| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-21页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·类胡萝卜素 | 第9-11页 |
| ·类胡萝卜素的结构特点 | 第9-10页 |
| ·类胡萝卜素的功能 | 第10-11页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶基因 | 第11-12页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶 | 第12-13页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶在类胡萝卜素代谢途径中的位置 | 第13-14页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶的作用机理 | 第14-16页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶催化的产物 | 第16-17页 |
| ·β-隐黄素 | 第16-17页 |
| ·玉米黄素 | 第17页 |
| ·β-羟化酶的克隆表达研究现状 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌表达载体 | 第18-19页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 第2章 材料和方法 | 第21-43页 |
| ·材料 | 第21-28页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-23页 |
| ·使用的数据库及分析软件 | 第23页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·常用缓冲液与溶液及配制 | 第25-27页 |
| ·电泳胶 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-43页 |
| ·核酸的提取和纯化 | 第28-31页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶cDNA的克隆与鉴定 | 第31-40页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第40-43页 |
| 第3章 结果与分析 | 第43-61页 |
| ·核酸的提取和纯化 | 第43-45页 |
| ·基因组DNA提取结果 | 第43页 |
| ·RNA的提取结果 | 第43-45页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶基因的克隆与鉴定 | 第45-48页 |
| ·RT-PCR | 第45页 |
| ·菌落PCR | 第45-46页 |
| ·重组质粒pMD19-T-CHX的提取 | 第46-48页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第48页 |
| ·原核表达载的构建 | 第48-52页 |
| ·pMD19-T-CHX和PET载体的双酶切 | 第48-49页 |
| ·菌落PCR | 第49-50页 |
| ·PET-CHX质粒的提取 | 第50-51页 |
| ·PET-CHX的双酶切 | 第51页 |
| ·测序 | 第51-52页 |
| ·南丰密橘β-胡萝卜素羟化酶蛋白结构的生物信息学分析 | 第52-61页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶的理化性质分析 | 第52-53页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶模体的分析 | 第53-54页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶蛋白质跨膜性分析 | 第54-56页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶蛋白质疏水性分析 | 第56-57页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶蛋白质二、三级结构分析 | 第57-59页 |
| ·南丰蜜橘β-胡萝卜素羟化酶蛋白质序列比对分析 | 第59-61页 |
| 第4章 讨论 | 第61-65页 |
| ·RNA的提取 | 第61页 |
| ·PCR体系的优化 | 第61-62页 |
| ·真核基因在大肠杆菌中的表达 | 第62-63页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶表达的调控机制 | 第63页 |
| ·β-胡萝卜素羟化酶在类胡萝卜素生产中的利用前景 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录A Cit pMD19-T-CHX P47测序波形图 | 第70-72页 |
| 附录B 0516786(2)G01测序波形图 | 第72-75页 |
| 附录C 缩略词 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第76页 |
