| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第18-22页 |
| 1 引言 | 第22-44页 |
| ·低温胁迫对植物的影响 | 第22-33页 |
| ·低温对植物光合作用的影响 | 第22-23页 |
| ·低温对植物生物膜的影响 | 第23-24页 |
| ·低温条件下PSII 的光抑制 | 第24-26页 |
| ·低温条件下PSI 的光抑制 | 第26-28页 |
| ·低温胁迫下的光破坏防御机制 | 第28-33页 |
| ·依赖于叶黄素循环的能量耗散 | 第28-31页 |
| ·活性氧清除系统 | 第31-32页 |
| ·D_1 蛋白的周转 | 第32-33页 |
| ·高温胁迫对植物的影响 | 第33-38页 |
| ·高温对植物光合作用的影响 | 第33-34页 |
| ·高温对植物生物膜的影响 | 第34-35页 |
| ·高温条件下PSII 的光抑制 | 第35-36页 |
| ·高温胁迫下的光破坏防御机制 | 第36-37页 |
| ·水—水循环 | 第37-38页 |
| ·不饱和脂肪酸的合成 | 第38-43页 |
| ·不饱和脂肪酸的生物合成 | 第38-41页 |
| ·甘油-3-磷酸酰基转移酶基因及其调控途径 | 第41-43页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第43-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-70页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·材料处理 | 第44页 |
| ·菌株与质粒 | 第44页 |
| ·酶及生化试剂 | 第44-45页 |
| ·PCR引物 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-70页 |
| ·总RNA 的提取 | 第45-47页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第47页 |
| ·cDNA 纯化 | 第47页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾 | 第47-48页 |
| ·番茄甘油-3-磷酸酰基转移酶基因全长的克隆 | 第48-51页 |
| ·中间片段的获得 | 第48页 |
| ·5’RACE 获得5’端序列 | 第48-49页 |
| ·3’RACE 获得3’端序列 | 第49-50页 |
| ·番茄甘油-3-磷酸酰基转移酶基因全长的克隆 | 第50-51页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第51-53页 |
| ·总RNA 的提取 | 第51页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第51-52页 |
| ·转膜 | 第52页 |
| ·预杂交 | 第52-53页 |
| ·探针的制备 | 第53页 |
| ·杂交 | 第53页 |
| ·洗膜 | 第53页 |
| ·放射自显影 | 第53页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第53-58页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·连接 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第55页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第55-56页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第56页 |
| ·回收 | 第56页 |
| ·DNA 序列测定 | 第56页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第56-57页 |
| ·利用农杆菌介导转化番茄 | 第57-58页 |
| ·转基因番茄植株的PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·CTAB 法微量法提取基因组DNA | 第58页 |
| ·转基因植株的PCR 筛选 | 第58-59页 |
| ·甘油-3-磷酸酰基转移酶的原核表达及Western 杂交 | 第59-63页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第59页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第59-60页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第60-61页 |
| ·抗体的制备 | 第61页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第61页 |
| ·Western 杂交 | 第61-63页 |
| ·LeGPAT 的叶绿体定位 | 第63-65页 |
| ·甘油-3-磷酸酰基转移酶活性和选择性的测定 | 第65-66页 |
| ·转基因番茄生理指标的测定 | 第66-70页 |
| ·转基因番茄叶片膜脂含量的测定方法 | 第66-67页 |
| ·光合气体交换参数的测定 | 第67页 |
| ·放氧活性的测定 | 第67页 |
| ·荧光参数测定 | 第67-68页 |
| ·P700的820 nm光吸收 | 第68页 |
| ·叶黄素循环色素组分分析 | 第68页 |
| ·0_~(?) 和H_2O_2的测定 | 第68页 |
| ·叶绿体活性氧清除酶的活性测定 | 第68-69页 |
| ·可溶性蛋白的测定 | 第69页 |
| ·叶片电导率的测定 | 第69页 |
| ·花粉活性的测定 | 第69页 |
| ·扫描电镜样品的制作与观察 | 第69页 |
| ·半薄切片的制作与透射电镜的观察 | 第69-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-98页 |
| ·番茄叶绿体甘油-3-磷酸酰基转移酶基因的分离及表达分析 | 第70-80页 |
| ·LeGPAT的分离 | 第70-71页 |
| ·LeGPAT的序列分析 | 第71-76页 |
| ·LeGPAT-GFP 融合蛋白的亚细胞定位 | 第76页 |
| ·LeGPAT在番茄中的表达分析 | 第76-78页 |
| ·LeGPAT在番茄不同器官中的表达 | 第76-77页 |
| ·不同温度和不同时间LeGPAT在番茄中的表达 | 第77-78页 |
| ·LeGPAT在大肠杆菌中的表达 | 第78-80页 |
| ·原核表达载体pET-LeGPAT的构建 | 第78-79页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第79-80页 |
| ·LeGPAT在番茄中的遗传转化 | 第80-84页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第80-82页 |
| ·转正、反义LeGPAT植株的鉴定 | 第82-84页 |
| ·LeGPAT的过量表达减轻番茄的低温光抑制 | 第84-90页 |
| ·甘油-3-磷酸酰基转移酶底物选择性和活性的测定 | 第84-85页 |
| ·转正义基因番茄PG的脂肪酸组成 | 第85页 |
| ·LeGPAT的过量表达对低温胁迫下相对电导率的影响 | 第85-86页 |
| ·LeGPAT的过量表达对低温胁迫下光合速率的影响 | 第86页 |
| ·LeGPAT的过量表达减轻低温胁迫下PSII的光抑制 | 第86-88页 |
| ·LeGPAT的过量表达减轻低温胁迫下PSI的光抑制 | 第88页 |
| ·LeGPAT的过量表达对低温胁迫下叶绿体SOD和APX活性的影响 | 第88-89页 |
| ·LeGPAT的过量表达对低温胁迫下O~(?)_2和H_2O_2含量的影响 | 第89-90页 |
| ·LeGPAT的缺失影响花粉的育性，提高番茄的抗高温能力 | 第90-98页 |
| ·转反义基因番茄PG的脂肪酸组成 | 第90页 |
| ·反义介导的LeGPAT的缺失影响花的发育 | 第90-92页 |
| ·反义介导的LeGPAT的缺失能够推迟绒毡层的降解 | 第92-96页 |
| ·反义介导的LeGPAT的缺失减轻高温胁迫下PSII的光抑制 | 第96-98页 |
| 4 讨论 | 第98-103页 |
| ·LeGPAT 编码一种叶绿体甘油-3-磷酸酰基转移酶 | 第98页 |
| ·过量表达LeGPAT显著提高番茄的耐冷性 | 第98-100页 |
| ·反义介导的LeGPAT的缺失显著提高番茄的耐热性 | 第100-101页 |
| ·反义介导的LeGPAT的缺失影响番茄的育性 | 第101-103页 |
| 5 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-125页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
