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限制性内切酶介导(REMI)玉米大斑病菌的遗传转化及其转化子表型分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-13页
2 材料和方法第13-23页
   ·材料第13-14页
     ·供试菌株与转化质粒第13页
     ·供试培养基第13-14页
     ·试剂第14页
     ·溶液的配制第14页
     ·主要仪器和设备第14页
   ·方法第14-23页
     ·细菌的转化第14-15页
     ·质粒的提取第15-16页
     ·原生质体制备与再生第16-17页
     ·REMI 转化及转化子潮霉素抗性的稳定性检测与保存第17页
     ·突变菌株的分子生物学检测第17-19页
     ·突变体的质粒拯救与鉴定第19-20页
     ·突变体的生物学性状观察第20-21页
     ·突变菌株致病性鉴定第21-23页
3 结果与分析第23-38页
   ·质粒的提取第23页
   ·原生质体制备及纯化条件的确定第23-29页
     ·制备原生质体的菌体培养条件第23-25页
     ·酶系统以及酶解条件的选择第25-26页
     ·玉米大斑病菌原生质体的获得第26页
     ·原生质体的纯化第26-27页
     ·原生质体的收集方式对原生质体纯度的影响第27-28页
     ·原生质体的再生第28-29页
     ·潮霉素对玉米大斑病菌的抑制浓度第29页
   ·REMI 遗传转化与转化子的获得第29-30页
   ·突变体的检测第30-31页
     ·突变体插入稳定性检测第30页
     ·PCR 验证第30-31页
   ·突变体的表型分析及致病性测定结果第31-35页
     ·突变菌株生长速度的测定第31页
     ·菌落形态观察第31-32页
     ·转化子分生孢子的显微特征比较第32-33页
     ·突变菌株分生孢子产生能力测定第33页
     ·分生孢子萌发率的测定第33-34页
     ·突变菌株粗毒素的生物活性测定第34-35页
     ·突变菌株致病力测定第35页
   ·典型突变体 M25 的分析第35-38页
     ·菌落生长速度和菌落形态第36页
     ·产孢量的比较第36-37页
     ·致病性的鉴定第37-38页
4 讨论第38-40页
   ·关于原生质体的制备第38页
   ·玉米大斑病菌的 REMI 诱变第38-39页
   ·关于产孢相关突变体的筛选第39页
   ·有待进一步研究的问题第39-40页
5 结论第40-41页
参考文献第41-46页
在读期间发表的学术论文第46-47页
个人简历第47-48页
致谢第48-49页
附录第49-50页

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