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养殖对虾病毒性流行病学调查及高通量基因检测芯片的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 前言第11-22页
   ·对虾主要病毒第11-17页
     ·白斑综合征病毒第11页
     ·桃拉综合征病毒第11-13页
     ·黄头病毒第13页
       ·对虾杆状病毒第13-14页
     ·传染性皮下和造血组织坏死病毒第14-15页
     ·传染性肌肉坏死病毒第15-16页
     ·斑节对虾杆状病毒第16-17页
   ·多重PCR 技术第17-18页
     ·多重PCR 技术原理第17-18页
     ·影响多重PCR 的因素第18页
   ·基因芯片技术第18-19页
     ·基因芯片的产生背景第18-19页
     ·基因芯片的概念和原理第19页
     ·基因芯片的应用第19页
   ·本文研究目的及研究内容第19-20页
   ·参考文献第20-22页
第二章 对虾病原的采集和常见病毒性疾病的流行病学调查分析第22-35页
   ·材料和方法第22-28页
     ·对虾病料的采集第22-25页
     ·样品处理第25-28页
   ·结果第28-31页
     ·电镜切片观察第28-29页
     ·六种对虾病毒流行病学调查初步报告第29-31页
   ·讨论第31-33页
   ·参考文献第33-35页
第三章 六种对虾病毒多重 RT-PCR 检测方法的建立第35-46页
   ·材料与方法第35-38页
     ·材料第35页
     ·质粒与试剂第35-36页
     ·引物设计与合成第36页
     ·核酸制备第36-37页
     ·PCR 反应体系第37页
     ·多重PCR 方法的建立第37-38页
     ·特异性和灵敏度验证第38页
     ·实际样品检测第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·多重PCR 条件优化结果第38-40页
     ·特异性验证结果第40-41页
     ·灵敏度验证结果第41-42页
     ·实际样品检测结果第42页
   ·讨论第42-43页
   ·参考文献第43-46页
第四章 对虾检测型基因芯片的设计、优化第46-56页
   ·材料与方法第46-49页
     ·病料来源及引物探针的合成第46-47页
     ·主要仪器和化学试剂第47页
     ·质粒标准品的制备第47-48页
     ·Cy3 标记四重PCR 产物的制备第48页
     ·芯片的制备及探针浓度的优化第48-49页
     ·芯片杂交条件的优化第49页
   ·结果第49-53页
     ·基片比较第49-50页
     ·探针浓度的优化第50-51页
     ·膜芯片杂交时间的优化第51-52页
     ·杂交温度的优化第52-53页
   ·讨论第53-54页
   ·参考文献第54-56页
第五章 八种对虾病毒基因芯片检测方法的建立第56-67页
   ·材料和方法第56-62页
     ·材料第56-57页
     ·主要仪器和化学试剂第57页
     ·芯片设计第57-58页
     ·引物和探针设计、合成第58-59页
     ·病毒目的片段基因克隆的构建第59-60页
     ·芯片制备第60页
     ·检测样品的制备第60页
     ·杂交与数据分析第60-61页
     ·特异性验证和实际样品检测第61-62页
     ·结果第62-65页
     ·有效性第62页
     ·特异性第62-64页
     ·实际样品检测第64-65页
   ·讨论第65-66页
   ·参考文献第66-67页
第六章 公用接头多重 RT-PCR 与基因芯片的结合第67-78页
   ·材料与方法第68-70页
     ·芯片设计第68页
     ·引物和探针设计、合成第68-69页
     ·病毒目的片段基因克隆的构建第69页
     ·芯片制备第69页
     ·Cy3 标记的公用接头多重PCR 扩增第69页
     ·杂交与数据分析第69-70页
     ·特异性验证和灵敏度检测第70页
     ·结果第70-75页
     ·可行性第70-71页
     ·特异性第71-72页
     ·灵敏度验证第72-75页
   ·讨论第75页
   ·参考文献第75-78页
附录第78-80页
致谢第80-81页
个人简历第81页
发表的学术论文第81页

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