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淡紫拟青霉E2-4生防效果分析及其根癌农杆菌介导的遗传转化

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-15页
前言第15-49页
   ·生物防治的概况第15-24页
     ·生物防治的意义第15页
     ·生物防治的概念第15-17页
     ·生防微生物的防治机制与优点第17页
     ·生防微生物的分类第17-18页
     ·生防真菌的简介第18-20页
     ·生防真菌制剂的生产和应用第20-24页
   ·生防真菌的改良第24-31页
     ·诱变育种第24页
     ·细胞工程技术和准性杂交技术第24页
     ·基因工程技术第24-25页
     ·根癌农杆菌介导的遗传转化第25-30页
     ·遗传转化在生防真菌中的发展应用第30-31页
     ·转基因工程菌安全性分析第31页
   ·淡紫拟青霉研究进展第31-44页
     ·淡紫拟青霉对线虫的作用机制第34-35页
     ·蛋白酶与几丁质酶第35-37页
     ·毒素和代谢产物第37页
     ·淡紫拟青霉的其它功效第37-39页
     ·淡紫拟青霉在生物防治中的作用第39-41页
     ·淡紫拟青霉菌剂的研究第41-42页
     ·淡紫拟青霉在分子生物学方面的研究进展第42-44页
   ·问题与展望第44-46页
   ·本研究的背景、目的和意义第46-48页
     ·研究背景第46-47页
     ·研究目的和意义第47-48页
   ·本研究的技术路线第48-49页
2 淡紫拟青霉E2-4 生防效果的测定第49-63页
   ·淡紫拟青霉E2-4 孢子悬浮液对根结线虫卵囊孵化率的影响第49-53页
     ·材料与方法第49-50页
     ·结果与分析第50-53页
   ·淡紫拟青霉E2-4 固体菌剂对盆栽番茄根结线虫的防治第53-56页
     ·材料与方法第53-54页
     ·结果与分析第54-56页
   ·淡紫拟青霉E2-4 孢子悬浮液对蚜虫的毒力测定第56-59页
     ·材料与方法第56页
     ·结果与分析第56-59页
   ·讨论第59-63页
     ·淡紫拟青霉对线虫卵囊孵化的抑制作用第59-60页
     ·淡紫拟青霉对番茄根结线虫病的盆栽防治第60页
     ·淡紫拟青霉对蚜虫的作用第60-61页
     ·淡紫拟青霉菌剂的开发和应用第61-63页
3 含几丁质酶基因的淡紫拟青霉表达载体的构建第63-78页
   ·材料与方法第63-64页
     ·材料第63-64页
   ·方法第64-72页
     ·表达载体pTBAR 的的构建第65-69页
     ·表达载体pTBTCHI 的构建第69-72页
   ·结果与分析第72-76页
     ·在pCAMBIA1302 的基础上构建pTBAR 载体第72-73页
     ·pTBTCHI 载体的构建第73-76页
   ·讨论第76-78页
     ·标记基因的选择第76页
     ·启动子的选择第76-77页
     ·真菌表达载体构建的策略第77-78页
4 农杆菌介导的淡紫拟青霉的遗传转化第78-99页
   ·材料与方法第78-85页
     ·材料第78-79页
     ·方法第79-85页
   ·结果与分析第85-96页
     ·淡紫拟青霉E2-4 高产孢量培养基的确定第85-86页
     ·淡紫拟青霉遗传转化筛选标记的确定第86-88页
     ·根癌农杆菌介导淡紫拟青霉遗传转化体系的建立第88-90页
     ·转化子菌落形态的观察第90页
     ·抗性菌落的PCR 验证第90-91页
     ·转化子中绿色荧光蛋白GFP 在显微镜下的观察第91-94页
     ·转化子Southern 杂交分析第94页
     ·转化子的几丁质酶活分析第94-96页
   ·讨论第96-99页
     ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化体系的建立与优化第96-97页
     ·淡紫拟青霉遗传转化的意义第97-99页
5 阳性转化子对根结线虫毒力的室内测定第99-107页
   ·阳性转化子孢子悬浮液对卵囊孵化的影响第99-101页
     ·材料与方法第99页
     ·结果与分析第99-101页
   ·阳性转化子对线虫致死率的室内测定第101-104页
     ·材料与方法第101-102页
     ·结果与分析第102-104页
   ·讨论第104-107页
     ·淡紫拟青霉转化子对线虫卵囊的作用第104页
     ·淡紫拟青霉转化子对线虫的毒力作用第104-107页
6 结论第107-108页
7 本论文的创新点第108-109页
参考文献第109-128页
附录1 实验所用到的主要仪器与设备第128-129页
附录2 转化子的菌落形态第129-130页
附录3 读博期间发表的论文第130-131页
致谢第131页

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