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蓝色花形成相关基因cDNA克隆与植物表达载体构建

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 文献综述第9-19页
   ·花色形成概述第9-10页
   ·蓝色花的形成第10-11页
   ·蓝色花色合成途径中相关基因的研究第11-14页
     ·类黄酮-3’5’-羟基化酶作用机理第11页
     ·同源类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的表达特性第11-12页
     ·类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的分离第12页
     ·类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的应用研究第12-14页
   ·植物基因克隆的几种常用方法第14-16页
     ·根据已知序列或其它物种中已有序列克隆基因第14页
     ·表型基因克隆法第14-15页
     ·转座子标签技术第15页
     ·mRNA 差异表达显示法第15页
     ·植物功能基因的克隆第15页
     ·DNA 芯片技术第15-16页
     ·图位克隆技术第16页
     ·利用生物信息学进行的电子克隆第16页
   ·利用基因工程技术培育蓝色花卉的策略第16-17页
   ·本研究的目的意义第17-19页
第二章 材料与方法第19-26页
   ·试验材料第19-21页
     ·植物材料第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·主要仪器第20页
     ·引物第20页
     ·感受态细胞第20页
     ·质粒第20-21页
   ·试验方法第21-26页
     ·RNA 的提取第21-22页
     ·反转录PCR 扩增第22-23页
     ·PCR 产物回收第23-24页
     ·连接反应第24页
     ·转化大肠杆菌及筛选第24-25页
     ·酶切鉴定第25页
     ·菌液保存及cDNA 片段测序第25-26页
第三章 结果与分析第26-34页
   ·RNA 的提取第26-27页
     ·葡萄风信子RNA 的提取第26页
     ·矮牵牛和风信子总RNA 的提取第26-27页
   ·对三种植物材料总RNA 进行反转录PCR第27页
   ·PCR 产物的回收克隆及酶切鉴定第27-30页
   ·克隆CDNA 片断序列分析第30-31页
     ·矮牵牛类黄酮-3’5’-羟基化酶基因(HF1、HF2)克隆序列分析第30-31页
     ·矮牵牛85 蛋白编码基因(DifF)克隆序列分析第31页
     ·风信子类黄酮-3’5’-羟基化酶基因(F3’5’H)克隆序列分析第31页
   ·矮牵牛类黄酮-3’5’-羟基化酶基因HF1 的表达载体构建第31-34页
第四章 讨论第34-39页
   ·关于本研究中RNA 分离提取的技术第34页
     ·基础方法的选择第34页
     ·多糖的处理第34页
   ·关于本研究中植物材料的选择与CDNA 片段的克隆第34-37页
     ·本研究植物材料的选择第34-35页
     ·本研究cDNA 片段的克隆第35-37页
   ·关于本研究中表达载体的构建第37-39页
     ·目标cDNA 片段与表达载体的重组第37页
     ·菌落直接PCR 鉴定筛选重组子第37-38页
     ·中间表达载体的选择第38-39页
第五章 结论第39-40页
参考文献第40-46页
附录第46-49页
缩略词第49-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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