跨膜结构预测 | 第46-47页 |
| ·功能性模体的搜索(PROSITE MOTIF SEARCH) | 第47-48页 |
| ·高级结构预测 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 UDPGDH基因组织表达情况的研究(SEMI-QUANTITATIVE RT-PCR) | 第51-58页 |
| 1 材料与试剂 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-56页 |
| ·不同组织RNA提取结果 | 第53-54页 |
| ·PCR扩增体系的优化 | 第54页 |
| ·半定量RT-PCR指数扩增循环数次数的确定 | 第54-55页 |
| ·苎麻UDPGDH基因在不同组织表达定量的结果 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 苎麻UDPGDH基因原核表达与 | 第58-72页 |
| 分析 | 第58页 |
| 1 材料与方法 | 第58页 |
| 2 实验方法 | 第58-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-69页 |
| ·表达载体PMAL-P2X-UDPGDH的构建流程 | 第64-65页 |
| ·UDPGDH目的基因与PMAL-P2X载体双酶切 | 第65页 |
| ·表达载体PMAL-P2X-UDPGDH的菌落PCR及双酶切检测 | 第65-66页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第66页 |
| ·表达载体PET-32A-UDPGDH的构建流程 | 第66-67页 |
| ·UDPGDH目的基因与PET-32A载体双酶切 | 第67页 |
| ·表达载体PET32-A-UDPGDH的菌落PCR及双酶切检测 | 第67-68页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第68页 |
| ·UDPGDH融合蛋白酶活性测定 | 第68-69页 |
| 4. 讨论 | 第69-72页 |
| 第六章 UDPGDH基因植物干扰表达载体的构建及对烟草的转化 | 第72-87页 |
| 1 材料与试剂 | 第72-73页 |
| 2 实验方法 | 第73-79页 |
| 3 结果与分析 | 第79-85页 |
| ·干扰植物表达载体PFGC5941-UDPGDHS的构建流程 | 第79-80页 |
| ·干扰表达载体PFGC5941-UDPGDHS的菌落PCR和酶切检测 | 第80-81页 |
| ·干扰表达载体PFGC5941-UDPGDHS转化农杆菌LBA4404的检测 | 第81-82页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第82-84页 |
| ·共培养 | 第82页 |
| ·诱导丛生芽 | 第82-83页 |
| ·诱导生根 | 第83页 |
| ·移栽 | 第83页 |
| ·烟草PPT抗性梯度试验 | 第83-84页 |
| ·干扰转基因烟草的PCR检测 | 第84页 |
| ·转基因烟草茎部组织切片观察 | 第84-85页 |
| ·转基因烟草UDPGDH酶活性检测 | 第85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 第七章 UDPGDH基因植物反义表达载体的构建及对烟草的转化 | 第87-95页 |
| 1 材料与试剂 | 第87-88页 |
| 2 实验方法 | 第88-89页 |
| 3 结果与分析 | 第89-93页 |
| ·植物表达载体PWM101-UDPGDH1的构建流程 | 第89-90页 |
| ·反义表达载体PWM101-UDPGDH1的菌落PCR和酶切检测 | 第90-91页 |
| ·反义表达载体PWM101-UDPGDH1转化农杆菌LBA4404的检测 | 第91页 |
| ·反义转基因烟草的PCR检测 | 第91-92页 |
| ·转基因烟草茎部组织切片观察 | 第92-93页 |
| ·转基因烟草UDPGDH酶活性测定 | 第93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 第八章 UDPGDH基因植物正义表达载体的构建及对烟草的转化 | 第95-102页 |
| 1 材料与试剂 | 第95-96页 |
| 2 实验方法 | 第96-97页 |
| 3 结果与分析 | 第97-101页 |
| ·正义植物表达载体PWM101-UDPGDH2的构建流程 | 第97-98页 |
| ·正义表达载体PWM101-UDPGDH2的菌落PCR和酶切检测 | 第98页 |
| ·正义表达载体PWM101-UDPGDH2转化农杆菌LBA4404的检测 | 第98-99页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第99-100页 |
| ·转基因烟草组织切片观察 | 第100页 |
| ·转基因烟草UDPGDH酶活性测定 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-102页 |
| 第九章 苎麻叶片高频植株再生体系的建立及其遗传转化 | 第102-111页 |
| 1 材料与方法 | 第102-104页 |
| 2 结果分析 | 第104-109页 |
| ·不同激素对不同苎麻品种叶片愈伤诱导的影响 | 第104-105页 |
| ·不同激素对不同品种叶片不定芽诱导的影响 | 第105-107页 |
| ·不同激素浓度对不同品种再生植株生根及移栽的影响 | 第107-108页 |
| ·苎麻PPT抗性梯度试验 | 第108页 |
| ·叶盘法转化苎麻 | 第108-109页 |
| ·分子检测 | 第109页 |
| 3 讨论 | 第109-111页 |
| 第十章 结论及研究展望 | 第111-113页 |
| 1 结论 | 第111-112页 |
| 2 展望 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-122页 |
| 附录1:缩略词表 | 第122-123页 |
| 附录2:主要试剂配置 | 第123-125页 |
| 附录3:载体图谱 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 作者简介 | 第128页 |
