外源基因整合及其对棉花受体亲本的影响
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-44页 |
| ·转基因作物应用状况 | 第13-16页 |
| ·转基因棉花研究应用状况 | 第16-17页 |
| ·转基因抗虫棉的研究概况 | 第16-17页 |
| ·转基因抗虫棉应用现状 | 第17页 |
| ·外源基因的遗传转化方法 | 第17-22页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18-19页 |
| ·基因枪法 | 第19-20页 |
| ·种质系统介导法 | 第20-22页 |
| ·花粉介导法 | 第20页 |
| ·花粉管通道法 | 第20-22页 |
| ·外源基因的整合 | 第22-35页 |
| ·外源基因进入受体细胞的过程 | 第23-25页 |
| ·农杆菌介导法中外源基因进入受体细胞的过程 | 第23-24页 |
| ·直接转化法中外源基因进入受体细胞的过程 | 第24-25页 |
| ·外源基因在受体基因组中的整合机理 | 第25-29页 |
| ·外源基因在受体基因组中的分布 | 第29-35页 |
| ·外源基因整合的随机论 | 第29-30页 |
| ·外源基因整合的优先论 | 第30-35页 |
| ·旁侧序列的克隆方法 | 第35-39页 |
| ·IPCR | 第35-36页 |
| ·TAIL-PCR | 第36-37页 |
| ·质粒营救法 | 第37-38页 |
| ·PCR步行法 | 第38-39页 |
| ·基因差异表达研究 | 第39-43页 |
| ·mRNA差异显示 | 第39-40页 |
| ·代表性差异分析 | 第40-41页 |
| ·抑制性扣除杂交 | 第41-42页 |
| ·基因表达系列分析 | 第42页 |
| ·DNA微阵列和基因芯片 | 第42-43页 |
| ·本研究的目的意义 | 第43-44页 |
| 第二章 外源基因整合位点初步分析 | 第44-75页 |
| ·材料与方法 | 第44-53页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·基因来源 | 第44-46页 |
| ·相关试剂 | 第46-47页 |
| ·外源基因整合验证引物 | 第46页 |
| ·PCR walking引物 | 第46页 |
| ·接头及引物 | 第46页 |
| ·限制性内切酶 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-53页 |
| ·花粉管通道转化植株的筛选与鉴定 | 第47页 |
| ·抗虫转化植株的复鉴 | 第47-48页 |
| ·棉花DNA提取 | 第48-49页 |
| ·DNA的质量检测及纯化 | 第49-50页 |
| ·酶切消化基因组DNA | 第50页 |
| ·基因组DNA加接头 | 第50-51页 |
| ·PCR步行过程 | 第51页 |
| ·扩增序列的测序 | 第51-53页 |
| ·序列分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-73页 |
| ·花粉管通道法转基因系的鉴定与筛选 | 第53-56页 |
| ·不同转基因系的分子检测 | 第56页 |
| ·外源基因侧冀序列的克隆 | 第56-58页 |
| ·扩增序列分析 | 第58-70页 |
| ·SEQ13序列组成分析 | 第59-61页 |
| ·SEQ9序列结构分析 | 第61-64页 |
| ·SEQ2序列结构分析 | 第64-66页 |
| ·SEQ4的序列结构分析 | 第66-70页 |
| ·扩增序列比较 | 第70-71页 |
| ·整合携带载体序列比较 | 第71-73页 |
| ·侧翼序列碱基含量比较 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 第三章 外源基因整合对受体亲本产量品质性状的影响 | 第75-84页 |
| ·试验材料与方法 | 第75-76页 |
| ·试验材料 | 第75-76页 |
| ·试验设计 | 第75页 |
| ·数据调查 | 第75-76页 |
| ·数据分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-82页 |
| ·转基因系主要性状的变异 | 第76页 |
| ·主要性状间高级净相关分析 | 第76-81页 |
| ·转基因系表型聚类分析 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-84页 |
| 第四章 外源基因整合对基因表达差异的影响 | 第84-107页 |
| ·材料与方法 | 第84-90页 |
| ·试验材料 | 第84-85页 |
| ·引物选择和筛选 | 第85-86页 |
| ·总RNA提取和纯化 | 第86-87页 |
| ·提取RNA的质量检测 | 第87页 |
| ·RNA琼脂糖电泳 | 第87页 |
| ·RNA样品紫外比色 | 第87页 |
| ·cDNA合成和PCR扩增 | 第87-88页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染 | 第88-90页 |
| ·相关溶液 | 第88页 |
| ·变性PAGE凝胶的制备 | 第88页 |
| ·电泳 | 第88-89页 |
| ·染色 | 第89-90页 |
| ·表达条带统计 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-105页 |
| ·纯合状态下基因表达差异 | 第90-97页 |
| ·亲本之间基因表达差异 | 第90-94页 |
| ·转基因系及受体亲本不同时期基因表达差异 | 第94-97页 |
| ·杂合状态下转基因系基因差异表达研究 | 第97-99页 |
| ·纯合与杂合状态下基因表达差异比较 | 第99-100页 |
| ·基因表达差异与表型性状相关性 | 第100-105页 |
| ·产量性状与基因表达相关性 | 第100-101页 |
| ·纤维品质性状与基因表达相关性 | 第101页 |
| ·不同时期产量性状与基因表达相关性 | 第101-102页 |
| ·不同时期产量性状与基因表达相关性 | 第102-105页 |
| ·讨论 | 第105-107页 |
| 第五章 外源基因整合对受体亲本影响的遗传效应研究 | 第107-117页 |
| ·材料和方法 | 第107-108页 |
| ·材料 | 第107页 |
| ·数据调查 | 第107-108页 |
| ·数据分析 | 第108页 |
| ·结果与分析 | 第108-115页 |
| ·遗传效应分解 | 第108-113页 |
| ·遗传效应分析 | 第113-115页 |
| ·dQTL加性效应分析 | 第113页 |
| ·各材料中dQTL纯合显性效应分析 | 第113-114页 |
| ·各材料中dQTL杂合显性效应分析 | 第114页 |
| ·各材料中遗传背景加性效应分析 | 第114页 |
| ·各材料中遗传背景纯合显性效应分析 | 第114-115页 |
| ·各材料遗传背景杂合显性效应分析 | 第115页 |
| ·讨论 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 附录 | 第134页 |
