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HCMV临床病毒株的分离及其特定基因结构分析和表达研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 前言第15-58页
 1.简介第15-16页
 2.研究背景第16-37页
   ·HCMV的生物学特征第16-23页
   ·HCMV感染导致的疾病第23-31页
   ·HCMV感染的诊断、治疗和预防第31-37页
 3.人巨细胞病毒先天性感染第37-54页
   ·人巨细胞病毒宫内感染的研究进展第37-42页
   ·先天性巨细胞病毒感染对胎儿的影响第42-44页
   ·人巨细胞病毒宫内感染对胎婴儿生长发育的影响第44-45页
   ·先天HCMV感染导致胎儿先天畸形的发病机制第45-49页
   ·先天性巨细胞病毒感染引起胎儿脑神经损伤的机制第49-54页
 4.目前关于HCMV临床低传代病毒株研究存在的问题第54-55页
 5.本研究的目的和意义第55-58页
第二章 实验仪器与材料第58-66页
 1.主要仪器第58-59页
 2.实验材料第59-66页
   ·细胞和菌种质粒第59页
   ·主要试剂第59-60页
   ·主要试剂的配方第60-63页
   ·克隆型载体图谱第63-66页
第三章 实验方法第66-78页
 1.HCMV的分离和培养第66-67页
   ·病例来源与选择第66页
   ·标本收集与处理第66页
   ·病毒的分离第66-67页
   ·病毒的培养第67页
 2.病毒DNA的提取第67-68页
 3.HCMV总RNA的提取第68页
 4.HCMV RNA的纯化第68-69页
 5.HCMV mRNA逆转录成cDNA第69-70页
 6.PCR反应的进行第70-71页
 7.回收纯化PCR或酶切产物第71-72页
 8.PCR产物和载体质粒的酶切第72页
 9.连接反应第72-73页
 10.连接产物转化宿主大肠杆菌第73-75页
 11.重组子的快速鉴定第75页
 12.质粒抽提第75-76页
 13.核酸及蛋白质序列比对与分析预测第76-78页
第四章 结果与分析第78-194页
 1.HCMV临床低传代病毒株的体外培养、分离和鉴定第78-84页
   ·人胚肺成纤维细胞培养结果第78页
   ·感染病毒后人胚肺细胞出现病变效应第78-81页
   ·HCMV临床低传代病毒株的鉴定第81-83页
   ·小结第83-84页
 2.HCMV临床低传代病毒株特有基因组区域的基因扩增第84-93页
   ·HCMV临床低传代病毒株特有基因组区域的PCR分析的引物设计第85-86页
   ·HCMV临床低传代病毒株特有基因组区域的PCR扩增结果第86-92页
   ·小结第92-93页
 3.HCMV临床低传代病毒株特有基因的克隆第93-98页
   ·HCMV临床低传代病毒株特有基因UL136基因的克隆第93-95页
   ·HCMV临床低传代病毒D3株特有基因UL137-UZ148等12个相关基因的克隆第95-96页
   ·人巨细胞病毒临床低传代病毒株特有基因UL136-UZ148基因的克隆测序第96页
   ·小结第96-98页
 4.HCMV临床低传代病毒株特有基因UZ136-UZ148的多态性分析第98-167页
   ·UL136基因及其编码蛋白的多态性分析第98-105页
   ·UL137基因及其编码蛋白的多态性分析第105-110页
   ·UL138基因及其编码蛋白的多态性分析第110-114页
   ·UL139基因及其编码蛋白的多态性分析第114-122页
   ·UL140基因及其编码蛋白的多态性分析第122-128页
   ·UL141基因及其编码蛋白的多态性分析第128-132页
   ·UZ142基因及其编码蛋白的多态性分析第132-138页
   ·UL143基因及其编码蛋白的多态性分析第138-142页
   ·UL144基因及其编码蛋白的多态性分析第142-146页
   ·UL145基因及其编码蛋白的多态性分析第146-150页
   ·UL146基因及其编码蛋白的多态性分析第150-153页
   ·UL147基因及其编码蛋白的多态性分析第153-156页
   ·UL148基因及其编码蛋白的多态性分析第156-161页
   ·小结第161-167页
 5.人巨细胞病毒临床低传代病毒株特有基因序列的表达及其编码蛋白质的分析研究第167-194页
   ·人巨细胞病毒总RNA的纯化第167-170页
   ·利用RT-PCR检测人巨细胞病毒临床低传代病毒株特有基因序列的表达第170-193页
   ·小结第193-194页
第五章 讨论第194-208页
 1.人巨细胞病毒临床病毒株的分离和培养第194-196页
   ·人巨细胞病毒宿主细胞的选择第194页
   ·样本选择第194页
   ·病毒培养第194-195页
   ·病毒传代第195-196页
   ·病毒鉴定第196页
 2.人巨细胞病毒临床毒株特有区域的基因结构分析第196-203页
   ·人巨细胞病毒临床低传代病毒株特有基因组区域的PCR分析第196-197页
   ·人巨细胞病毒临床低传代病毒株特有基因的序列分析第197-203页
 3.人巨细胞病毒临床毒株特有基因的表达第203-204页
 4.研究结论第204-206页
 5.研究创新点及不足之处第206-207页
 6.研究展望第207-208页
第六章 参考文献第208-217页
第七章 附录第217-267页
 附录1 人巨细胞病毒低传代临床病毒株UL136~UZ148的DNA和蛋白质序列第217-243页
 附录2 人巨细胞病毒临床低传代病毒UL136~UL148基因重组质粒鉴定图谱第243-256页
 附录3 人巨细胞病毒临床低传代分离株特有基因克隆结果列表第256-258页
 附录4 综述:抗人巨细胞病毒药物及其治疗研究进展第258-265页
 附录5 在校期间公开发表的论文、著作、科研项目第265-267页
致谢第267页

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