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假单胞菌M18应答调控基因ppbR的克隆及功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
前言第10-31页
 1. 假单胞菌的生物防治机理第10-17页
 2. 双元组分调控系统第17-20页
   ·GacS/GacA 双元调控系统第17-20页
     ·RsmA 和RsmE第19-20页
     ·RsmY 和RsmZ第20页
   ·PprA/PprB 双元组分调控系统第20页
 3. 菌群传感系统(Quorum Sensing System)第20-27页
   ·革兰氏阴性细菌(G-)中感知种内数量的QS 系统第21-25页
   ·革兰氏阳性细菌(G+)中感知种内数量的QS 系统第25-27页
 4. 信号分子介导的基因调控第27-28页
 5. 泳动能力和群集运动能力第28-29页
 6. 假单胞菌株M18 在生物防治方面的应用第29-30页
 7. 研究目的、内容第30-31页
   ·研究的目的第30页
   ·研究的主要内容第30-31页
第一章 假单胞菌M18ppbR 基因PCR 扩增及序列分析第31-37页
 1 材料与方法第31-33页
   ·实验培养基、抗生素及菌株第31页
   ·假单胞菌M18 基因组DNA 的提取第31-32页
   ·引物和聚合酶链式(PCR)反应第32页
   ·电泳定性检验DNA第32-33页
   ·PCR DNA 片段的回收纯化及测序第33页
   ·序列比对及分析第33页
 2 结果第33-36页
   ·M18 基因组DNA 抽提结果及ppbR 基因片段PCR 结果第33-34页
   ·序列比对及分析结果第34-36页
 3 讨论第36-37页
第二章 假单胞菌M18ppbR 基因的体外突变及突变株的构建第37-43页
 1 材料和方法第37-40页
   ·实验用菌株及质粒第37页
   ·质粒DNA 抽提操作第37-38页
   ·酶切反应和DNA 片段回收第38页
   ·连接反应第38页
   ·感受态细胞制备第38-39页
   ·感受态细胞转化第39页
   ·细菌接合转移第39-40页
   ·突变株验证第40页
 2 结果第40-43页
   ·ppbR 基因的克隆第40页
   ·ppbR 基因的体外突变第40-42页
   ·ppbR 基因突变菌株M18P 的获得和验证第42-43页
第三章 假单胞菌M18ppbR 基因对PCA 和Plt 区别性调控研究第43-52页
 1 材料与方法第43-46页
   ·菌株和质粒第43页
   ·培养基及培养条件第43页
   ·生长曲线测定及PCA 和Plt 的提取和定量测定第43-44页
   ·β-半乳糖苷酶活性测定第44-45页
   ·过表达质粒pXU32P 构建第45-46页
 2 结果第46-50页
   ·PCA 和Plt 生物合成的动力学分析第46-48页
   ·β-半乳糖苷酶活性测定结果第48-49页
   ·在M18P 菌株中ppbR 基因过表达实验结果分析第49-50页
 3 讨论第50-52页
第四章 假单胞菌M18ppbR 基因对信号分子产量的影响研究第52-55页
 1 材料与方法第52-53页
   ·实验用菌株第52页
   ·实验培养基及抗生素第52页
   ·菌株M18 发酵液中信号分子的提取第52-53页
   ·信号分子的生物检测第53页
 2 结果第53-54页
   ·信号分子生物检测结果第53-54页
 3 讨论第54-55页
第五章 假单胞菌M18ppbR 基因对运动力的影响研究第55-58页
 1 材料与方法第55页
   ·实验培养基第55页
   ·泳动能力( Swimming motility)的检测第55页
   ·群集运动能力(swarming motility)的检测第55页
   ·电镜观察第55页
 2 结果第55-56页
   ·运动力检测及电镜鞭毛观察结果第55-56页
 3 讨论第56-58页
论文总结第58-59页
参考文献第59-66页
附录实验所用试剂及仪器设备第66-68页
致谢第68-69页
发表论文第69页

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