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MSTN基因RNAi双元素表达载体构建及效果研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
第一章 前言第12-26页
   ·MSTN基因的概况第12-17页
   ·RNA干扰技术简介第17-24页
   ·本研究的目的及意义第24-26页
第二章 MSTN基因 RNAi双元表达载体构建第26-46页
   ·材料第26-27页
     ·菌株和质粒第26页
     ·工具酶和主要试剂第26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·方法第27-39页
     ·试验路线第27页
     ·引物设计第27-28页
     ·各种试剂的配制第28-30页
     ·MSTN基因片段的PCR扩增第30页
     ·PCR产物凝胶回收第30-31页
     ·感受态细胞的制备第31页
     ·目的基因克隆第31-35页
     ·MSTN-1的亚克隆第35-36页
     ·MSTN-2的亚克隆第36-38页
     ·构建含有 MSTN基因RNAi双元表达载体第38-39页
   ·结果第39-44页
     ·MSTN基因片断的扩增第39-40页
     ·MSTN基因片断的克隆第40-41页
     ·TA克隆测序结果第41-42页
     ·MSTN-1的亚克隆结果第42-43页
     ·MSTN-2的亚克隆结果第43页
     ·MSTN基因RNAi双元表达载体的构建第43-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第三章 成肌细胞的培养及pEGFP-N1-MSTN1-MSTN2抑制 MSTN基因表达的研究第46-60页
   ·试验材料第46-49页
     ·试验动物第46页
     ·试验药品及材料第46-47页
     ·培养基及主要溶液配制第47-49页
     ·主要仪器第49页
   ·试验方法第49-54页
     ·试验路线第49-50页
     ·鸡原代成肌细胞的体外培养第50页
     ·成肌细胞体外培养情况鉴定第50-51页
     ·传代第51页
     ·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2瞬时转染成肌细胞第51页
     ·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对MSTN基因表达影响检测第51-54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·成肌细胞的形态观察第54-55页
     ·荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达第55页
     ·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对成肌细胞增殖与分化的影响第55-57页
   ·讨论第57-59页
     ·家禽骨骼肌发育动物模型的建立第57-58页
     ·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对成肌细胞增殖与分化作用机理分析第58-59页
   ·小结第59-60页
第四章 结论第60-61页
参考文献第61-66页
附录第66-69页
致谢第69-70页
攻读学位期间发表论文第70页

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