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辣椒疫霉(Phytophthora capsici)致病遗传变异、多聚半乳糖醛酸酶基因克隆及表达特性研究

中文摘要第1-14页
Abstract第14-18页
文献综述第18-55页
 引言第18页
 1 辣椒疫病的研究进展第18-21页
   ·辣椒疫病的发生危害情况第18-19页
   ·辣椒疫霉菌及其生理分化第19页
   ·辣椒疫霉菌的生物学特性第19-20页
   ·辣椒疫病的防治第20-21页
 2 植物病原真菌的群体遗传学第21-27页
   ·植物病原真菌群体遗传的多样性第21-22页
   ·植物病原真菌群体遗传结构特点及其演化过程第22-24页
   ·植物病原群体遗传学的研究指导植物病害防治第24-25页
   ·研究植物病原真菌群体遗传学的方法第25-27页
 3 植物病原真菌致病基因的研究进展第27-31页
   ·与侵染结构产生有关的基因第27-28页
   ·与细胞壁降解有关的基因第28页
   ·与寄主代谢反应产物有关的基因第28-29页
   ·毒素基因第29页
   ·与信号传导有关的基因第29-30页
   ·其它功能的致病基因第30-31页
 4 植物病原菌致病遗传变异的研究现状第31-35页
   ·植物病原菌的遗传变异和致病分化现象第32-33页
   ·植物病原卵菌疫霉菌致病遗传变异研究进展第33-34页
   ·辣椒疫霉菌致病遗传变异研究第34-35页
 5 多聚半乳糖醛酸酶研究进展第35-49页
   ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)的基本生物学特性第36-39页
   ·植物多聚半乳糖醛酸酶研究进展第39页
   ·植物病原菌多聚半乳糖醛酸酶研究进展第39-49页
 6 利用酵母体系表达外源蛋白的研究进展第49-53页
   ·酿酒酵母表达体系第49-50页
   ·毕赤酵母表达体系第50-53页
 实验目的及意义第53-55页
第一章 中国辣椒疫霉菌致病遗传变异研究第55-79页
 1 材料与方法第55-64页
   ·标本的采集、菌种的分离、鉴定及培养和保存第55-57页
   ·我国不同地区辣椒疫霉菌菌株的致病性测定第57-58页
   ·供试菌株DNA 的提取第58-59页
   ·供试菌株的RAPD 分析第59-61页
   ·ITS-rDNA 区段的序列分析第61-64页
 2 结果与分析第64-74页
   ·供试辣椒疫霉菌菌株致病力测定结果第64-66页
   ·供试菌株的群体遗传学第66-69页
   ·供试不同致病力菌株基因型及其致病型相关性第69-72页
   ·供试致病性和非致病性辣椒疫霉菌的遗传变异研究第72-74页
 3 讨论第74-79页
   ·关于我国不同地区辣椒疫霉菌群体遗传多样性问题第74-76页
   ·关于受试不同致病力菌株致病型和基因型多样性的讨论第76-77页
   ·辣椒疫霉菌的致病遗传变异研究讨论第77-79页
第二章 辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶活性测定及其基因组文库的构建第79-95页
 1 材料与方法第79-89页
   ·材料第79-80页
   ·方法第80-89页
 2 结果与分析第89-93页
   ·辣椒疫霉菌致病性菌株接种前后PG 活性的比较第89-90页
   ·辣椒疫霉菌致病性和非致病性菌株PG 活性的比较第90-91页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶活性与其致病力的关系第91页
   ·辣椒疫霉菌基因组DNA 的提取第91-92页
   ·辣椒疫霉菌基因组DNA 的超声打断第92页
   ·辣椒疫霉菌的基因组文库鉴定结果第92-93页
 3 讨论第93-95页
第三章 辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆及序列分析第95-135页
 1 材料与方法第95-100页
   ·材料第95-97页
   ·实验方法第97-100页
 2 结果与分析第100-132页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pcp92 基因的克隆及其序列分析第100-107页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pcp93 基因的序列及结构分析第107-113页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pcp95 基因的序列及结构分析第113-120页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因pcp91 的克隆及序列分析第120-122页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因pcp94 的克隆及序列分析第122-123页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因pcp96 的克隆及序列分析第123-124页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因pcp97 的克隆及序列分析第124-126页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因的同源性及系统发生分析第126-132页
 3 讨论第132-135页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因家族的生物学意义第132-133页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因的多样性分析第133页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因与其它PGs 的关系第133页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶基因家族的进化分析第133-134页
   ·辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶的结构分析第134-135页
第四章 辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pcpg2 基因的体外表达第135-165页
 1 材料和方法第135-148页
   ·材料第135-137页
   ·实验方法第137-148页
 2 结果与分析第148-157页
   ·多聚半乳糖醛酸酶基因pcpg2 在毕赤酵母中的表达第148-153页
   ·兔抗血清的制备第153页
   ·Western-Blotting 鉴定第153-154页
   ·pcpg2 基因的原核表达及SDS-PAGE 分析第154-157页
 3 讨论第157-165页
   ·表达系统的选择第157-158页
   ·外源基因在Pichia pastoris 中的分泌表达的必要性第158-159页
   ·影响外源基因表达量的因素第159-163页
   ·表达多聚半乳糖醛酸酶PG2 的活性第163-164页
   ·对于原核表达的几点讨论第164-165页
第五章 辣椒疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶pcpg2 基因在辣椒叶片的表达第165-175页
 1 材料与方法第165-171页
   ·材料第165页
   ·方法第165-171页
 2 结果与分析第171-174页
   ·RT-PCR 扩增结果第171-172页
   ·Northern Blot 检测结果第172-173页
   ·真核表达蛋白的纯化第173页
   ·真核表达蛋白PG2 对辣椒叶片的致病性第173-174页
 3 讨论第174-175页
结论与建议第175-177页
 1 结论第175-176页
 2 建议第176-177页
参考文献第177-192页
致谢第192-193页
攻读学位期间发表论文情况第193页

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