| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| ·植物柱头和花粉的结构与功能 | 第11-13页 |
| ·花粉的结构与功能 | 第11页 |
| ·柱头的结构与功能 | 第11-13页 |
| ·被子植物花粉与柱头的相互识别作用 | 第13-19页 |
| ·干柱头植物花粉与柱头之间的相互识别 | 第14-17页 |
| ·湿柱头植物花粉与柱头之间的相互识别 | 第17-19页 |
| ·花粉-柱头识别过程中的胞吞、胞吐作用 | 第19-20页 |
| ·花粉、柱头蛋白质组学研究进展 | 第20-21页 |
| ·植株中的小G 蛋白 | 第21-23页 |
| ·利用VIGS 技术进行基因功能验证的研究进展 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2 实验材料与方法 | 第27-39页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料及取材条件 | 第27页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·酶和生化试剂 | 第27页 |
| ·PCR 引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·植物材料总蛋白的提取和纯化 | 第28-29页 |
| ·蛋白质的分离 | 第29-30页 |
| ·双向电泳凝胶图像分析 | 第30页 |
| ·蛋白质凝胶斑点切取 | 第30页 |
| ·蛋白质胶内酶解 | 第30-31页 |
| ·蛋白质样品脱盐 | 第31页 |
| ·蛋白质质谱分析 | 第31-32页 |
| ·MALDI-TOF MS 数据分析 | 第32页 |
| ·表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·烟草叶片注射 | 第35-36页 |
| ·花粉管的苯胺蓝染色分析 | 第36页 |
| ·花药的亚历山大染色 | 第36页 |
| ·花粉体外萌发试验 | 第36页 |
| ·烟草外施乙烯试验 | 第36页 |
| ·乙烯释放量测定 | 第36-37页 |
| ·ACC 含量测定 | 第37页 |
| ·烟草表型恢复实验 | 第37页 |
| ·qRT-PCR | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-55页 |
| ·烟草柱头分泌物及表层细胞蛋白质 | 第39-41页 |
| ·蛋白相应基因转录水平检测 | 第41-42页 |
| ·利用VIGS 技术验证目的基因功能 | 第42-45页 |
| ·VIGS 沉默效果验证 | 第42-44页 |
| ·病毒沉默载体的构建 | 第44-45页 |
| ·蛋白P103 功能分析 | 第45-53页 |
| ·TRV-P103 植株表型观察 | 第45-49页 |
| ·P103 蛋白序列分析 | 第49-50页 |
| ·基因NtRab8-6 表达模式分析 | 第50页 |
| ·NtRab8-6 参与乙烯信号转导过程 | 第50-53页 |
| ·蛋白P18.1 功能分析 | 第53-55页 |
| ·TRV-P18.1 表型观察 | 第53-54页 |
| ·TRV-P18.1 雄配子体授粉障碍 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-60页 |
| ·烟草柱头分泌物表达蛋白的性质 | 第55-56页 |
| ·囊泡运输可能在烟草花粉-柱头识别过程中发挥重要作用 | 第56页 |
| ·Rab8 参与调控植株发育 | 第56-57页 |
| ·Rab8 参与乙烯信号转导途径 | 第57-58页 |
| ·Exocyst 控制花粉萌发和花粉管生长 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74页 |