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云芝糖肽(PSP)诱导白血病细胞凋亡中死亡受体信号调控途径的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 云芝糖肽简介和细胞凋亡研究进展第10-29页
   ·云芝糖肽的药理活性第10-11页
     ·抗肿瘤活性第10页
     ·抗溃疡活性第10-11页
     ·抗病毒,抗肝炎活性第11页
     ·云芝糖肽的镇痛作用第11页
   ·细胞凋亡与抗肿瘤药物第11-14页
     ·细胞凋亡的形态学特征第11-12页
     ·凋亡的生物化学反应第12页
     ·凋亡与坏死的区别第12-13页
     ·细胞凋亡的基因调节第13页
     ·细胞凋亡与肿瘤第13-14页
   ·细胞凋亡的检测方法第14-19页
     ·形态学检测方法第14-15页
     ·生物化学检测方法第15-19页
       ·DNA 琼脂糖凝胶电泳法第15页
       ·TUNEL第15-16页
       ·流式细胞术(flow cytometry, FCM)第16-18页
       ·细胞凋亡酶活性的检测及凋亡相关蛋白分析第18-19页
   ·细胞凋亡的信号传导途径第19-27页
     ·线粒体死亡途径第19-21页
       ·线粒体死亡信号传导机制第19-20页
       ·线粒体死亡信号的调节第20-21页
     ·死亡受体信号途径第21-26页
       ·死亡受体及死亡配体第21-22页
       ·死亡受体介导的信号传导机制第22-26页
         ·Fas 信号转导机制第22-23页
         ·TNFR1 信号传导途径第23-24页
         ·TRAIL 的凋亡诱发机制第24-26页
     ·线粒体通路和死亡受体通路间的“串话”第26-27页
   ·死亡受体/死亡配体在肿瘤临床治疗上的应用前景第27页
   ·课题的研究背景,目的、意义第27-29页
第二章 材料和方法第29-38页
   ·云芝糖肽对白血病细胞增殖的抑制作用第29-31页
     ·实验材料第29-30页
       ·培养基第29页
       ·药物第29页
       ·其他试剂第29页
       ·细胞株与细胞培养第29页
       ·样品预处理第29-30页
       ·实验仪器第30页
     ·实验方法第30-31页
       ·溶液的配制第30页
       ·接种细胞第30页
       ·药物处理第30-31页
       ·生长抑制率的测定第31页
       ·统计学处理第31页
   ·云芝糖肽(PSP)诱导MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的发生第31-33页
     ·材料和仪器第31-32页
       ·试剂第31页
       ·实验仪器第31-32页
     ·实验方法第32-33页
       ·普通形态学观察第32页
       ·荧光显微镜观察第32页
         ·溶液配制第32页
         ·样本制作第32页
       ·Annexin Ⅴ/PI 双染检测凋亡率第32-33页
         ·溶液配制第32页
         ·细胞凋亡的定量检测第32-33页
       ·细胞周期及凋亡峰的检测第33页
         ·溶液配制第33页
         ·流式细胞仪分析各周期细胞百分比及细胞凋亡率第33页
   ·云芝糖肽对死亡受体途径的调控研究第33-38页
     ·材料和仪器第33-34页
       ·试剂第33-34页
       ·实验仪器第34页
     ·实验方法第34-38页
       ·Western blot 检测Caspase-8 的激活第34-36页
         ·溶液配制第34-35页
         ·蛋白样品制备第35页
         ·SDS-PAGE 凝胶电泳第35页
         ·Western 印迹法第35-36页
         ·免疫显色第36页
       ·Western blot 方法分析PSP 对白血病细胞Fas 蛋白及FADD 蛋白表达的影响第36-37页
         ·样品的制备第36页
         ·实验步骤第36-37页
       ·流式细胞仪检测PSP 对Fas/TRAIL 蛋白表达的影响第37-38页
         ·接种细胞第37页
         ·药物处理第37页
         ·上流式细胞仪前样品处理方法第37页
         ·上流式细胞仪检测第37-38页
第三章 云芝糖肽(PSP)对MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的影响第38-50页
   ·云芝糖肽对白血病细胞增殖的抑制作用第38-40页
     ·实验结果第38-40页
       ·MTT 法测定PSP 对Jurkat 细胞增殖的抑制作用第38-39页
       ·MTT 法测定PSP 对Molt-4 细胞增殖的抑制作用第39-40页
     ·讨论第40页
   ·云芝糖肽(PSP)诱导MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的发生第40-46页
     ·实验结果第40-44页
       ·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞形态学的影响第40-42页
       ·AnnexinⅤ/PI 双染定量检测结果第42-44页
       ·PSP 处理后Molt-4 细胞凋亡峰的检测第44页
     ·讨论第44-46页
   ·PSP 对MOLT-4 细胞周期的影响第46-49页
     ·流式细胞仪检测Molt-4 细胞周期实验结果第46-48页
     ·讨论第48-49页
   ·小结第49-50页
第四章 云芝糖肽对死亡受体途径的调控研究第50-67页
   ·实验结果第50-62页
     ·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞Caspase-8 蛋白表达及活化的影响第50-53页
     ·Western blot 实验表明PSP 可上调Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞Fas 蛋白的表达第53-54页
     ·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞的FADD 蛋白表达的影响第54-56页
     ·流式细胞仪进一步分析验证PSP 可上调Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞的Fas 蛋白的表达第56-59页
     ·流式细胞仪分析PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞TRAIL 蛋白表达的影响第59-62页
   ·讨论第62-66页
   ·小结第66-67页
总结第67-68页
附录第68-69页
参考文献第69-77页
致谢第77页

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