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鳜B淋巴细胞的发生和T淋巴细胞受体基因的克隆

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-6页
略缩语表第6-13页
第一章 鱼类的特异性免疫系统:综述第13-35页
 1 免疫组织与器官第13-19页
   ·胸腺(Thymus)第13-15页
   ·头肾(Head kidney)第15-16页
   ·脾脏(Spleen)第16-17页
   ·粘膜相关淋巴组织(Mucosa-associated lymphoid tissue, MALT)第17-19页
 2 淋巴细胞第19-25页
   ·鱼类淋巴细胞的系统发育第19-21页
   ·鱼类B细胞的个体发生第21-23页
   ·鱼类T细胞的个体发生第23-25页
 3 免疫球蛋白和T细胞受体第25-34页
   ·免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)第26-30页
     ·免疫球蛋白的基因组结构第26-29页
     ·免疫球蛋白的表达第29-30页
   ·T细胞抗原受体(T cell receptor, TCR)第30-34页
     ·硬骨鱼类TCR的基因结构第31-32页
     ·硬骨鱼类TCR基因组分析第32-33页
     ·硬骨鱼类TCR的系统发育分析第33-34页
 4 本研究的目的第34-35页
第二章 原位杂交检测鳜B细胞的发生与分布第35-54页
 1 前言第35-36页
 2 材料与方法第36-43页
   ·所需试剂和溶液的配置第36-37页
   ·样品采集第37页
   ·组织固定第37-38页
   ·原位杂交第38-43页
 3 结果第43-51页
   ·鳜体长的变化第43-44页
   ·探针cDNA片段的扩增第44页
   ·质粒的鉴定与酶切第44-45页
   ·探针标记效率的检测第45页
   ·头肾中IgM阳性细胞的发育第45-47页
   ·脾脏中IgM阳性细胞的发育第47-48页
   ·胸腺中IgM阳性细胞的发育第48-49页
   ·粘膜相关淋巴组织中B细胞的发育第49-51页
 4 讨论第51-54页
第三章 IgM, IgD, IgZ在鳜成鱼淋巴组织中的表达第54-64页
 1 前言第54-55页
 2 材料与方法第55-56页
   ·组织处理第55页
   ·探针制备第55页
   ·杂交第55页
   ·信号放大第55-56页
 3 结果第56-62页
   ·探针cDNA片段的扩增第56页
   ·质粒的鉴定与酶切第56-57页
   ·探针标记效率第57页
   ·IgM阳性细胞在组织中的分布第57-58页
   ·IgD阳性细胞在组织中的分布第58页
   ·IgZ阳性细胞在组织中的分布第58-62页
 4 讨论第62-64页
第四章 实时荧光定量PCR检测鳜注射灭活柱状黄杆菌后体内IgM, IgD,IgZ的表达变化情况第64-79页
 1 前言第64-65页
 2 材料与方法第65-70页
   ·实验鱼第65页
   ·细菌第65页
   ·免疫注射第65-66页
   ·样品采集第66页
   ·RNA的提取第66页
   ·RNA样品中DNA的处理第66-67页
   ·cDNA模板的准备第67页
   ·实时荧光定量PCR第67-70页
 3. 结果第70-77页
   ·RNA样品质量的检测第70-71页
   ·目的片段的扩增第71页
   ·质粒的提取第71-72页
   ·标准曲线的建立第72页
   ·IgM表达的变化第72-74页
   ·IgD表达的变化第74页
   ·IgZ表达的变化第74-77页
 4. 讨论第77-79页
第五章 鳜T细胞受体(TCR)α, β, γ链基因片段的分子克隆及表达分析第79-106页
 1 前言第79-80页
 2 材料与方法第80-84页
   ·基因分离第80-83页
     ·RNA 提取第80页
     ·SMART cDNA第一链的合成第80-81页
     ·TCR基因片段的扩增第81页
     ·RACE-PCR第81页
     ·TCR基因cDNA序列的分析及系统进化树的构建第81-82页
     ·TCR基因在不同组织中的表达第82-83页
   ·实时荧光定量PCR分析TCR α、γ基因在鳜注射前后的表达变化第83-84页
 3 结果第84-102页
   ·TCR cDNA序列及推导的氨基酸序列第84-87页
   ·TCR基因的结构及多序列比对分析第87-94页
   ·TCR基因恒定区的系统树构建第94-97页
   ·鳜各组织中TCR基因的mRNA转录水平第97-98页
   ·实时荧光定量PCR扩增效率的检测第98-99页
   ·注射细菌的鳜体内TCRα的表达变化第99页
   ·注射细菌的鳜体内TCRγ的表达变化第99-102页
 4 讨论第102-106页
参考文献第106-133页
附录第133-134页
致谢第134页

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