| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| ·对虾主要病毒 | 第11-17页 |
| ·白斑综合征病毒 | 第11页 |
| ·桃拉综合征病毒 | 第11-13页 |
| ·黄头病毒 | 第13页 |
| ·对虾杆状病毒 | 第13-14页 |
| ·传染性皮下和造血组织坏死病毒 | 第14-15页 |
| ·传染性肌肉坏死病毒 | 第15-16页 |
| ·斑节对虾杆状病毒 | 第16-17页 |
| ·多重PCR 技术 | 第17-18页 |
| ·多重PCR 技术原理 | 第17-18页 |
| ·影响多重PCR 的因素 | 第18页 |
| ·基因芯片技术 | 第18-19页 |
| ·基因芯片的产生背景 | 第18-19页 |
| ·基因芯片的概念和原理 | 第19页 |
| ·基因芯片的应用 | 第19页 |
| ·本文研究目的及研究内容 | 第19-20页 |
| ·参考文献 | 第20-22页 |
| 第二章 对虾病原的采集和常见病毒性疾病的流行病学调查分析 | 第22-35页 |
| ·材料和方法 | 第22-28页 |
| ·对虾病料的采集 | 第22-25页 |
| ·样品处理 | 第25-28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·电镜切片观察 | 第28-29页 |
| ·六种对虾病毒流行病学调查初步报告 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·参考文献 | 第33-35页 |
| 第三章 六种对虾病毒多重 RT-PCR 检测方法的建立 | 第35-46页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·质粒与试剂 | 第35-36页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·核酸制备 | 第36-37页 |
| ·PCR 反应体系 | 第37页 |
| ·多重PCR 方法的建立 | 第37-38页 |
| ·特异性和灵敏度验证 | 第38页 |
| ·实际样品检测 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·多重PCR 条件优化结果 | 第38-40页 |
| ·特异性验证结果 | 第40-41页 |
| ·灵敏度验证结果 | 第41-42页 |
| ·实际样品检测结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·参考文献 | 第43-46页 |
| 第四章 对虾检测型基因芯片的设计、优化 | 第46-56页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·病料来源及引物探针的合成 | 第46-47页 |
| ·主要仪器和化学试剂 | 第47页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第47-48页 |
| ·Cy3 标记四重PCR 产物的制备 | 第48页 |
| ·芯片的制备及探针浓度的优化 | 第48-49页 |
| ·芯片杂交条件的优化 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·基片比较 | 第49-50页 |
| ·探针浓度的优化 | 第50-51页 |
| ·膜芯片杂交时间的优化 | 第51-52页 |
| ·杂交温度的优化 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·参考文献 | 第54-56页 |
| 第五章 八种对虾病毒基因芯片检测方法的建立 | 第56-67页 |
| ·材料和方法 | 第56-62页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·主要仪器和化学试剂 | 第57页 |
| ·芯片设计 | 第57-58页 |
| ·引物和探针设计、合成 | 第58-59页 |
| ·病毒目的片段基因克隆的构建 | 第59-60页 |
| ·芯片制备 | 第60页 |
| ·检测样品的制备 | 第60页 |
| ·杂交与数据分析 | 第60-61页 |
| ·特异性验证和实际样品检测 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-65页 |
| ·有效性 | 第62页 |
| ·特异性 | 第62-64页 |
| ·实际样品检测 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·参考文献 | 第66-67页 |
| 第六章 公用接头多重 RT-PCR 与基因芯片的结合 | 第67-78页 |
| ·材料与方法 | 第68-70页 |
| ·芯片设计 | 第68页 |
| ·引物和探针设计、合成 | 第68-69页 |
| ·病毒目的片段基因克隆的构建 | 第69页 |
| ·芯片制备 | 第69页 |
| ·Cy3 标记的公用接头多重PCR 扩增 | 第69页 |
| ·杂交与数据分析 | 第69-70页 |
| ·特异性验证和灵敏度检测 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-75页 |
| ·可行性 | 第70-71页 |
| ·特异性 | 第71-72页 |
| ·灵敏度验证 | 第72-75页 |
| ·讨论 | 第75页 |
| ·参考文献 | 第75-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
| 发表的学术论文 | 第81页 |