番鸭催乳素基因的克隆与序列分析
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| ·催乳素(PRL)的研究进展 | 第10-14页 |
| ·催乳素的结构 | 第10-12页 |
| ·催乳素的分泌 | 第12页 |
| ·PRL的功能研究 | 第12-14页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-25页 |
| ·试验材料 | 第16页 |
| ·脑垂体的采集 | 第16页 |
| ·血样采集和处理 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器与设备 | 第17页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第17-19页 |
| ·试剂盒抽提法 | 第17-18页 |
| ·酚氯仿抽提法 | 第18页 |
| ·基因组DNA含量和纯度的测定 | 第18页 |
| ·基因组DNA的电泳分析 | 第18-19页 |
| ·总RNA的提取 | 第19页 |
| ·试剂盒抽提法 | 第19页 |
| ·总RNA纯度检测 | 第19页 |
| ·总RNA电泳分析 | 第19页 |
| ·总RNA的逆转录反应 | 第19-20页 |
| ·逆转录反应试剂 | 第19页 |
| ·逆转录反应过程 | 第19-20页 |
| ·PCR反应 | 第20-21页 |
| ·引物的选用与合成 | 第20页 |
| ·PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·PCR产物的回收与检测 | 第21-22页 |
| ·回收DNA片段的克隆 | 第22-24页 |
| ·回收片段的连接 | 第22-23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·重组子筛选及插入片段的菌液PCR检测 | 第23-24页 |
| ·重组子的筛选 | 第24页 |
| ·菌液的变性处理 | 第24页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第24页 |
| ·序列测定与分析 | 第24-25页 |
| ·核苷酸序列测定 | 第24页 |
| ·序列测定结果分析与比较 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-41页 |
| ·基因组DNA的提取结果 | 第25页 |
| ·番鸭脑垂体总RNA的提取结果 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA的PCR结果 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR结果 | 第27-28页 |
| ·番鸭基因组DNA PRL基因片段的获得 | 第28页 |
| ·番鸭PRL基因cDNA片段的获得 | 第28-31页 |
| ·番鸭PRL基因cDNA编码蛋白质序列的推导 | 第31-32页 |
| ·番鸭PRL基因核苷酸序列同源性比较 | 第32-37页 |
| ·番鸭PRL基因相应的氨基酸序列同源性比较 | 第37-40页 |
| ·信号肽剪切位点分析 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-45页 |
| ·血液保存与DNA提取 | 第41页 |
| ·RNA提取 | 第41-42页 |
| ·PCR反应的影响因素 | 第42-43页 |
| ·引物的选择 | 第42页 |
| ·退火温度 | 第42-43页 |
| ·克隆测序分析 | 第43页 |
| ·番鸭PRL基因序列比较分析 | 第43页 |
| ·番鸭PRL的氨基酸序列分析 | 第43-44页 |
| ·PRL基因与就巢性状的相关性分析 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 缩略图表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
