摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
·花色形成概述 | 第9-10页 |
·蓝色花的形成 | 第10-11页 |
·蓝色花色合成途径中相关基因的研究 | 第11-14页 |
·类黄酮-3’5’-羟基化酶作用机理 | 第11页 |
·同源类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的表达特性 | 第11-12页 |
·类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的分离 | 第12页 |
·类黄酮-3’5’-羟基化酶基因的应用研究 | 第12-14页 |
·植物基因克隆的几种常用方法 | 第14-16页 |
·根据已知序列或其它物种中已有序列克隆基因 | 第14页 |
·表型基因克隆法 | 第14-15页 |
·转座子标签技术 | 第15页 |
·mRNA 差异表达显示法 | 第15页 |
·植物功能基因的克隆 | 第15页 |
·DNA 芯片技术 | 第15-16页 |
·图位克隆技术 | 第16页 |
·利用生物信息学进行的电子克隆 | 第16页 |
·利用基因工程技术培育蓝色花卉的策略 | 第16-17页 |
·本研究的目的意义 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-26页 |
·试验材料 | 第19-21页 |
·植物材料 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·引物 | 第20页 |
·感受态细胞 | 第20页 |
·质粒 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-26页 |
·RNA 的提取 | 第21-22页 |
·反转录PCR 扩增 | 第22-23页 |
·PCR 产物回收 | 第23-24页 |
·连接反应 | 第24页 |
·转化大肠杆菌及筛选 | 第24-25页 |
·酶切鉴定 | 第25页 |
·菌液保存及cDNA 片段测序 | 第25-26页 |
第三章 结果与分析 | 第26-34页 |
·RNA 的提取 | 第26-27页 |
·葡萄风信子RNA 的提取 | 第26页 |
·矮牵牛和风信子总RNA 的提取 | 第26-27页 |
·对三种植物材料总RNA 进行反转录PCR | 第27页 |
·PCR 产物的回收克隆及酶切鉴定 | 第27-30页 |
·克隆CDNA 片断序列分析 | 第30-31页 |
·矮牵牛类黄酮-3’5’-羟基化酶基因(HF1、HF2)克隆序列分析 | 第30-31页 |
·矮牵牛85 蛋白编码基因(DifF)克隆序列分析 | 第31页 |
·风信子类黄酮-3’5’-羟基化酶基因(F3’5’H)克隆序列分析 | 第31页 |
·矮牵牛类黄酮-3’5’-羟基化酶基因HF1 的表达载体构建 | 第31-34页 |
第四章 讨论 | 第34-39页 |
·关于本研究中RNA 分离提取的技术 | 第34页 |
·基础方法的选择 | 第34页 |
·多糖的处理 | 第34页 |
·关于本研究中植物材料的选择与CDNA 片段的克隆 | 第34-37页 |
·本研究植物材料的选择 | 第34-35页 |
·本研究cDNA 片段的克隆 | 第35-37页 |
·关于本研究中表达载体的构建 | 第37-39页 |
·目标cDNA 片段与表达载体的重组 | 第37页 |
·菌落直接PCR 鉴定筛选重组子 | 第37-38页 |
·中间表达载体的选择 | 第38-39页 |
第五章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
附录 | 第46-49页 |
缩略词 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |