摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第一章 前言 | 第10-16页 |
·FGF和FGFR2简介 | 第10-11页 |
·Cre-LoxP重组酶系统简介 | 第11-12页 |
·FGFR2RNAi小鼠简介 | 第12-13页 |
·RNAi干涉简介 | 第12页 |
·FGFR2RNAi小鼠简介 | 第12-13页 |
·Coll2a-Cre小鼠简介 | 第13-14页 |
·利用动物模型研究基因功能的优势 | 第14页 |
·研究的目的 | 第14-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-28页 |
·材料 | 第16-18页 |
·试剂与仪器 | 第16页 |
·小鼠基因型鉴定需要配置的溶液 | 第16页 |
·进行切片观察需要配置的一些溶液 | 第16-17页 |
·软骨细胞培养需要的溶液及配置 | 第17-18页 |
·细胞RNA提取需要配置的溶液 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-28页 |
·FGFR2RNAi小鼠基因型的鉴定 | 第18-19页 |
·FGFR2RNAi小鼠尾巴DNA的提取 | 第18-19页 |
·FGFR2RNAi小鼠PCR鉴定 | 第19页 |
·Coll2a-Cre小鼠基因型鉴定 | 第19-20页 |
·Coll2a-Cre小鼠尾巴DNA的提取 | 第19-20页 |
·引物的确定 | 第20页 |
·PCR鉴定 | 第20页 |
·将PCR产物进行电泳鉴定 | 第20页 |
·双转基因小鼠基因型的鉴定 | 第20-22页 |
·双转基因FGFR2RNA;Coll2a-Cre小鼠DNA的提 | 第21页 |
·鉴定双转基因小鼠所需引物的确定 | 第21-22页 |
·PCR | 第22页 |
·PCR产物纯化、测序 | 第22页 |
·双转基因小鼠和同窝对照小鼠整体形态观察 | 第22-23页 |
·出生后11天小鼠形 | 第23页 |
·出生后21天小鼠形态观察 | 第23页 |
·双转基因小鼠与同窝对照小鼠体重与时间的关 | 第23页 |
·统计学分析 | 第23页 |
·双转基因小鼠和同窝对照小鼠生长板切片观察 | 第23-25页 |
·出生后11天生长板切片的观察 | 第23-24页 |
·出生后21天生长板切片的观察 | 第24-25页 |
·统计学分析 | 第25页 |
·软骨细胞培养及RT-PCR分析 | 第25-28页 |
·软骨细胞分离 | 第25-26页 |
·软骨细胞单层培养及传代 | 第26-28页 |
第三章 结果与分析 | 第28-41页 |
·FGFR2RNAi小鼠基因鉴定结果 | 第28页 |
·分析 | 第28-29页 |
·Coll2a-Cre小鼠鉴定结果 | 第29-30页 |
·PCR产物凝胶电泳 | 第29页 |
·分析 | 第29-30页 |
·双转基因小鼠基因型鉴定结果 | 第30-31页 |
·PCR产物凝胶电泳 | 第30页 |
·PCR产物纯化、测序结果 | 第30页 |
·测序结果的BLAST比对结果 | 第30-31页 |
·分析 | 第31页 |
·双转基因小鼠和同窝对照小鼠在形态上的区别结果 | 第31-34页 |
·出生11天的雌性小鼠形态观察结果 | 第31-32页 |
·出生21天的雄性小鼠形态观察结果 | 第32页 |
·小鼠体重与时间关系图 | 第32-34页 |
·雌性小鼠体重与时间关系图 | 第32-33页 |
·雄性小鼠体重与时间关 | 第33-34页 |
·统计学分析结果 | 第34页 |
·双转基因小鼠与同窝对照小鼠生长板切片图观察结果 | 第34-36页 |
·出生11天的雌性小鼠生长板切片图观察结果 | 第34-35页 |
·出生21天的雄性小鼠生长板切片图观察结果 | 第35-36页 |
·统计学分析结果 | 第36页 |
·结果分析 | 第36页 |
·软骨细胞培养及RT-PCR结果 | 第36-41页 |
·软骨细胞分离 | 第36-37页 |
·细胞培养液 | 第37页 |
·软骨细胞单层培养及传代结果 | 第37页 |
·细胞RNA的提取 | 第37页 |
·RT | 第37页 |
·设计的引物BLAST比对结果 | 第37-38页 |
·RT-PCR结果 | 第38-39页 |
·结果分析 | 第39-41页 |
第四章 讨论 | 第41-44页 |
·RNAi小鼠基因型的鉴定 | 第41页 |
·双转基因小鼠基因型的鉴定 | 第41页 |
·细胞体外培养分析 | 第41页 |
·骨形成分析 | 第41-44页 |
第五章 结论展望 | 第44-45页 |
·结论 | 第44页 |
·展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录A | 第48-55页 |
附录B | 第55-60页 |
附录C | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
读研期间取得研究成果 | 第64页 |