中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 云芝糖肽简介和细胞凋亡研究进展 | 第10-29页 |
·云芝糖肽的药理活性 | 第10-11页 |
·抗肿瘤活性 | 第10页 |
·抗溃疡活性 | 第10-11页 |
·抗病毒,抗肝炎活性 | 第11页 |
·云芝糖肽的镇痛作用 | 第11页 |
·细胞凋亡与抗肿瘤药物 | 第11-14页 |
·细胞凋亡的形态学特征 | 第11-12页 |
·凋亡的生物化学反应 | 第12页 |
·凋亡与坏死的区别 | 第12-13页 |
·细胞凋亡的基因调节 | 第13页 |
·细胞凋亡与肿瘤 | 第13-14页 |
·细胞凋亡的检测方法 | 第14-19页 |
·形态学检测方法 | 第14-15页 |
·生物化学检测方法 | 第15-19页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳法 | 第15页 |
·TUNEL | 第15-16页 |
·流式细胞术(flow cytometry, FCM) | 第16-18页 |
·细胞凋亡酶活性的检测及凋亡相关蛋白分析 | 第18-19页 |
·细胞凋亡的信号传导途径 | 第19-27页 |
·线粒体死亡途径 | 第19-21页 |
·线粒体死亡信号传导机制 | 第19-20页 |
·线粒体死亡信号的调节 | 第20-21页 |
·死亡受体信号途径 | 第21-26页 |
·死亡受体及死亡配体 | 第21-22页 |
·死亡受体介导的信号传导机制 | 第22-26页 |
·Fas 信号转导机制 | 第22-23页 |
·TNFR1 信号传导途径 | 第23-24页 |
·TRAIL 的凋亡诱发机制 | 第24-26页 |
·线粒体通路和死亡受体通路间的“串话” | 第26-27页 |
·死亡受体/死亡配体在肿瘤临床治疗上的应用前景 | 第27页 |
·课题的研究背景,目的、意义 | 第27-29页 |
第二章 材料和方法 | 第29-38页 |
·云芝糖肽对白血病细胞增殖的抑制作用 | 第29-31页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·培养基 | 第29页 |
·药物 | 第29页 |
·其他试剂 | 第29页 |
·细胞株与细胞培养 | 第29页 |
·样品预处理 | 第29-30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-31页 |
·溶液的配制 | 第30页 |
·接种细胞 | 第30页 |
·药物处理 | 第30-31页 |
·生长抑制率的测定 | 第31页 |
·统计学处理 | 第31页 |
·云芝糖肽(PSP)诱导MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的发生 | 第31-33页 |
·材料和仪器 | 第31-32页 |
·试剂 | 第31页 |
·实验仪器 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-33页 |
·普通形态学观察 | 第32页 |
·荧光显微镜观察 | 第32页 |
·溶液配制 | 第32页 |
·样本制作 | 第32页 |
·Annexin Ⅴ/PI 双染检测凋亡率 | 第32-33页 |
·溶液配制 | 第32页 |
·细胞凋亡的定量检测 | 第32-33页 |
·细胞周期及凋亡峰的检测 | 第33页 |
·溶液配制 | 第33页 |
·流式细胞仪分析各周期细胞百分比及细胞凋亡率 | 第33页 |
·云芝糖肽对死亡受体途径的调控研究 | 第33-38页 |
·材料和仪器 | 第33-34页 |
·试剂 | 第33-34页 |
·实验仪器 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·Western blot 检测Caspase-8 的激活 | 第34-36页 |
·溶液配制 | 第34-35页 |
·蛋白样品制备 | 第35页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第35页 |
·Western 印迹法 | 第35-36页 |
·免疫显色 | 第36页 |
·Western blot 方法分析PSP 对白血病细胞Fas 蛋白及FADD 蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
·样品的制备 | 第36页 |
·实验步骤 | 第36-37页 |
·流式细胞仪检测PSP 对Fas/TRAIL 蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
·接种细胞 | 第37页 |
·药物处理 | 第37页 |
·上流式细胞仪前样品处理方法 | 第37页 |
·上流式细胞仪检测 | 第37-38页 |
第三章 云芝糖肽(PSP)对MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的影响 | 第38-50页 |
·云芝糖肽对白血病细胞增殖的抑制作用 | 第38-40页 |
·实验结果 | 第38-40页 |
·MTT 法测定PSP 对Jurkat 细胞增殖的抑制作用 | 第38-39页 |
·MTT 法测定PSP 对Molt-4 细胞增殖的抑制作用 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40页 |
·云芝糖肽(PSP)诱导MOLT-4,HL-60 和JURKAT 细胞凋亡的发生 | 第40-46页 |
·实验结果 | 第40-44页 |
·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞形态学的影响 | 第40-42页 |
·AnnexinⅤ/PI 双染定量检测结果 | 第42-44页 |
·PSP 处理后Molt-4 细胞凋亡峰的检测 | 第44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
·PSP 对MOLT-4 细胞周期的影响 | 第46-49页 |
·流式细胞仪检测Molt-4 细胞周期实验结果 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第四章 云芝糖肽对死亡受体途径的调控研究 | 第50-67页 |
·实验结果 | 第50-62页 |
·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞Caspase-8 蛋白表达及活化的影响 | 第50-53页 |
·Western blot 实验表明PSP 可上调Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞Fas 蛋白的表达 | 第53-54页 |
·PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞的FADD 蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
·流式细胞仪进一步分析验证PSP 可上调Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞的Fas 蛋白的表达 | 第56-59页 |
·流式细胞仪分析PSP 对Molt-4,HL-60,Jurkat 细胞TRAIL 蛋白表达的影响 | 第59-62页 |
·讨论 | 第62-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
总结 | 第67-68页 |
附录 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77页 |