中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-26页 |
·MSTN基因的概况 | 第12-17页 |
·RNA干扰技术简介 | 第17-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 MSTN基因 RNAi双元表达载体构建 | 第26-46页 |
·材料 | 第26-27页 |
·菌株和质粒 | 第26页 |
·工具酶和主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-39页 |
·试验路线 | 第27页 |
·引物设计 | 第27-28页 |
·各种试剂的配制 | 第28-30页 |
·MSTN基因片段的PCR扩增 | 第30页 |
·PCR产物凝胶回收 | 第30-31页 |
·感受态细胞的制备 | 第31页 |
·目的基因克隆 | 第31-35页 |
·MSTN-1的亚克隆 | 第35-36页 |
·MSTN-2的亚克隆 | 第36-38页 |
·构建含有 MSTN基因RNAi双元表达载体 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·MSTN基因片断的扩增 | 第39-40页 |
·MSTN基因片断的克隆 | 第40-41页 |
·TA克隆测序结果 | 第41-42页 |
·MSTN-1的亚克隆结果 | 第42-43页 |
·MSTN-2的亚克隆结果 | 第43页 |
·MSTN基因RNAi双元表达载体的构建 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第三章 成肌细胞的培养及pEGFP-N1-MSTN1-MSTN2抑制 MSTN基因表达的研究 | 第46-60页 |
·试验材料 | 第46-49页 |
·试验动物 | 第46页 |
·试验药品及材料 | 第46-47页 |
·培养基及主要溶液配制 | 第47-49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·试验方法 | 第49-54页 |
·试验路线 | 第49-50页 |
·鸡原代成肌细胞的体外培养 | 第50页 |
·成肌细胞体外培养情况鉴定 | 第50-51页 |
·传代 | 第51页 |
·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2瞬时转染成肌细胞 | 第51页 |
·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对MSTN基因表达影响检测 | 第51-54页 |
·结果与分析 | 第54-57页 |
·成肌细胞的形态观察 | 第54-55页 |
·荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达 | 第55页 |
·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对成肌细胞增殖与分化的影响 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·家禽骨骼肌发育动物模型的建立 | 第57-58页 |
·pEGFP-N1-MSTN_1-MSTN_2对成肌细胞增殖与分化作用机理分析 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第四章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
附录 | 第66-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读学位期间发表论文 | 第70页 |