摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
前言 | 第10-31页 |
1. 假单胞菌的生物防治机理 | 第10-17页 |
2. 双元组分调控系统 | 第17-20页 |
·GacS/GacA 双元调控系统 | 第17-20页 |
·RsmA 和RsmE | 第19-20页 |
·RsmY 和RsmZ | 第20页 |
·PprA/PprB 双元组分调控系统 | 第20页 |
3. 菌群传感系统(Quorum Sensing System) | 第20-27页 |
·革兰氏阴性细菌(G-)中感知种内数量的QS 系统 | 第21-25页 |
·革兰氏阳性细菌(G+)中感知种内数量的QS 系统 | 第25-27页 |
4. 信号分子介导的基因调控 | 第27-28页 |
5. 泳动能力和群集运动能力 | 第28-29页 |
6. 假单胞菌株M18 在生物防治方面的应用 | 第29-30页 |
7. 研究目的、内容 | 第30-31页 |
·研究的目的 | 第30页 |
·研究的主要内容 | 第30-31页 |
第一章 假单胞菌M18ppbR 基因PCR 扩增及序列分析 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
·实验培养基、抗生素及菌株 | 第31页 |
·假单胞菌M18 基因组DNA 的提取 | 第31-32页 |
·引物和聚合酶链式(PCR)反应 | 第32页 |
·电泳定性检验DNA | 第32-33页 |
·PCR DNA 片段的回收纯化及测序 | 第33页 |
·序列比对及分析 | 第33页 |
2 结果 | 第33-36页 |
·M18 基因组DNA 抽提结果及ppbR 基因片段PCR 结果 | 第33-34页 |
·序列比对及分析结果 | 第34-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
第二章 假单胞菌M18ppbR 基因的体外突变及突变株的构建 | 第37-43页 |
1 材料和方法 | 第37-40页 |
·实验用菌株及质粒 | 第37页 |
·质粒DNA 抽提操作 | 第37-38页 |
·酶切反应和DNA 片段回收 | 第38页 |
·连接反应 | 第38页 |
·感受态细胞制备 | 第38-39页 |
·感受态细胞转化 | 第39页 |
·细菌接合转移 | 第39-40页 |
·突变株验证 | 第40页 |
2 结果 | 第40-43页 |
·ppbR 基因的克隆 | 第40页 |
·ppbR 基因的体外突变 | 第40-42页 |
·ppbR 基因突变菌株M18P 的获得和验证 | 第42-43页 |
第三章 假单胞菌M18ppbR 基因对PCA 和Plt 区别性调控研究 | 第43-52页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
·菌株和质粒 | 第43页 |
·培养基及培养条件 | 第43页 |
·生长曲线测定及PCA 和Plt 的提取和定量测定 | 第43-44页 |
·β-半乳糖苷酶活性测定 | 第44-45页 |
·过表达质粒pXU32P 构建 | 第45-46页 |
2 结果 | 第46-50页 |
·PCA 和Plt 生物合成的动力学分析 | 第46-48页 |
·β-半乳糖苷酶活性测定结果 | 第48-49页 |
·在M18P 菌株中ppbR 基因过表达实验结果分析 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第四章 假单胞菌M18ppbR 基因对信号分子产量的影响研究 | 第52-55页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
·实验用菌株 | 第52页 |
·实验培养基及抗生素 | 第52页 |
·菌株M18 发酵液中信号分子的提取 | 第52-53页 |
·信号分子的生物检测 | 第53页 |
2 结果 | 第53-54页 |
·信号分子生物检测结果 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
第五章 假单胞菌M18ppbR 基因对运动力的影响研究 | 第55-58页 |
1 材料与方法 | 第55页 |
·实验培养基 | 第55页 |
·泳动能力( Swimming motility)的检测 | 第55页 |
·群集运动能力(swarming motility)的检测 | 第55页 |
·电镜观察 | 第55页 |
2 结果 | 第55-56页 |
·运动力检测及电镜鞭毛观察结果 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
论文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录实验所用试剂及仪器设备 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
发表论文 | 第69页 |